论文摘要
目的：格林-巴利综合征（Guillain Barre Syndrome，GBS）是一种常见周围神经系统自身免疫性疾病，其病理改变主要表现为周围神经的髓鞘脱失和炎性细胞浸润，其病因和发病机制尚不十分清楚。实验性变态反应性神经炎（EAN）是研究GBS的理想动物模型，是由CD4+T细胞介导的急性多发性炎症性神经根脱髓鞘性疾病，Th1细胞与Th2细胞的功能失衡是其发病的关键。TLR是一类新近发现的天然免疫模式识别受体，其可通过病原相关分子模式（PAMP，Pathogen associated molecular paterns）识别抗原，激活抗原呈递细胞（APC），产生共刺激信号而促使T细胞活化。雷公藤多甙（TWP）是一种中草药提取物，具有较强的免疫抑制作用，临床应用于许多自身免疫性疾病，取得一定的疗效。本实验观察了TLR4，TLR9在EAN大鼠的坐骨神经，脾脏，外周血，淋巴结的动态表达，以及雷公藤多甙对其的影响。探讨TLR与EAN的发病关系，为临床寻找新的治疗自身免疫性疾病的策略奠定理论基础。方法：68只Lewis大鼠，清洁级，雄性，6-8周，体重160-180克，随机分为抗原注射组EAN组（n=4，4，4，4）；雷公藤多甙干预组EAN+TWP组（n=4，4，4，4）；生理盐水干预对照组EAN+NS（n=4，4，4，4）；完全弗氏佐剂组CFA组（n=4，4，4，4），生理盐水对照组NS组（n=4）。EAN组，EAN+TWP组，EAN+NS组大鼠用周围神经髓鞘蛋白P0180-199+CFA+NS（200μ1）免疫，EAN+TWP组从大鼠出现症状开始给予雷公藤多甙灌胃（40mg／kg.d）干预治疗，观察免疫后大鼠的发病情况和组织病理学改变及TWP对其的影响。分别在第7天，第16天，第24天，第33天处死动物，取坐骨神经根，脾脏，外周血和淋巴结，制作病理切片行HE染色和固兰染色观察其病理改变，利用RT-PCR检测TLR4，TLR9的mRNA表达水平。结果：EAN大鼠在发病17天时症状达高峰，第33天时好转，TLR4 mRNA在第16天时表达最高，后逐渐下降，前后时间点相比均有差异（p＜0.05），与对照组相比有显著的差异性；TLR9 mRNA整个实验过程中一直呈上升趋势，前后各时间点相比均有差异（P＜0.05），与对照组相比有显著差异。EAN+TWP组大鼠治疗后其症状与EAN+NS组相比稍微改善，坐骨神经炎性细胞浸润减少，EAN+TWP组的TLR9和TLR4的表达在第16天，第24天，第33天均低于EAN+NS组，有显著性差异。CFA组和NS组大鼠无症状。CFA组与NS组相比，在淋巴结，外周血和脾脏中，第7天TLR4和TLR9的表达达高峰，高于NS组，P＜0.05有显著差异。各组织中TLR4，TLR9的表达具有相关性。结论：TLR4和TLR9可能参与EAN发病。雷公藤多甙可能通过抑制TLR4和TLR9的功能来减轻EAN的发病。完全弗氏佐剂可能通过刺激TLR4和TLR9增强免疫应答。
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标签：实验变态反应性神经炎论文; 抗原呈递细胞论文; 雷公藤多甙论文;