论文摘要
第一部分： Toll样受体在人眼角膜上皮细胞的表达和功能研究 目的 探讨Toll样受体（Toll-like receptors，TLRs）1～TLR9在人眼角膜上皮及角膜上皮细胞系的表达及其功能。 材料和方法 用半定量RT-PCR方法检测20例健康青年人角膜上皮组织标本、永生化人眼角膜上皮细胞系（THCE）细胞及健康人外周血单个核细胞（PBMCs）的TLR1～TLR9 mRNA表达；免疫印记（Western blot）和免疫细胞化学方法检测人角膜上皮组织和角膜上皮细胞系THCE的TLR2和TLR4蛋白质表达及分布；用TLR3的配体聚肌胞苷酸（PolyI：C，1000g／ml）和TLR4的配体绿脓杆菌脂多糖（LPS，100ng／ml）刺激THCE细胞，于刺激后1h，2h，4h，8h分别收集细胞培养上清，用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测其IL-8的变化。结合TLR4抗体封闭实验，研究TLRs在人眼角膜上皮细胞的表达及其功能。 结果 20例角膜上皮组织的RT-PCR结果显示：TLR1-TLR3，TLR5，TLR6及TLR9在人眼角膜上皮细胞为强表达，TLR7和TLR8弱表达，TLR4微弱表达。20例标本中1例TLR3，TLR4，TLR6及TLR8为阴性表达，1例TLR5微弱表达。THCE细胞与人眼角膜上皮组织有相似的TLRs表达谱；Western blot及免疫细胞化学结果显示人眼角膜上皮组织及THCE在蛋白质水平表达TLR2及TLR4；刺激实验显示LPS和PolyI：C刺激THCE后其培养上清中的IL-8浓度明显上升，8h时分别达到对照组的10倍（P＜0.05）和7倍（P＜0.05）。抗体封闭TLR4明
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