霍山石斛不同分子量多糖的抗氧化研究

论文摘要

本文以霍山石斛苗子为材料,采用传统提取工艺得到总多糖（ST）,利用40%,50%,60%,80%终浓度的乙醇连续沉淀总多糖溶液,得到多糖片断S1、S2、S3和S4,在O2-、·OH、H2O2、NO、DPPH、ABTS、还原力、金属螯合力、脂质过氧化、红细胞溶血和DNA损伤等不同体系下进行体外抗氧化研究,并通过HPLC、GC-MS、FT-IR分析对多糖成分进行测定。结果表明:分子量最大的多糖S1和分子量最小的多糖S4对DPPH、ABTS、·OH、H2O2、NO、脂质过氧化的清除能力,还原金属能力和对DNA的保护作用比其他多糖强。HPLC分析表明粗多糖及其片断具有不同的分子量分布,S1、S2、S3、S4和ST的平均分子量分别为479,352 Da,316,168 Da,307,411 Da,85,892 Da和252,189 Da。在GC-MS中,总多糖及其片断都由葡萄糖、半乳糖、甘露糖和阿拉伯糖组成,S1、S2、S3、S4和ST中葡萄糖、半乳糖、甘露糖和阿拉伯糖相对摩尔比分别是100.0:21.0:6.3:16.7,100.0:22.2:5.6:6.3,100.0:21.0:16.4:12.2,100.0:11.5:59.8:30.3,100.0:31.7:28.5:17.9。在霍山石斛多糖中除了存在中性多糖外,还有酸性多糖,其中糖醛酸在1%—5%范围中变化。红外光谱图显示,霍山石斛多糖具有抗肿瘤活性的β构型。这表明霍山石斛多糖的抗氧化能力与分子量和多糖结构有关。S1和S4可开发成为天然的抗氧化剂。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 致谢
• 第一章 前言
• 1.1 多糖研究进展
• 1.1.1 多糖的概念
• 1.1.2 多糖的活性功能
• 1.1.3 多糖结构与生物活性的关系
• 1.2 石斛多糖
• 1.3 论文研究的目的及技术路线
• 1.3.1 论文研究的目的
• 1.3.2 论文研究的技术路线
• 第二章 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.2 主要试剂
• 2.3 主要仪器
• 2.4 霍山石斛苗总多糖的提取及分布醇沉
• 2.5 霍山石斛多糖的抗氧化实验
• 2.5.1 清除总自由基
• 2.5.2 清除ROS自由基
• 2.5.3 清除金属离子
• 2.5.4 抗脂质过氧化
• 2.5.5 抗红细胞溶血
• 2.5.6 对 DNA损伤的保护作用
• 2.6 霍山石斛多糖成分测定
• 2.6.1 多糖的纯度及摩尔分子量测定
• 2.6.2 单糖组成成分测定
• 2.6.3 红外光谱分析
• 2.6.4 糖醛酸含量的测定
• 2.7 统计分析
• 第三章 结果与分析
• 3.1 霍山石斛苗子总多糖的提取及分布醇沉
• 3.2 清除总自由基
• 3.2.1 对DPPH总自由基的清除作用
• 3.2.2 对ABTS总自由基的清除作用
• 3.3 清除ROS自由基
• 3.3.1 对超氧自由基的清除作用
• 3.3.2 对羟基自由基的清除作用
• 3.3.3 对过氧化氢的清除作用
• 3.3.4 对NO自由基的清除作用
• 3.4 清除金属离子
• 3.4.1 金属螯合力
• 3.4.2 还原力
• 3.5 抗脂质过氧化
• 3.6 抗红细胞溶血
• 3.7 对 DNA损伤的保护作用
• 3.8 霍山石斛多糖的化学成分分析
• 第四章 讨论
• 50评定'>4.1 IC₅₀评定
• 4.2 多糖分子量与生物活性的关系
• 4.3 多糖成分与生物活性的关系
• 第五章 结论
• 参考文献