小分子量热激蛋白论文-于同英

小分子量热激蛋白论文-于同英

导读:本文包含了小分子量热激蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:水稻二化螟,小分子热激蛋白,实时荧光定量,原核表达

小分子量热激蛋白论文文献综述

于同英[1](2018)在《水稻二化螟小分子量热激蛋白基因的克隆及表达分析》一文中研究指出水稻二化螟Chilo suppressalis(Walker)是最具破坏性的水稻害虫之一,主要分布在亚洲北部,非洲和南欧,目前发生在我国南部和北部,已成为我国水稻的主要害虫,已有研究显示,小分子量热激蛋白(Small heat shock proteins,sHSPs)sHSPs是一个大的,序列、结构差异大和功能上不清楚的热休克蛋白的家族。为了深入了解sHSPs对昆虫的作用机理,克隆了6条sHSPs基因,并对其表达模式进行了研究,同时还与近缘的鳞翅目种类的sHSPs基因进行比较,从分子水平上揭示sHSPs在水稻二化螟各个生长发育阶段与温度耐受性的关系,主要研究结果如下:采用RT-PCR和RACE技术,从水稻二化螟中克隆得到6条sHSPs基因,分别为Cshsp17.2,Cshsp21.3,Cshsp22.9b,Cshsp23.9,Cshsp25.7,Cshsp27.3。6条热激蛋白基因cDNA序列全长分别为813、909、872、844、1513和1036bp,开放阅读框长度分别为447、555、621、663、714和729bp,分别编码148、184、206、220、237和242个氨基酸,等电点分别为9.69、5.97、5.79、4.50、4.55和4.94。同时这6个sHSPs都含有小分子量热休克蛋白特征的保守α-晶域。序列分析发现,这6条shsps与其它物种的shsps具有很高的相似性,并在系统进化树上被归为两类。6条shsps均不含有内含子。采用qRT-PCR技术研究了水稻二化螟6条Cshsps在高低温胁迫、不同组织和不同发育阶段条件下的表达情况。结果表明高低温胁迫都能诱导Cshsps的表达,但表达情况各不相同。Cshsp22.9b,Cshsp27.3响应高温和低温胁迫。高温可以诱导Cshsp17.2的表达,但是,它不响应低温胁迫。相反情况出现在Cshsp21.3,低温可以诱导Cshsp21.3的表达,但是它不响应高温胁迫。Cshsp25.7即不响应高温胁迫,也不响应低温胁迫。Cshsp23.9低温胁迫,表达差异显着,对于高温胁迫,表达差异温和。实时定量PCR表明Cshsp21.3,Cshsp22.9b和Cshsp27.3的mRNA表达水平在脂肪体的表达量最为丰富较其他组织(头,表皮,前肠,中肠,后肠,马氏管和血细胞)。Cshsp23.9和Cshsp25.7的最高表达量在后肠。只有Cshsp17.2在不同组织的表达水平差异温和,其他5条Cshsps表达水平差异显着。6条Cshsps在水稻二化螟各发育阶段中均能表达,其中Cshsp23.9,Cshsp25.7,Cshsp27.3在雌雄蛹的表达差异无显着差异。Cshsp25.7和Cshsp27.3,Cshsp21.3的mRNA相对表达水平在3龄幼虫体内的表达量最高,Cshsp23.9,Cshsp17.2的mRNA相对表达水平在1龄幼虫体内的表达量最高。Cshsp22.9b的最高表达水平在雄蛹。PCR法扩增了热激蛋白HSP22.9b基因的ORF,并连接至PTYB12(+)表达载体,转入Escherichia coli ER2566大肠杆菌菌株中,用不同浓度的IPTG进行了诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,目的蛋白得到了稳定的表达。(本文来源于《阜阳师范学院》期刊2018-06-11)

