半乳糖受体介导c-myc反义核酸对肝癌细胞的靶向增效作用

半乳糖受体介导c-myc反义核酸对肝癌细胞的靶向增效作用

论文题目: 半乳糖受体介导c-myc反义核酸对肝癌细胞的靶向增效作用

论文类型: 博士论文

论文专业: 内科血液学

作者: 蒋建伟

导师: 张洹

关键词: 半乳糖,反义核酸,药物敏感性,细胞,三氧化二砷,氟尿嘧啶,表阿霉素

文献来源: 暨南大学

发表年度: 2005

论文摘要: 目的 探讨半乳糖(galactose, Gal)受体介导的c-myc反义核酸(antisense oligodeoxynucleotide, ASODN)对肝癌细胞的靶向投递作用和对肝癌细胞增殖的高效抑制作用。 方法 1 细胞培养:人肝癌Bel-7402细胞,Raji淋巴瘤细胞,U937淋巴瘤细胞;培养体系:RPMI-1640培养液含10%新生牛血清,100u/mL青霉素、100μg/mL链霉素,置37℃、5%CO2培养箱培养。 2 反义核酸的合成、Gal-PEI-ASODN复合物的制备、离体靶向投递实验: (1) c-myc ASODN的合成:针对c-myc基因序列162~179设计ASODN并进行全程硫代修饰,3′端羧基荧光素FAM修饰或不修饰(上海生物工程公司合成),序列为:5′-CTT CTC GAG GCA GGA GGG-3′。 (2) 半乳糖-聚乙烯亚胺(polyethyleneimine, PEI)-c-myc反义核酸复合物(Gal-PEI-ASODN复合物)制备:采用无血清RPMI-1640液分别溶解Gal-PEI试剂和c-myc ASODN, 2:1(v/v)混匀,使两者氮磷比为5.0,得Gal-PEI-ASODN复合物。 (3) 离体靶向投递实验:取Bel-7402细胞、U937细胞或Raji细胞,加入荧光标记的ASODN、Gal-PEI-ASODN,孵育不同时间,流式细胞仪检测细胞荧光摄取率及胞内平均荧光强度的差异,相差/荧光显微镜观察荧光标记物进入3种细胞的形态,台盼蓝拒染法检测Gal-PEI-ASODN复合物对3种细胞增殖抑制作用的差异。 3 台盼蓝拒染法、细胞克隆和流式细胞术检测细胞增殖、细胞周期和坏死: 取Bel-7402细胞,加入不同浓度的Gal-PEI试剂,ASODN,Gal-PEI-ASODN,孵育不同时间,台盼蓝拒染法检测药物对细胞增殖的抑制作用,计算药物对细胞增殖的

论文目录:

中文摘要

英文摘要

前言

参考文献

第一部分 半乳糖受体介导的c-myc反义核酸对肝癌Bel-7402细胞的靶向投递作用

材料和方法

结果

讨论

参考文献

第二部分 半乳糖受体介导的c-myc反义核酸对肝癌Bel-7402细胞的增殖抑制作用

材料和方法

结果

讨论

参考文献

第三部分 半乳糖受体介导的c-myc反义核酸提高肝癌细胞对某些化疗药物敏感性

材料和方法

结果

讨论

参考文献

第四部分 半乳糖受体介导的c-myc反义核酸对小鼠肝癌移植瘤生长的影响

材料和方法

结果

讨论

参考文献

全文结论与展望

缩略词

在学期间发表论文

致谢

发布时间: 2005-10-27

参考文献

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