首页> 正文

化痰散结方对人乳腺癌耐药细胞的影响及机制

2020-12-11阅读(756)

化痰散结方对人乳腺癌耐药细胞的影响及机制

论文摘要

目的:通过研究化痰散结方对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR耐药相关蛋白和凋亡抑制基因表达的影响,阐发其逆转多药耐药的作用机理,为中医治疗乳腺癌化疗中普遍存在的耐药相关问题提供理论和实验依据。方法:1.化痰散结方对MCF-7/ADR细胞多药耐药相关蛋白及基因的研究1)MTT法检测化痰散结方对MCF-7/ADR细胞系的耐药逆转作用,计算耐药逆转倍数;2)流式细胞术检测含药血清作用前后MCF-7/ADR细胞表面P-gp的表达变化;3)免疫印迹技术检测化痰散结方含药血清对MCF-7/ADR细胞中MRP蛋白（多药耐药相关蛋白）表达的影响;4)RT-PCR法检测含药血清作用前后MCF-7/ADR细胞中基因MDR1及MRP1的表达变化。2.化痰散结方对MCF-7/ADR细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用1)通过克隆形成实验,观察含药血清对细胞克隆形成的影响,计算克隆形成率;2)流式细胞技术检测化痰散结方对MCF-7/ADR细胞的细胞周期的影响;3)在荧光显微镜、电子显微镜下观察含药血清作用前后细胞的形态变化;4)流式细胞技术检测化痰散结方对MCF-7/ADR细胞凋亡抑制基因Bcl-2的影响。结果:1.化痰散结方逆转MCF-7/ADR细胞多药耐药及机制研究1)化痰散结方含药血清对MCF-7/ADR细胞的增殖有明显抑制作用,并随含药血清浓度提高、作用时间延长抑制作用增强。2)化痰散结方含药血清能显著抑制MCF-7/ADR细胞P-gp的表达,与对照组比较有统计学意义（P<0.01）;10%含药血清与ADM合用组同VRP+ADM+10%正常鼠血清组比较差异无统计学意义（P>0.05）。3)ADM可诱导MRP表达上调,而含药血清可使MRP表达下降,其作用随浓度增加和作用时间的延长而增强。4)MDR1及MRP1mRNA在MCF-7/ADR细胞中高表达,化痰散结方含药血清作用于MCF-7/ADR后,MDR1及MRP1mRNA的表达下降,呈浓度依赖性。2.化痰散结方对MCF-7/ADR细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用1)随化痰散结方含药血清浓度递增,细胞克隆形成率逐渐下降。2)化痰散结方含药血清可使耐药细胞株阻滞于G0-G1期,并通过启动凋亡机制阻止耐药细胞株增殖,并呈量效关系（P<0.05）。3)化痰散结方对MCF-7/ADR细胞超微结构的影响表明随着药物浓度提高和作用时间延长,凋亡细胞的比例增高。4)化痰散结方含药血清组可显著下调细胞凋亡抑制基因Bcl-2的表达,并呈量效关系（P<0.05）。结论:1.化痰散结方作用于MCF-7/ADR细胞的耐药相关蛋白和基因,其机制可能与下调耐药细胞MDR1及MRP1的mRNA和蛋白表达,减少药物外排,增加耐药细胞内药物浓度有关。2.化痰散结方具有抑制肿瘤增殖和诱导凋亡的作用,其机制可能是作用于耐药细胞G1/S节点,使耐药细胞株阻滞于G0-G1期,下调细胞凋亡抑制基因Bcl-2的表达,通过启动凋亡机制阻止耐药细胞株增殖。

