蜈蚣酸性蛋白对去甲肾上腺素引起大鼠心肌肥厚的影响

论文摘要

目的:本实验采用去甲肾上腺素（norepinephrine,NE）制做大鼠心肌肥厚模型,探讨蜈蚣酸性蛋白（Centipede Acidic Protein, CAP）对大鼠心肌肥厚病变的保护作用及其作用机制。方法:SD大鼠50只,体重（body weight, BW）250±20 g,随机分为五组:空白对照组（normal control group, NC）、模型组（model control group, MC）、阳性药物组、CAP高剂量组（high-dose CAP group, H-CAP）及低剂量组（low-dose CAP group, L-CAP）,每组10只。空白对照组以4 ml/kg/d的生理盐水腹腔注射,其余组给予NE 2 mg/kg腹腔注射15 d（2次/d）,造模的第9 d,阳性药物组以40 mg/kg/d的卡托普利（captopril, CPT）灌胃,H-CAP、L-CAP组分别腹腔注射CAP 2.0 g/kg/d、1.0 g/kg/d,连续7 d,实验结束时每组取其中5只大鼠颈总动脉插管测血流动力学变化;另5只大鼠股动脉取血,实验结束后称取体重、全心湿重（heart wet weight, HWW）、左心室湿重（left heart wet weight, LHWW）,计算心脏指数HWW/BW, LHWW/BW;取血测定血清一氧化氮（NO）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸磷酸激酶（CPK）含量及血浆内皮素（ET）含量;切取心尖部做病理标本观察心肌形态;免疫组织化学法检测Bcl-2、Bax和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）表达水平。结果:1.心脏重量参数:空白对照组HWW/BW、LHWW/BW分别为2.9±0.2 mg/g和2.1±0.1 mg/g,模型组HWW/BW、LHWW/BW分别为3.2±0.2 mg/g和2.6±0.2 mg/g,模型组大鼠较空白对照组HWW/BW、LHWW/BW值显著升高（P<0.01）;H-CAP组HWW/BW、LHWW/BW值分别为2.7±0.1 mg/g和2.2±0.1 mg/g,L-CAP组HWW/BW、LHWW/BW值分别为2.9±0.1 mg/g和2.4±0.1 mg/g,与模型组比较,HWW/BW、LHWW/BW值明显降低（P<0.01）。2.血流动力学变化:模型组心率（HR）、左室收缩峰压（LVSP）和左室舒张末压（LVEDP）分别为400.77±32.50 beat/min、162.17±13.10 mmHg和11.98±4.20 mmHg,与空白对照组相比显著性升高,模型组+dp/dtmax、-dp/dtmax为4653.30±968.40 mmHg/s和-3775.44±867.89 mmHg/s,与空白对照组相比显著降低（P<0.05或P<0.01）。H-CAP组HR、LVSP和LVEDP分别为350.09±23.00 beat/min、142.03±9.80 mmHg和6.03±0.89 mmHg;L-CAP组HR、LVSP和LVEDP分别为335.14±30.10 beat/min、140.77±14.45 mmHg和9.45±3.24 mmHg。与模型组相比,H-CAP和L-CAP组HR、LVSP和LVEDP均显著降低（P<0.05或P<0.01）。H-CAP组+dp/dtmax、-dp/dtmax为6563.80±1208.98和-5487.32±675.31 mmHg/s,L-CAP组+dp/dtmax、-dp/dtmax分别为5364.03±1142.78和-4523.01±1149.75 mmHg/s,与模型组相比,H-CAP和L-CAP组+dp/dtmax、-dp/dtmax均显著升高（P<0.05或P<0.01）。3.血清NO、SOD、MDA、CPK、LDH及血浆ET变化:模型组MDA、CPK、LDH分别为10.62±1.22 nmol/ml、4.92±0.17 Ku/L、293.9±24.9 U/L,较空白对照组明显增高（P<0.05或P<0.01）;模型组NO和SOD值为32.3±10.5 umol/L和76.3±8.4 U/ml,NO含量、SOD活性明显降低（P<0.01）。H-CAP组的MDA、CPK、LDH分别为5.11±1.13 nmol/ml、2.76±0.28 Ku/L和191.2±29.8 U/L,L-CAP组的MDA、CPK、LDH分别为6.89±2.11 nmol/ml、3.88±0.22 Ku/L和225.6±45.6 U/L,与模型组比较,H-CAP和L-CAP组的MDA、CPK、LDH均明显降低（P<0.05或P<0.01）。H-CAP和L-CAP组的NO分别为90.5±19.4和62.9±15.5umol/L,SOD为122.8±9.4和95.2±8.9 U/ml,NO含量、SOD活性均明显升高（P<0.05或P<0.01）。模型组、H-CAP和L-CAP组血浆ET分别为83.34±9.58、75.62±8.11和64.61±7.45 pg/ml,模型组与空白对照组相比明显升高（P<0.01）,H-CAP和L-CAP组与模型组比较血浆ET值降低（P<0.05）。4.形态学改变:1)光镜观察:空白对照组大鼠心肌结构清晰,形态未见异常。模型组可见心肌细胞明显肥大,心肌细胞排列紊乱,肌丝纹理增粗,间质纤维化。阳性药物组、H-CAP和L-CAP组心肌损害程度明显轻于模型组。2)免疫组化观察:模型组Bax灰度值为198.85±5.65,Bcl-2灰度值为135.75±3.63,与空白对照组比较,Bax表达显著增多（P<0.05）,而Bcl-2表达减少（P<0.01）。H-CAP和L-CAP组Bax灰度值分别为137.53±6.42和178.44±4.16,Bcl-2灰度值分别为169.60±4.77和169.72±3.55。H-CAP和L-CAP组Bax表达明显降低（P<0.05）,H-CAP和L-CAP组Bcl-2表达明显升高（P<0.05）。bFGF免疫阳性细胞在各组大鼠的心肌细胞中均有表达,模型组bFGF灰度值为183.46±3.52,bFGF阳性细胞从数量上多于其它组大鼠,H-CAP和L-CAP组灰度值分别为144.08±5.54和157.66±3.37。H-CAP和L-CAP组均抑制bFGF免疫阳性细胞的表达（P<0.01）。结论:CAP对NE所致大鼠心肌肥厚具有保护作用。其作用机理与升高肥厚心肌组织NO含量,提高SOD活性,降低MDA含量,减少LDH和CPK的释放,减少自由基在心肌内的聚集,减少心肌细胞凋亡和改善心功能及血流动力学有关。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
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• 研究论文 蜈蚣酸性蛋白对去甲肾上腺素引起心肌肥厚的影响
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 心肌肥厚发病学说及药物治疗进展
• 致谢
• 个人简历