论文摘要
目的:探讨人脐血部分体外扩增与第三者成人骨髓间充质干细胞共同移植对亚致死量照射的NOD/SCID小鼠早期造血重建的作用,旨在解决单份脐血造血干/祖细胞数量的不足难以满足高体重患者移植的需要以及脐血移植后早期植入延迟,从而拓宽脐血移植临床应用范围。 方法:冻存的单份人脐血复苏后,以单只小鼠输注2.0×104个脐血CD34+细胞,即输注1.05×107个脐血有核细胞为最低移植细胞数,其1/4量、1/6量分别在含有SCF、FL、TPO及IL-3的无血清无基质培养基中体外扩增7天。用Ficoll淋巴分离液从第三者成人骨髓中分离出单个核细胞,然后通过离心法和贴壁法富集出间充质干细胞并连续体外培养传代至第3代。单纯CB、扩增CB和MSC以单独或不同联合方式移植于亚致死量（400cGy,200cGy/min）照射后的NOD/SCID小鼠,FCM检测移植后2周小鼠骨髓、脾脏及外周血中的人CD45+、CD34+、CD33+、CD71+和CD19+细胞的表达,细胞计数仪测定其WBC、RBC、Hb、Plt的含量。 结果:CB复苏后细胞活性为95%,CD34+细胞含量为0.19%。体外扩增培养7天,不同比例的CBNC（1/4、1/6）分别扩增了1.37倍、1.26倍,其CD34+细胞分别扩增了1.13倍、1.30倍。原代BM MSC培养富集7天后得到5×105个,传代培养至第3代时,获得1.8×108个,富集了360倍,细胞CD34、CD45表达阴性。移植后2周,各实验组小鼠脾脏很少表达CD45+、CD34+细胞,外周血较少表达CD45+、CD34+细胞,骨髓CD45+细胞表达较多而CD34+细胞表达较少。与未扩增脐血移植组比较,脐血部分体外扩增移植组小鼠BM中表达人CD45+细胞较多,但无显著性差异（q-检验:P>0.05）;脐血部分体外扩增与MSC共同移植组小鼠BM中CD45+细胞表达率最高,有显著性差异（q-检验:P<0.05）。各组小鼠骨髓、脾脏及外周血未发现表达CD33+、CD71+和CD19+细胞。脐血部分体外扩增与MSC共同移植后2周,部分小鼠Plt计数恢复至照射前水平,与其它各组比较,均有显
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