HCMV先天性中枢神经系统潜伏感染老年BALB/c小鼠模型的建立

HCMV先天性中枢神经系统潜伏感染老年BALB/c小鼠模型的建立

论文摘要

目的:本研究以HCMV AD169(human cytomegalovirus AD169)接种至8周龄BALB/c雌雄小鼠腹腔后,交配,所生子鼠经严格监测一年后,建立了HCMV先天性中枢神经系统潜伏感染老年小鼠模型,为探讨HCMV先天性中枢神经系统潜伏感染导致的脑损伤机制,构建重要的实验平台。方法:将HCMV 1×105PFU/ml,1.0ml分别接种至8周龄SPF级BALB/c雌雄小鼠腹腔后,按雌、雄1:1配成9对,所生小鼠随机取24只为A组,饲养一年后随机均分成A1、A2两组,其中A2组为体内激活组,腹腔注射环磷酰胺(环磷酰胺剂量150mg/kg,每6天1次,共3次);DMEM对照组:DMEM 1.0ml,接种至8周龄SPF级BALB/c雌雄小鼠腹腔后,按雌、雄1:1配成9对,所生小鼠随机取24只为B组,饲养一年后随机均分成B1、B)2组,其中B2组为体内激活对照组,腹腔注射环磷酰胺,注射剂量及次数等同实验组,在最后一次注射环磷酰胺后的第6天处死小鼠,以上各组小鼠均在屏蔽系统中饲养。实验期间密切观察小鼠一般行为特征和小鼠体重变化,取血清进行了HCMV特异性IgG抗体的检测。处死子代小鼠取脑组织进行了如下实验:1、小鼠脑组织匀浆的病毒分离;2、PCR和RT-PCR检测子代小鼠脑组织中HCMV IE、UL83基因及其转录产物;3、免疫组化检测脑组织中pp65蛋白的表达;4、小鼠脑神经细胞与HF细胞共培养体外激活实验;5、HE染色观察小鼠脑组织病理变化:6、透射电镜下观察小鼠脑组织的超微结构及病毒颗粒。并以免疫电镜确定是否为HCMV。结果:1、病毒感染组子代小鼠体重较对照组体重明显减轻(P<0.01),且发育迟缓;2、病毒学检测结果:体内激活前,病毒分离为阴性;脑组织中能测出HCMV IE及UL83 DNA但其相应的转录产物为阴性;免疫组化检测脑组织中无

论文目录

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  • 前言
  • 材料方法
  • 结果
  • 讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 附录一:个人简历
  • 附录二:致谢
  • 附录三:综述
  • 参考文献
  • 相关论文文献

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