槐花多糖的分离纯化与抗氧化活性研究

论文摘要

本文以中药槐花（Sophora japonica.）为实验对象,对其中多糖的分离纯化及理化特性进行了研究,获得如下结论:1.采用热水浸提法提取槐花多糖,正交试验得出最佳提取条件为:提取温度80℃、料液比1:25、提取时间6h、提取次数4次。在该工艺条件下多糖的提取率达3.40%。2.采用酶法提取槐花多糖,正交试验得出最佳提取条件为:提取温度45℃,提取时间1h,酶用量2%,提取pH值4.5。在该工艺条件下多糖的提取率为5.94%。3.槐花多糖脱除蛋白的最佳方法为胰蛋白酶+Sevag法。此法对蛋白的清除能力最强,蛋白清除率可达85.23%,同时多糖损失率也最小。4.多糖经DE-52离子交换纤维素柱分离出SJPS1、SJPS2和SJPS3三种组分,其纯度鉴定采用高效液相色谱法和Sepharose CL-6B凝胶柱层析法,结果表明三种组分均为均一组分。5.气相色谱、理化特性分析结果表明,SJPS1主要由鼠李糖、果糖、阿拉伯糖和木糖组成,分子量为10.85kD,比旋光度+41.6°;SJPS2主要由鼠李糖、果糖和阿拉伯糖组成,分子量为7.72kD,比旋光度+128.7°;SJPS3主要由鼠李糖、果糖组成,分子量为2.88kD,比旋光度+80.1°。6.抗氧化活性测定结果表明,槐花多糖不仅具有很强的还原能力,而且对超氧阴离子自由基、羟基自由基均有较好的清除能力,且在一定范围内对二者的清除作用呈现良好的量效关系。槐花多糖具有的抗氧化活性使其有望作为天然抗氧化剂和食品功能性成分而得到开发应用,具有较高的研究开发价值。本实验对槐花多糖的分离效率、得率以及纯化过程进行全面研究,得到了一条分离纯化槐花多糖的详细的工艺路线;对得到的槐花多糖纯品进行了系统全面的理化性质研究,为开发利用槐花多糖提供了基础研究资料,将有助于槐花多糖的各方面深入研究。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 相关研究文献综述
• 1 槐花研究概况
• 1.1 槐花的生物学特征
• 1.2 槐花的化学成分研究概况
• 1.3 药理作用
• 1.4 临床应用
• 2 多糖的研究概述
• 2.1 多糖提取
• 2.2 多糖除杂
• 2.3 多糖纯化
• 2.4 纯度鉴定
• 2.5 分子量测定
• 2.6 多糖结构的测定
• 2.7 多糖生物活性
• 3 本课题研究的内容和意义
• 3.1 本课题研究的主要内容
• 3.2 本课题研究的目的和意义
• 第二章 槐花多糖提取工艺研究
• 1 试验材料、试剂及仪器
• 1.1 试验材料
• 1.2 试验试剂
• 1.3 试验仪器
• 2 试验方法
• 2.1 多糖含量的测定方法
• 2.2 热水浸提槐花多糖的研究
• 2.3 酶法提取槐花多糖的研究
• 3 结果与分析
• 3.1 葡萄糖标准曲线线性回归方程
• 3.2 热水浸提槐花多糖的工艺研究结果
• 3.3 酶法提取槐花多糖的工艺研究结果
• 4 本章小结
• 第三章 槐花多糖的分离纯化及理化性质研究
• 1 实验材料
• 1.1 材料
• 1.2 试验试剂
• 1.3 试验仪器
• 2 实验方法
• 2.1 多糖含量的测定
• 2.2 蛋白质含量的测定
• 2.3 多糖半纯品的制备
• 2.3.1 脱蛋白方法的优选
• 2.3.2 脱色方法的优选
• 2.3.3 粗多糖中小分子杂质的去除
• 2.4 多糖分级
• 2.5 多糖纯度鉴定的方法
• 2.6 多糖分子量的测定
• 2.7 气相色谱分析单糖含量
• 2.8 槐花多糖的红外光谱扫描测定
• 2.9 槐花多糖抗氧化活性的测定
• 3 结果与分析
• 3.1 蛋白含量测定标准曲线及回归方程
• 3.2 多糖半纯品的制备
• 3.3 多糖的纯化
• 3.4 多糖纯品的纯度鉴定
• 3.5 气相色谱分析
• 3.6 多糖分子量的测定
• 3.7 多糖的红外光谱扫描测定
• 3.8 槐花多糖的抗氧化活性
• 4 本章小结
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间的研究成果