禽用益生菌的分离鉴定、酶的性质研究及其初步应用

禽用益生菌的分离鉴定、酶的性质研究及其初步应用

论文摘要

滥用抗生素已经成为当今畜牧业的一个重大问题,科研工作者正努力寻找抗生素的替代品。益生菌是一种非致病性的微生物,是近年来发展起来的一种新型饲料添加剂。大量实践及研究表明,多种芽孢杆菌对动物正常生理状态的维持和生长都有重要意义,是益生菌菌种开发的重要来源。本研究依据常规的酶活测定法,从微生态制剂、健康雏鸡的肠道和土壤中分离筛选出三株菌(B、N和WS-3L)作为益生菌的有用添加菌。用针对细菌域通用引物,特异性扩增细菌的16SrDNA片段,对菌株进行分子生物学鉴定,分别为蜡样芽孢杆菌、乳酸杆菌和地衣芽孢杆菌。同时,通过培养条件和培养基优化试验,初步确定其最佳培养基为1%豆饼粉,0.5%鱼粉,0.5%玉米淀粉,0.5%半乳-甘露糖,0.5%NaCl。同时,本试验还对芽孢杆菌WS-3L菌株产生的微生物酶(α-淀粉酶)的性质进行了研究。结果表明,产生的α-淀粉酶AmyL经过多步纯化,酶的回收率为15.5%,比活提高了345倍。该酶的最适反应温度为45℃,最适反应pH为6.5,在pH7.0~8.0,40℃以下酶活较稳定;离子cu2+、NH4+、Ag+、Hg+、EDTA和SDS对酶活力有显著抑制作用,而其他一些常见金属离子如Na+、K+则对酶活影响不大。玉米淀粉对AmyL有很高的吸附率,预示这可以作为快速固定该酶的一个简易方法应用到实际生产中。通过设计雏鸡试验,将三株益生菌(B、N和WS-3L)和其产生的酶作为一种新的添加剂使用,对蛋雏鸡的生长性能有一定的促进作用。能提高饲料利用率,促进动物的生长,并能增强蛋雏鸡抗病能力,减少死淘率。因此,作为一种新型的微生态制剂其具有良好的开发潜力,能够提高动物的生长性能。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第一章 文献综述
  • 1 动物益生菌的研究进展
  • 1.1 益生菌的发展历史及应用现状
  • 1.2 肠道微生物生态系统及菌群失调
  • 1.3 益生菌改善肠微生物生态学的作用机制
  • 1.4 益生菌的筛选标准
  • 1.5 益生菌制剂
  • 1.6 益生菌的应用效果
  • 2 微生物酶制剂的应用研究
  • 2.1 饲用微生物酶制剂的种类及其微生物来源
  • 2.2 饲用微生物酶制剂的作用机制
  • 2.3 饲用微生物酶制剂在饲料中的应用研究现状
  • 2.4 饲用酶制剂的注意事项
  • 3 本课题研究的意义和主要内容
  • 第二章 益生菌的分离、鉴定及培养优化
  • 1 材料与方法
  • 1.1 材料
  • 1.2 方法
  • 2 结果与分析
  • 2.1 酶活的测定结果
  • 2.2 菌的生长曲线
  • 2.3 菌落的形态学特征
  • 2.4 菌的分子生物学鉴定
  • 2.5 菌的培养
  • 3 讨论
  • 3.1 益生菌的种属特异性
  • 3.2 益生菌的鉴定方法
  • 3.3 培养基的优化
  • 4 小结
  • 第三章 α-淀粉酶性质的研究
  • 1 材料与方法
  • 1.1 材料
  • 1.2 方法
  • 2 结果与分析
  • 2.1 酶的纯化结果
  • 2.2 酶的水解性质
  • 2.3 pH和温度对酶活力和稳定性的影响
  • 2.4 化学试剂对酶活力的影响
  • 2.5 不同淀粉对酶的吸附率
  • 3 讨论
  • 3.1 温度、PH对酶活的影响
  • 3.2 金属离子对酶活的影响
  • 4 小结
  • 第四章 益生菌和酶结合对产蛋雏鸡的初步应用
  • 1 材料与方法
  • 1.1 材料
  • 1.2 试验方法
  • 2 结果与分析
  • 3 讨论
  • 4 小结
  • 参考文献
  • 附录A
  • 致谢
  • 作者简介
  • 相关论文文献

    标签:;  ;  ;  ;  ;  ;  ;  

    禽用益生菌的分离鉴定、酶的性质研究及其初步应用
    下载Doc文档

    猜你喜欢