乳房炎奶牛乳汁体细胞数与主要急性期蛋白和相关酶的相关性研究

论文摘要

本实验将8头正常奶牛和22头自发性乳房炎奶牛的混合乳样按照LMT和临床检查及乳汁体细胞数（Somatic Cell Count,SCC）分为:对照样品组（SCC<10万/ml）、亚临床型样品组（SCC<50万/ml）和临床型样品组（SCC>50万/ml）3组,再对样品中血清淀粉样蛋白A（Serum amyloid A,SAA）、结合珠蛋白（Haptoglobin,HP）、α1-酸性糖蛋白（α1-acid glycoprotein,AGP）、乳酸脱氢酶（Lactate Dehydrogenase,LDH）和N-乙酰-β-D氨基葡萄苷酶（N-acety1-β-D-glucosaminidase,NAG） 5项指标进行检测。用SPSS13.0软件对数据进行统计学分析。结果表明,3组样品中SAA和AGP的浓度均不存在显著差异;对照样品和亚临床型样品组LDH和NAG活力差异显著（P值均小于0.05）,但HP不存在差异性（P>0.05）;亚临床型样品和临床型样品组HP和LDH差异极显著（P值均小于0.01）,NAG差异显著（P<0.05）;对照样品和临床型样品组HP、LDH和NAG差异均极显著（P值均小于0.01）。然后将这6项指标进行相关性分析,发现SAA、AGP与乳汁SCC的相关性并不明显,而HP、LDH和NAG分别与乳汁SCC呈极显著正相关性（相关系数分别为0.406、0.730和0.750）,并且HP、LDH和NAG相互之间也存在极显著的正相关关系,再将HP、LDH和NAG 3项指标分别与lgSCC建立直线回归方程。最后将这6项指标进行受试者工作特征曲线（Receiver Operating Characteristics,ROC）分析,发现在对不同类型乳房炎乳进行检测时,乳汁SCC具有中等诊断价值,SAA和AGP具有较低诊断价值,HP在临床型样品的检测中具有中等诊断价值,而LDH和NAG在对不同类型乳房炎乳进行检测时,都具有较高诊断价值,其中LDH还略高于NAG。本实验说明乳汁SAA和AGP浓度均不是奶牛乳房炎的敏感指标,而乳汁HP浓度及乳清LDH和NAG活性均能客观反映奶牛乳腺感染的严重程度,并建议将LDH和NAG作为不同类型乳房炎乳的敏感指标,将乳汁HP作为乳样中超过50×104/ml的检测指标。在进行乳房炎鉴别诊断时,可将乳清LDH或NAG活力测定作为鉴别方法,也可将乳汁SCC和乳汁HP浓度检测方法相结合,获得较高的诊断价值。

论文目录

• 摘要
• Summary
• 第一章 综述部分
• 1 奶牛乳房炎的研究进展
• 1.1 奶牛乳房炎的定义
• 1.2 奶牛乳房炎的发病规律
• 1.3 奶牛乳房炎对产奶量和营养成分的影响
• 1.3.1 对产奶量的影响
• 1.3.2 对营养成分的影响
• 1.4 奶牛乳房炎的经济损失和主要危害
• 1.4.1 经济损失
• 1.4.2 主要危害
• 2 乳房炎的几种诊断方法及研究进展
• 2.1 乳汁SCC
• 2.1.1 乳汁SCC 升高的原因
• 2.1.2 影响乳汁SCC 的主要因素
• 2.1.3 乳汁SCC 作为衡量奶牛乳房炎指标的不足之处
• 2.2 PH 值
• 2.3 三磷酸腺苷
• 2.4 乳糖
• 2.5 乳汁电导率测定
• 2.6 乳汁的细菌培养
• 2.7 PCR 检测方法
• 2.8 桶奶分析法
• 2.9 酶
• 2.10 其他检测指标
• 3 急性期蛋白及其在奶牛乳房炎时的变化
• 3.1 急性期蛋白的分类
• 3.2 急性期蛋白的合成机理
• 3.3 急性期蛋白的检测方法
• 3.4 奶牛几种急性期蛋白的产生及功能
• 3.4.1 HP
• 3.4.2 SAA
• 3.4.3 AGP
• 3.4.4 C-反应蛋白
• 3.5 急性期蛋白的诊断意义
• 3.6 急性期蛋白的应用现状
• 3.7 急性期蛋白与奶牛乳房炎的发生
• 4 酶
• 4.1 乳酸脱氢酶
• 4.1.1 LDH 的生理功能
• 4.1.2 影响LDH 活性的因素
• 4.1.3 LDH 在疾病诊断方面的意义及应用
• 4.1.4 LDH 及其同功酶在奶牛方面的研究现状
• 4.2 N-乙酰-Β-D 氨基葡萄苷酶
• 4.2.1 NAG 的生理功能
• 4.2.2 NAG 在疾病诊断方面的应用意义
• 4.2.3 NAG 在奶牛方面的研究现状
• 5 本论文的研究意义及目的
• 第二章 实验部分
• 1 实验材料
• 1.1 实验动物的选择
• 1.1.1 临床检查
• 1.1.2 LMT 检测
• 1.2 样品的采集
• 2 检测项目及方法
• 2.1 乳汁SCC 的检测
• 2.1.1 试剂及仪器
• 2.1.2 方法
• 2.2 APP 的检测
• 2.2.1 试剂及仪器
• 2.2.2 检测原理
• 2.2.3 检测方法
• 2.2.4 样品浓度的计算
• 2.3 酶的检测
• 2.3.1 试剂及仪器
• 2.3.2 乳清的提取
• 2.3.3 LDH 活力的测定
• 2.3.4 NAG 活力的测定
• 2.4 ROC 曲线分析
• 2.4.1 ROC 曲线分析的原理
• 2.4.2 ROC 曲线分析的应用意义
• 2.4.3 ROC 曲线分析在本实验中的应用
• 3 统计分析
• 4 结果
• 4.1 乳汁SCC 的变化
• 4.2 乳汁APP 的变化
• 4.3 乳清LDH 和NAG 的变化
• 4.4 SCC、SAA、HP 和AGP 的变化趋势
• 4.5 各检测指标间的相关性分析
• 4.6 HP、LDH、NAG 和SCC 的回归方程
• 4.7 ROC 曲线分析
• 5 讨论
• 5.1 关于本实验中样品采集方案的确定
• 5.2 乳汁SCC 和LMT 检测结果的差异
• 5.3 对乳汁进行APP 检测的意义
• 5.4 APP 检测在评价奶牛乳房炎方面的应用
• 5.5 LDH 和NAG 在评价奶牛乳房炎方面的作用
• 5.6 SCC、SAA、HP 和AGP 的变化趋势
• 5.7 各检测指标间的相关性分析
• 5.8 建立回归方程的意义
• 5.9 ROC 曲线分析
• 6 结论
• 致谢
• 参考文献
• 英文缩写对照表
• 导师简介
• 作者简介