宋杰,于同英,崔亚东,陆明星,杜予州[2](2018)在《水稻二化螟小分子量热激蛋白21.3基因的克隆和表达分析》一文中研究指出小分子量热激蛋白(sHSPs,small heat shock proteins)在昆虫中分布广泛,能影响昆虫的生长繁殖、参与多种生理过程以及增强昆虫的温度耐受性。水稻二化螟Chilo suppressalis(Walker)是水稻上的主要害虫之一,目前在我国局部稻区危害严重。为了深入了解sHSPs在水稻二化螟生长发育及温度耐受性中的功能,利用RT-PCR和RACE技术克隆出一个二化螟小分子量热激蛋白Cs HSP21.3基因。Cshsp21.3的cDNA序列全长为844 bp,其中开放阅读框(ORF)为555 bp,编码184个氨基酸,理论分子量为21.3 kDa,等电点为5.97;基因组结构分析发现,Cshsp21.3缺失内含子。实时定量PCR的实验结果表明:在脂肪体中Cshsp21.3的表达高于其它不同组织器官;在二化螟的不同发育阶段,3龄幼虫Cshsp21.3的表达水平最高,而且雌雄蛹的表达差异显着;高低温不能显着诱导Cshsp21.3的表达,说明该基因对温度胁迫不敏感。总之,Cshsp21.3与二化螟的温度耐受性之间没有密切的联系,但在二化螟的生长发育方面起着重要的作用。(本文来源于《环境昆虫学报》期刊2018年03期)

李妹芳,魏秀俭,郭尚敬[3](2018)在《转内质网小分子量热激蛋白CaHSP22.5基因甜椒植株的获得》一文中研究指出低温胁迫是喜温蔬菜和作物生产中的主要障碍因素。内质网是细胞内合成蛋白质和膜脂的重要细胞器,内质网小分子量热激蛋白与植物的耐冷性密切相关。我们克隆甜椒内质网小分子量热激蛋白(Ca HSP22.5)基因,构建真核表达载体,用农杆菌LBA4404介导初步获得10个T0代具有卡那抗性的转基因株系,开花结实获得T1代种子94粒。对获得T1代种子进行卡那抗性培养基的萌发和生长筛选,然后对T1代抗性强的转基因株系进行RT-PCR检测,鉴定获得6个转基因株系。通过叶绿素荧光分析证实,组成性表达Ca HSP22.5的转基因株系与野生型相比,显着减轻低温引起的光抑制,表明获得了抗冷性强的种质新材料。可进一步研究Ca HSP22.5的作用机制,从而指导喜温农作物的反季节栽培和育种。(本文来源于《分子植物育种》期刊2018年07期)

李妹芳,苗纪忠[4](2017)在《植物内质网小分子量热激蛋白的生物学功能》一文中研究指出介绍了植物ERs HSP的结构特点、分子伴侣活性及逆境抗性等生物学功能,并展望了该领域今后的研究方向,为深入研究植物的逆境胁迫机制以及分子水平的作物育种提供了新思路。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2017年30期)

梁潘霞,黄杏,李杨瑞[5](2016)在《甘蔗小分子量热激蛋白(sHSP)基因克隆及水分胁迫下的表达分析》一文中研究指出为甘蔗抗逆胁迫机制研究提供依据,以甘蔗叶片总RNA为模板,通过RT-PCR扩甘蔗小分子量热激蛋白(sHSP)基因的cDNA,采用生物信息学软件分析所克隆基因的编码蛋白特性,并用荧光定量PCR分析该基因的表达情况。结果表明,克隆得到的c DNA片段长度为659 bp,包括1个459 bp的开放阅读框,编码132个氨基酸。同源性分析表明,sHSP基因在14个不同植物中的一致性为69%-96%。甘蔗sHSP具有典型的HSP结构域,并且非常保守。实时荧光定量分析结果表明,随着甘蔗干旱胁迫时间的延长,sHSP基因表达量缓慢下降后明显增加,干旱胁迫加硅处理的甘蔗叶片sHSP基因表达量峰值出现比干旱处理推迟48 h。说明sHSP受到了干旱胁迫的诱导表达,同时硅能提高甘蔗抗旱性。(本文来源于《生物技术通报》期刊2016年10期)

李刚,赵霞,周路,周厚成[6](2016)在《草莓果实小分子量热激蛋白基因FaHSP17.4的克隆及表达分析》一文中研究指出为了探究小分子热激蛋白(s HSP)在草莓果实发育成熟中的作用,以及其在果实发育成熟时期和不同温度下的表达和调控模式。本试验采用RACE方法克隆了草莓Fa HSP17.4的c DNA全长序列并进行生物信息学预测分析;利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术检测其在不同温度下、不同草莓果实发育成熟期的表达水平。序列分析表明:Fa HSP17.4全长为784 bp,含有一个471 bp的完整开放阅读框(ORF),预测编码156个氨基酸,分子量为17.4 k D,p H值为6.55,属于Ⅰ型s HSP。q RT-PCR结果表明:在丰香和甜查理不同组织器官中Fa HSP17.4均有表达,在果实发育成熟期表达水平持续下降。Fa HSP17.4基因对温度的响应因品种而不同,丰香更为敏感,为30℃;而甜查理的响应温度为35℃。获得了草莓Fa HSP17.4的全长c DNA序列,其基因表达水平与果实发育成熟和温度刺激有着关系密切,推测Fa HSP17.4可能参与草莓果实的发育成熟进程。(本文来源于《分子植物育种》期刊2016年02期)