论文目录

  • 提要
  • ABSTRACT
  • 前言
  • 一、研究背景
  • 二、研究思路和方法
  • 三、理论探讨
  • 四、意义
  • 第一部分 化痰散结方逆转MCF-7/ADR 细胞多药耐药及机制研究
  • 1 化痰散结方联合ADM 对MCF-7/ADR 细胞的细胞毒作用研究
  • 1.1 实验材料
  • 1.2 实验方法
  • 1.3 实验结果
  • 2 化痰散结方含药血清对MCF-7/ADR 细胞P-gp 蛋白表达的研究
  • 2.1 实验材料
  • 2.2 实验方法
  • 2.3 实验结果
  • 3 化痰散结方含药血清对MCF-7/ADR 细胞MRP 蛋白表达的研究
  • 3.1 实验材料
  • 3.2 实验方法
  • 3.3 实验结果
  • 4 化痰散结方含药血清对MCF-7/ADR 细胞基因MDR1、MRP1 表达的研究
  • 4.1 实验材料
  • 4.2 方法
  • 4.3 结果
  • 第二部分 化痰散结方对MCF-7/ADR 细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用
  • 1 实验材料
  • 1.1 细胞系
  • 1.2 主要试剂、实验药物及试剂盒
  • 1.3 主要仪器设备
  • 1.4 主要溶液的配制
  • 2 实验方法
  • 2.1 化痰散结方联合ADM 对MCF-7/ADR 细胞克隆形成的影响
  • 2.2 化痰散结方含药血清诱导MCF-7/ADR 细胞凋亡的实验研究
  • 2.3 化痰散结方含药血清对MCF-7/ADR 细胞超微结构的影响
  • 2.4 化痰散结方含药血清对MCF-7/ADR 细胞Bcl-2 基因表达的影响
  • 讨论
  • 1 中医对乳腺癌的认识
  • 1.1 中医归属
  • 1.2 病因病机分析
  • 1.3 治疗沿革
  • 2 现代医学对乳腺癌的认识
  • 3 乳腺癌化疗多药耐药产生机理
  • 3.1 膜蛋白介导的耐药机制
  • 4 细胞凋亡与多药耐药
  • 4.1 Bcl-2 与多药耐药
  • 4.2 p53 与多药耐药
  • 4.3 c-myc 与多药耐药
  • 5 西医逆转多药耐药的研究
  • 5.1 逆转途径的研究
  • 5.2 逆转剂的研究
  • 6 中药逆转多药耐药的研究
  • 7 化痰散结方组方及功效
  • 7.1 立方依据
  • 7.2 组成及方义分析
  • 7.3 药物功效溯源
  • 7.4 现代药理研究
  • 8 实验结果分析
  • 第一部分 化痰散结方逆转MCF-7/ADR 细胞多药耐药及机制研究
  • 1 化痰散结方联合ADM 对MCF-7/ADR 细胞的细胞毒作用研究
  • 2 化痰散结方含药血清对MCF-7/ADR 细胞P-gp 蛋白表达的研究
  • 3 化痰散结方含药血清对MCF-7/ADR 细胞MRP 蛋白表达的研究
  • 4 化痰散结方含药血清对MCF-7/ADR 细胞基因MDR1、MRP 表达的研究
  • 第二部分 化痰散结方对MCF-7/ADR 细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用
  • 1 化痰散结方联合ADM 对MCF-7/ADR 细胞克隆形成的影响
  • 2 化痰散结方含药血清诱导MCF-7/ADR 细胞凋亡的实验研究
  • 3 化痰散结方含药血清对MCF-7/ADR 细胞超微结构的影响
  • 4 化痰散结方含药血清对MCF-7/ADR 细胞Bcl-2 基因表达的影响
  • 结论
  • 参考文献
  • 结语
  • 文献综述
  • 参考文献
  • 附录
  • 致谢
  • 查新报告
  • 发表的论文
  • 科研任务书
  • 详细摘要

