采后黄冠梨有机酸变化及代谢酶调控研究

论文摘要

论文以采后黄冠梨为试验材料,采用2% CaCl2处理和1%普鲁兰多糖涂膜处理,通过对贮藏期间不同处理的黄冠梨果肉和果皮中苹果酸和柠檬酸含量和代谢相关酶活性变化进行研究,确定了梨果实采后苹果酸和柠檬酸代谢途径中的调控关键酶,为进一步阐明采后梨果实有机酸代谢机理提供依据。研究优化了梨果实有机酸液相色谱分析条件。流动相:0.01mol/L K2HPO4磷酸盐缓冲液（pH 2.55,用磷酸调配）和3%甲醇;检测器:紫外检测器,波长210 nm,柱温30℃;流速:0.5 mL/min。不同处理对梨果实生理指标影响研究表明:普鲁兰多糖和钙处理均能够明显抑制梨果实呼吸作用,降低果皮和果肉的可滴定酸含量,进而延缓黄冠梨果实后熟和衰老进程,改善梨果实采后品质。不同处理对苹果酸、柠檬酸含量变化影响研究表明:普鲁兰多糖处理和钙处理改变黄冠梨果实苹果酸含量变化趋势,降低果实中柠檬酸的含量。钙处理对黄冠梨果肉中苹果酸含量有显著影响（p<0.05）。而两种处理对果实柠檬酸的影响均未达到显著水平。苹果酸代谢过程中3种相关酶NAD-MDH、NADP-ME和PEPC活性变化研究显示,采后梨果实中NAD-MDH活性最大。不同组织（果肉和果皮）中苹果酸含量与NAD-MDH活性之间的相关性达到显著水平。NADP-ME活性与苹果酸含量呈负相关关系,其相关性在果肉中达到显著水平。各个处理间PEPC活性与苹果酸含量均没有明显的相关性。结果表明,NAD-MDH和NADP-ME为采后黄冠梨果实苹果酸代谢调控的关键酶。柠檬酸代谢过程中5种相关酶NAD-IDH、PEPC、CS、Mit-ACO、Cyt-ACO活性变化研究显示, PEPC、CS显著影响采后果实柠檬酸含量的变化。Mit-ACO、Cyt-ACO、NAD-IDH与柠檬酸含量均呈负相关关系,但未达到显著水平。结果表明,PEPC和CS为采后黄冠梨果实柠檬酸代谢调控中的关键酶。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 目录
• 第一章 文献综述
• 1.1 梨的概述
• 1.2 黄冠梨简介
• 1.3 梨果实保鲜技术
• 1.3.1 钙处理对梨果实影响
• 1.3.2 普鲁兰多糖处理对梨果实影响
• 1.4 果实有机酸代谢机理研究
• 1.4.1 果实中的有机酸
• 1.4.2 苹果酸代谢相关酶
• 1.4.3 柠檬酸代谢相关酶
• 1.4.4 果实中柠檬酸及苹果酸调控
• 1.5 高效液相色谱在果实有机酸分析中的应用
• 1.6 本研究背景、目的及意义
• 1.7 本研究主要内容及技术路线
• 第二章 材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.2 试验材料处理
• 2.2.5 主要试剂药品
• 2.2.6 处理方法
• 2.3 试验方法
• 2.3.1 呼吸强度测定
• 2.3.2 可滴定酸测定
• 2.3.3 果实中苹果酸、柠檬酸的HPLC 分析
• 2.3.4 酶活性测定
• 2.4 统计分析软件
• 第三章 结果与分析
• 3.1 样品高效液相色谱分析
• 3.1.5 液相色谱图
• 3.1.6 标准曲线绘制
• 3.2 采后果实呼吸强度变化
• 3.3 采后果实有机酸含量变化
• 3.3.1 可滴定酸（TA）含量变化
• 3.3.2 苹果酸含量变化
• 3.3.3 柠檬酸含量变化
• 3.3.4 苹果酸与柠檬酸含量相关性分析
• 3.4 苹果酸代谢相关酶活性变化
• 3.4.1 苹果酸脱氢酶（NAD-MDH）活性变化
• 3.4.2 苹果酸酶（NADP-ME）活性变化
• 3.4.3 PEPC 活性变化
• 3.4.4 不同处理中酶活性差异性分析
• 3.4.5 苹果酸与代谢酶相关性分析
• 3.5 柠檬酸代谢相关酶活性变化
• 3.5.1 柠檬酸脱氢酶（NAD-IDH）活性变化
• 3.5.2 线粒体乌头酸酶（Mit-ACO）活性变化
• 3.5.3 细胞质乌头酸酶（Cyt-ACO）活性变化
• 3.5.4 柠檬酸合酶（CS）活性变化
• 3.5.5 PEPC 活性变化
• 3.5.6 不同处理中同种酶的差异性分析
• 3.5.7 柠檬酸与代谢酶相关性分析
• 第四章 讨论与展望
• 4.1 采后黄冠梨生理变化特点
• 4.2 有机酸和调控酶相关性分析
• 4.2.1 相关系数与多元性分析
• 4.2.2 苹果酸与调控酶的关系
• 4.2.3 柠檬酸与其调控酶
• 4.3 不同处理对梨果实有机酸代谢相关酶影响
• 第五章 全文结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 附录
• 致谢