刘琴,陈伟达,高志鹏,张雨辰,陈禅友[7](2016)在《四纹豆象小分子量热激蛋白基因的鉴定与表达分析》一文中研究指出本研究利用生物信息学方法对NCBI数据库中四纹豆象(Callosobruchus maculatus)全部热激蛋白进行分析,从中鉴定出一种中央区具有典型α-晶体蛋白质结构域的小分子量热激蛋白基因,shsp27(Gen Bank编号FK669241.1)。采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测了四纹豆象4龄幼虫经不同温度(4、15、30、37℃以及4℃低温处理24 h后回复30℃)胁迫处理24 h后,shsp27 m RNA的相对表达量。分析结果表明,在4龄四纹豆象幼虫中,低温(4、15℃)与高温(37℃)胁迫处理后shsp27的相对表达量相对于对照组(30℃恒温培养组)均有上调响应,但对高温胁迫的响应程度略强,低温回复处理组的相对表达量也略高于对照组,但上升不显着,初步认为shsp27基因表达与四纹豆象耐寒热的适应性无直接相关性。(本文来源于《江汉大学学报(自然科学版)》期刊2016年06期)

陆明星,徐静,杜予州[8](2015)在《昆虫小分子量热激蛋白的研究进展》一文中研究指出昆虫小分子量热激蛋白(Small heat shock proteins,s HSPs)是最早被发现的热激蛋白,但是有关它们的研究相对较少。本文对昆虫小分子量热激蛋白的最新研究成果进行了总结,旨在引起人们对该类蛋白的关注,以便进一步研究其功能,探讨其可能的应用前景。目前研究表明:昆虫小分子量热激蛋白是其所有热激蛋白中最不保守的家族。同时,它们通常拥有一个α-晶状体结构域;分子量范围一般在12~43 ku;具有分子伴侣的活性。每种昆虫体内拥有多种s HSPs,而且其功能也各不相同。这些热激蛋白在昆虫的生长发育、生殖以及滞育等重要生命活动中起着重要的作用;同时在抵御不良环境以及适应性进化中也具有重要意义。随着研究的深入,还将会有更多的昆虫s HSPs被鉴定,它们更多的功能也将被逐渐发掘。(本文来源于《应用昆虫学报》期刊2015年06期)

CAN,Van,Toan,罗聪,董龙,刘召亮,何新华[9](2014)在《杧果低分子量热激蛋白基因MiHSP17.6的克隆及表达分析》一文中研究指出采用RT-PCR与RACE相结合的方法获得了杧果低分子量热激蛋白基因的c DNA全长序列,命名为Mi HSP17.6,Gen Bank登录号为KJ459857。序列分析显示,该基因序列全长为680 bp,其中开放阅读框为462 bp,编码154个氨基酸,5′非编码区和3′非编码区长度分别为80 bp和135 bp。杧果Mi HSP17.6与其他物种的低分子量热激蛋白同源性介于74%~82%。实时荧光定量分析表明,Mi HSP17.6在‘四季杧’不同组织器官中均表达,在果实发育的中期表达水平持续上升。高温(44℃)、低温(4℃)、盐(Na Cl)、聚乙二醇(PEG)、脱落酸(ABA)、双氧水(H2O2)和水杨酸(SA)处理均诱导该基因表达,因此推测Mi HSP17.6的功能可能与杧果果实发育和抵御逆境胁迫相关。(本文来源于《园艺学报》期刊2014年12期)

