高脂血症及动脉粥样硬化痰瘀证候的蛋白质组学研究

高脂血症及动脉粥样硬化痰瘀证候的蛋白质组学研究

论文摘要

高脂血症及动脉粥样硬化属于中医“痰浊”、“血瘀”范畴,痰浊血瘀是高脂血症及动脉粥样硬化的重要病机早已成为共识,高脂血症及动脉粥样硬化痰瘀证候可能是机体在血浆蛋白质水平发生了某些改变产生的后果,这些发生改变的蛋白质与动脉粥样硬化、高脂血症等疾病密切相关。寻找发生改变的蛋白质与高脂血症及动脉粥样硬化痰瘀证候的关系,将有利于深刻揭示痰瘀证候的生化基础和病因病机。 本研究以国家自然基金资助的“有关中医药几个关键问题”之一的“高脂血症及动脉粥样硬化痰瘀证候的蛋白质组学”课题为依托,把中医的基础理论与前沿的现代科学技术相结合,对证候在蛋白质表达水平上的变化及可能的差异蛋白质与证候各种影响因素的相关性进行了深入的探讨。 方法 1.采集符合条件的146例高脂血症及动脉粥样硬化痰证、瘀证、痰瘀互阻证和非痰非瘀类证候(其他证型)患者及37例健康对照的血浆样品,采用GE公司的IPGphor等电聚焦仪、DALTSIX垂直电泳仪等仪器进行双向电泳。 2.利用GE公司的图像分析软件ImagmAster 2-DE platinum6.0对血浆样品的凝胶图谱进行分析。 3.利用Fisher判别法筛选差异蛋白质的典型成分及图模型分析方法对差异蛋白质进行相关性分析。 结果 1.双向电泳实验获得的电泳图谱经软件分析,对变异度在70%以上的差异蛋白质进行分析,得到以下几方面的结果: (1) 有31种差异表达的蛋白质可能是高脂血症及动脉粥样硬化的标志蛋白质群,其中有18种蛋白表达量较正常人呈现上调趋势,13种蛋白表达量呈现下调趋势。 (2) 上述31种高脂血症及动脉粥样硬化的标志蛋白在痰瘀类证候中有16种蛋白表达量较非痰非瘀类证候呈现升高趋势,15种蛋白表达量呈降低趋势。 (3) 31个差异蛋白质中,表达量最低的蛋白质分布,非痰非瘀类证候5个,痰证3个,瘀证8个;痰瘀互阻证8个,其中包含2个瘀证特有的标志蛋白,仅包

论文目录

  • 中文摘要
  • ABSTRACT
  • 英文缩略词中英文对照
  • 文献综述1
  • 文献综述2
  • 前言
  • 1.高脂血症及动脉粥样硬化痰瘀相关的理论基础
  • 2.高脂血症及动脉粥样硬化发病机制
  • 3.血浆蛋白质组学研究现状
  • 材料与方法
  • 1 研究对象
  • 1.1 病例来源
  • 1.2 诊断标准
  • 1.2.1 西医诊断标准
  • 1.2.2 中医证候诊断标准(部分)
  • 1.3 纳入标准
  • 1.4 排除标准
  • 1.5 剔除病例
  • 2 材料
  • 2.1 主要试剂
  • 2.2 主要仪器与设备
  • 3.方法
  • 3.1 技术路线
  • 3.2 样品采集
  • 3.3 临床调查表
  • 3.4 血脂水平的测定
  • 3.5 C反应蛋白水平的测定
  • 3.6 血流变的测定
  • 3.7 蛋白质含量测定
  • 3.8 双向电泳实验操作流程
  • 3.8.1 样品处理
  • 3.8.2 样品的重胀
  • 3.8.3 等电聚焦
  • 3.8.4 IPG胶条平衡
  • 3.8.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳
  • 3.8.6 染色
  • 3.8.7 扫描
  • 3.8.8 图像分析
  • 4 统计分析
  • 4.1 相关的统计分析原理
  • 4.1.1 Fisher判别分析筛选典型成分方法
  • 4.1.2 图模型
  • 结果
  • 第一部分 血浆蛋白质差异表达谱
  • 1.高脂血症及动脉粥样硬化病人血浆蛋白质差异表达
  • 2.痰瘀类证候与非痰非瘀类证候血浆蛋白质表达差异的比较
  • 3.不同证候间的血浆蛋白质差异分析
  • 4.血浆差异蛋白质表达谱在痰瘀证候中的变化规律
  • 小结
  • 第二部分 Fisher判别法分析各组间的典型成分
  • 1.正常组与病例组判别分析
  • 2.非痰非瘀类证候与痰瘀类证候判别分析
  • 3.两组间判别分析
  • 3.1 痰证与瘀证判别分析
  • 3.2 痰证与痰瘀互阻证判别分析
  • 3.3 瘀证与痰瘀互阻证判别分析
  • 小结
  • 第三部分 相关性分析
  • 1.连续变量的方差分析结果及离散变量的频数表
  • 2.差异蛋白质与不同影响因素的相关性分析
  • 2.1 区分正常和病人的典型分量的相关性分析
  • 2.2 区分非痰非瘀类证候和痰瘀类证候的典型分量的相关性分析
  • 2.3 区分痰证和瘀证的典型分量的相关性分析
  • 2.4 区分痰证和痰瘀互阻证的典型分量的相关性分析
  • 2.5 区分瘀证和痰瘀互阻证的典型分量的相关性分析
  • 本章小结
  • 讨论
  • 参考文献
  • 所使用试剂配方
  • 致谢
  • 相关论文文献

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