    • 相关论文文献

    • [1].黄莺运用化痰散结法治疗顽固性皮肤病经验[J]. 江西中医药 2012(03)
    • [2].“化痰散结消瘿方”治疗非毒性甲状腺肿168例临床研究[J]. 江苏中医药 2011(02)
    • [3].化痰散结消瘿方治疗甲状腺腺瘤38例临床观察[J]. 辽宁中医杂志 2010(10)
    • [4].“痰”在甲状腺肿大发病中的作用及化痰散结法的临床应用[J]. 河南中医 2008(04)
    • [5].化痰散结法治疗亚急性甲状腺炎疗效及对患者炎症因子的影响[J]. 陕西中医 2020(08)
    • [6].化痰散结法治疗儿童腺样体肥大33例临床分析[J]. 时珍国医国药 2009(10)
    • [7].自拟化痰散结方对三阴乳腺癌新辅助化疗增敏作用的临床研究[J]. 广西中医药 2019(06)
    • [8].化痰散结方治疗囊肿型痤疮43例[J]. 现代中西医结合杂志 2009(07)
    • [9].化痰散结法在肝病治疗中的应用[J]. 河南中医学院学报 2008(06)
    • [10].益肺活血化痰散结法治疗187例肺结节临床观察[J]. 中华中医药杂志 2020(02)
    • [11].化痰散结法干预甲状腺肿相关因子表达影响的研究[J]. 中华中医药学刊 2019(08)
    • [12].通阳化痰散结法治疗代谢综合征痰证30例[J]. 福建中医药 2015(01)
    • [13].化痰散结方联合AP化疗方案治疗晚期痰湿蕴肺型肺癌的效果研究[J]. 当代医药论丛 2018(23)
    • [14].补脾益肾、化痰散结方剂治疗瘿病的效果观察[J]. 智慧健康 2019(14)
    • [15].以“脉生痰核”理论指导动脉粥样硬化研究[J]. 中医杂志 2017(03)
    • [16].甘欣锦应用扶正化痰散结法治疗初发弥漫大B细胞淋巴瘤案例探讨[J]. 湖北中医杂志 2018(03)
    • [17].活血化瘀化痰散结法治疗乳腺增生61例[J]. 实用中医内科杂志 2012(11)
    • [18].清热解毒化痰散结法治疗聚合性痤疮疗效观察[J]. 中华中医药杂志 2011(10)
    • [19].清热解毒化痰散结法对聚合性痤疮患者血液流变学及微量元素的影响[J]. 中华中医药杂志 2011(10)
    • [20].韩金凤从痰论治恶性肿瘤经验[J]. 临床医药文献电子杂志 2017(A3)
    • [21].清热败毒、活血化瘀、化痰散结治疗急性单核细胞白血病[J]. 中医临床研究 2015(15)
    • [22].化痰散结、理气解郁类中药配伍治疗甲状腺功能亢进症的疗效分析[J]. 世界最新医学信息文摘 2017(92)
    • [23].化痰散结攻毒法在恶性淋巴瘤中的应用[J]. 四川中医 2018(01)
    • [24].化痰散结方对MCF-7/ADM裸鼠移植瘤逆转耐药机理研究[J]. 潍坊医学院学报 2014(03)
    • [25].化痰散结治疗乳腺癌的研究概况[J]. 环球中医药 2019(01)
    • [26].指导乳腺癌患者口服化痰散结方对化疗前后P-gp表达的影响[J]. 齐鲁护理杂志 2010(11)
    • [27].基于网络药理学技术探讨化痰散结方对阿霉素耐药乳腺癌PI3K-Akt-mTOR信号通路相关蛋白的影响[J]. 中华中医药学刊 2018(05)
    • [28].益气化痰散结方联合XELOX化疗方案治疗晚期复发性结肠癌的临床研究[J]. 中华中医药学刊 2014(03)
    • [29].李惠林教授运用开郁化痰散结法治疗Graves病经验[J]. 世界中医药 2019(12)
    • [30].中药治疗阴茎硬结症32例[J]. 内蒙古中医药 2008(22)

    标签：;  ;  ;  ;  

    化痰散结方对人乳腺癌耐药细胞的影响及机制
    下载Doc文档

    猜你喜欢

    © 2024 毕速过 版权所有 鄂ICP备12018319号-5