王明乐,朱旭君,王伟东,王炫清,林明露[10](2015)在《茶树小分子量热激蛋白基因CsHSP17.2的克隆与表达分析》一文中研究指出[目的]进一步了解茶树小分子量热激蛋白基因Cs HSP17.2在逆境胁迫条件下的分子生物学功能。[方法]利用RT-PCR技术从茶树‘迎霜’中克隆得到Cs HSP17.2基因,运用生物信息学软件分析其核苷酸和编码蛋白,通过Real-time PCR分析其表达模式。[结果]该基因开放阅读框长度为453 bp,编码150个氨基酸,蛋白质相对分子质量为17.2×103,理论等电点5.56;无信号肽位点,属于非分泌型蛋白;被定位于细胞质中。系统发育树分析表明,茶树Cs HSP17.2与水稻(Gen Bank登录号:P27777)和花生(ABC41131)的进化关系较近,属于小分子量热激蛋白基因家族第Ⅰ亚族。qRT-PCR分析发现,茶树Cs HSP17.2属于组成型基因;高温(38℃)处理1 h能显着提高Cs HSP17.2 mRNA的相对表达量(P<0.05);干旱(100 g·L-1PEG 6000)、高盐(200 mmol·L-1Na Cl)和外源脱落酸(200 mg·L-1ABA)处理条件下,该基因的转录水平均出现不同程度的上调。[结论]克隆得到茶树‘迎霜’小分子量热激蛋白基因Cs HSP17.2,其在花中表达量最高,且响应高温、干旱、高盐和外源脱落酸胁迫。(本文来源于《南京农业大学学报》期刊2015年03期)

小分子量热激蛋白论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

小分子量热激蛋白(sHSPs,small heat shock proteins)在昆虫中分布广泛,能影响昆虫的生长繁殖、参与多种生理过程以及增强昆虫的温度耐受性。水稻二化螟Chilo suppressalis(Walker)是水稻上的主要害虫之一,目前在我国局部稻区危害严重。为了深入了解sHSPs在水稻二化螟生长发育及温度耐受性中的功能,利用RT-PCR和RACE技术克隆出一个二化螟小分子量热激蛋白Cs HSP21.3基因。Cshsp21.3的cDNA序列全长为844 bp,其中开放阅读框(ORF)为555 bp,编码184个氨基酸,理论分子量为21.3 kDa,等电点为5.97;基因组结构分析发现,Cshsp21.3缺失内含子。实时定量PCR的实验结果表明:在脂肪体中Cshsp21.3的表达高于其它不同组织器官;在二化螟的不同发育阶段,3龄幼虫Cshsp21.3的表达水平最高,而且雌雄蛹的表达差异显着;高低温不能显着诱导Cshsp21.3的表达,说明该基因对温度胁迫不敏感。总之,Cshsp21.3与二化螟的温度耐受性之间没有密切的联系,但在二化螟的生长发育方面起着重要的作用。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

小分子量热激蛋白论文参考文献

[1].于同英.水稻二化螟小分子量热激蛋白基因的克隆及表达分析[D].阜阳师范学院.2018

[2].宋杰,于同英,崔亚东,陆明星,杜予州.水稻二化螟小分子量热激蛋白21.3基因的克隆和表达分析[J].环境昆虫学报.2018

[3].李妹芳,魏秀俭,郭尚敬.转内质网小分子量热激蛋白CaHSP22.5基因甜椒植株的获得[J].分子植物育种.2018

[4].李妹芳,苗纪忠.植物内质网小分子量热激蛋白的生物学功能[J].安徽农业科学.2017

[5].梁潘霞,黄杏,李杨瑞.甘蔗小分子量热激蛋白(sHSP)基因克隆及水分胁迫下的表达分析[J].生物技术通报.2016

[6].李刚,赵霞,周路,周厚成.草莓果实小分子量热激蛋白基因FaHSP17.4的克隆及表达分析[J].分子植物育种.2016

[7].刘琴,陈伟达,高志鹏,张雨辰,陈禅友.四纹豆象小分子量热激蛋白基因的鉴定与表达分析[J].江汉大学学报(自然科学版).2016

[8].陆明星,徐静,杜予州.昆虫小分子量热激蛋白的研究进展[J].应用昆虫学报.2015

[9].CAN,Van,Toan,罗聪,董龙,刘召亮,何新华.杧果低分子量热激蛋白基因MiHSP17.6的克隆及表达分析[J].园艺学报.2014

[10].王明乐,朱旭君,王伟东,王炫清,林明露.茶树小分子量热激蛋白基因CsHSP17.2的克隆与表达分析[J].南京农业大学学报.2015

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