川芎提取物制备工艺与质量控制研究

论文摘要

川芎为伞形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根茎,为川产特色优势药材。川芎提取物市场商品有川芎总提物和川芎油两种,作为原料或添加剂已广泛应用于医药制剂、保健品等。鉴于川芎提取物生产厂家多,目前的生产规范和质量标准参差不齐,本研究对川芎总提取物和川芎油的制备工艺及质量控制方法进行了系统研究,主要研究内容及结果如下：1.化学对照品的分离鉴定从川芎中分离筛选作为川芎药材和提取物质量控制研究的指标成分。应用色谱法从川芎乙醇提取物中分离得到5个化合物,对其中4个化合物应用UV、1H-NMR、13C-NMR等波谱方法进行了鉴定,为别为：Z-藁本内酯、β-谷甾醇、Z-6,8’,7,3’-二聚藁本内酯、Z,Z’-6,6’7,3’a-二聚藁本内酯。其中Z-藁本内酯得率为0.025%,可作为川芎药材及提取物质量标准研究对照品。2.药材质量标准研究对药材按《中国药典》2005版一部川芎项下有关规定进行了质量检查,均符合相关规定。在此基础上,研究建立了川芎中藁本内酯的HPLC含量测定方法,该方法简便、快速、重现性好,通过测定10批药材样品,藁本内酯的含量在0.52-0.74%之间。3.系统研究了川芎总提物制备工艺川芎总提物主要组成为酚酸类成分,该类成分在乙醇中溶解性较好,工业生产常采用乙醇提取、大孔吸附树脂纯化制备,能使该类成分得到有效富集。提取工艺研究采用溶剂法提取,以阿魏酸为指标,对提取方法、提取溶媒进行了单因素考察,在此基础上结合三因素三水平正交设计,考察了乙醇用量、提取时间、提取次数等影响因素,结果以8倍量70%乙醇回流提取2次,每次1.5h为优。纯化工艺研究提取液采用大孔吸附树脂纯化,以阿魏酸的静态吸附率和解析率为指标,考察了5种大孔吸附树脂对川芎酚酸的吸附性能,以优选的树脂型号考察了影响树脂动态吸附和解析的相关因素,确定纯化工艺为：采用AB-8大孔吸附树脂,吸附阶段上柱药液浓度为0.2 g（生药）／mL、比上柱量4.5 g／g（药材：干树脂）,解析阶段以蒸馏水6 BV、40%乙醇4BV依次洗脱,弃去水洗脱部位,收集40%乙醇洗脱部位,阿魏酸洗脱率高于80%,精制度达到843.95%。干燥成型工艺研究纯化洗脱液浓缩至稠膏,45℃真空干燥成松脆状,粉碎成细粉,即得,得率约1.4%。4.系统研究了超临界C02提取川芎油制备工艺工业生产川芎油常采用超临界C02萃取,以提取率和提取油中藁本内酯含量为共同指标综合评分（40：60）,三因素三水平正交设计试验,考察了提取过程的主要影响因素：萃取温度,萃取压力、萃取时间,优化提取条件为萃取温度40°C,萃取压力25Mpa,萃取时间2.5h,解析温度为40°C,解析压力为6-8MPa,C02流量20L／h,该条件下提取率约为1.6%,藁本内酯含量约为28%。对超临界C02萃取和水蒸气蒸馏所得川芎油进行GC／MS成分比较分析,结果表明,两种方法提取率和所得川芎油成分均存在较大差异。5.首次研究建立了川芎总提物质量控制标准对总提物性状、鉴别、检查、含量测定等质量控制项进行了研究。建立了TLC鉴别方法；对水分、炽灼残渣、重金属、砷盐、大孔吸附树脂残留等作了检查；建立了阿魏酸HPLC含量测定方法和总酚酸氯化铁-铁氰化钾比色法含量测定方法,通过对10批样品的测定,各批次含量基本稳定,暂定阿魏酸含量不少于4.0%,总酚酸含量不少于13.0%。起草了川芎总提物质量标准草案。6.首次建立了川芎油质量控制标准对川芎油的性状、鉴别、含量测定等质量控制项进行了研究。建立了TLC鉴别方法和藁本内酯HPLC含量测定方法。通过对10批川芎油进行测定,相对密度范围在0.9684-0.9948,折光率范围在1.493-1.509,藁本内酯含量基本稳定,暂定标准为不少于25%。起草了川芎油质量标准草案。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 1 前言
• 1.1 中药提取物研究进展
• 1.1.1 中药提取物发展现状
• 1.1.2 中药提取物生产工艺研究
• 1.1.3 中药提取物的质量控制研究
• 1.2 川芎及其提取物研究进展
• 1.2.1 化学成分
• 1.2.2 川芎药理作用
• 1.2.3 川芎提取物概况
• 1.3 立题依据
• 1.4 研究工作内容
• 1.4.1 化学对照品的分离鉴定
• 1.4.2 药材质量标准研究
• 1.4.3 川芎提取物制备工艺研究
• 1.4.4 川芎提取物质量控制标准研究
• 2 实验部分
• 2.1 实验仪器与材料
• 2.1.1 实验仪器
• 2.1.2 实验材料
• 2.1.3 药材
• 2.2 对照品的分离鉴定
• 2.2.1 化学成分的提取分离
• 2.2.2 化学成分的结构鉴定
• 2.2.3 对照品的筛选和纯度检查
• 2.2.4 小结
• 2.3 药材质量标准研究
• 2.3.1 川芎药材中藁本内酯的 HPLC 含量测定
• 2.4 川芎提取物制备工艺研究
• 2.4.1 川芎总提物制备工艺研究
• 2.4.2 川芎油的提取工艺研究
• 2.5 川芎提取物质量控制标准研究
• 2.5.1 川芎总提物质量控制标准研究
• 2.5.2 川芎油质量控制标准研究
• 3 结论与讨论
• 参考文献
• 致谢
• 附
• 1 附图
• 2 附攻读硕士学位期间从事的科研工作及论文发表情况