HBS1L-MYB基因、BCL11A基因和HBG基因与胎儿血红蛋白相关性的研究

论文摘要

第一部分HBS1L-MYB、BCL11A和HBG基因多态性和胎儿血红蛋白数量性状相关性的研究目的:为了探讨影响胎儿血红蛋白（fetal hemoglobin , HbF）和其他血液学参数的分子机制,根据全基因组关联性研究结果选择HBS1L-MYB、BCL11A、HBG2和CSNK2A1基因中17个单核苷酸多态性位点并分析它们与HbF和其他血液学参数的相关性。方法:对来自广西的312个无亲缘关系的β地中海贫血个体,检测其血红蛋白类型、红细胞（red blood cell, RBC）计数和血红蛋白（hemoglobin, Hb）水平,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性及DNA测序法分析其基因型。用Haploview v.4.2软件检验各SNP位点Hardy-Weinberg平衡和相互间的连锁不平衡。用SPSS16.0软件检验各位点与HbF、RBC和Hb的相关性。最后用Haplo.state软件推断出有意义的单体型。结果:有10个SNP和HbF水平相关,其中在HBS1L-MYB基因中有7个SNP和HbF水平相关,有1个SNP和RBC计数、Hb相关。在BCL11A基因中有两个SNP和HbF水平相关,在HBG2基因中有1个SNP和HbF水平相关。BCL11A和HBG2基因中SNP和红细胞计数、Hb无相关性。除此以外HBS1L-MYB和BCL11A的单体型与HbF水平相关,HBS1L-MYB单体型与红细胞计数和Hb相关,BCL11A和HBG2的单体型与红细胞计数无关联性。CSNK2A1基因rs6037828和血液学参数无关联性。结论:HBS1L-MYB、BCL11A和HBG这3个独立的区域与红细胞参数有关联性,本研究在广西β地中海贫血人群中验证了全基因组关联性研究的结果,对于进一步研究HbF升高及红细胞的生成有重要意义。第二部分重型β地中海贫血外周血单个核细胞BCL11A基因表达水平的研究目的:探讨重型β地中海贫血患者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）中BCL11A基因mRNA的表达特点。方法:入选35例重型β地中海贫血患者作为病例组;40例健康体检者为对照组,并检测红细胞计数和血红蛋白量。提取新鲜外周血PBMCs中的总RNA,逆转录为cDNA,采用SYBR Green I实时荧光定量PCR（ RT-PCR ）和相对定量分析方法,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶（ glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH）基因为内参,检测两组PBMCs中BCL11A基因的表达情况。采用相对定量2-△△Ct法进行mRNA相对表达量的比较。BCL11A基因mRNA相对表达量和红细胞计数、血红蛋白量、年龄和性别的相关分析中双变量符合正态分布的计量资料采用Pearson相关分析,其他变量采用Spearman相关分析。结果:实时荧光定量PCR检测BCL11A基因mRNA在两组中的表达,对照组BCL11A基因表达水平较病例组的高,两组之间差别有统计学意义。在重型β地中海贫血患者中BCL11A基因mRNA表达水平较校准品最低为0.81倍,最高为2.82倍;对照组中BCL11A基因mRNA表达水平较校准品最低为2.29倍,最高为4.92倍,存在明显的个体差异。BCL11A基因mRNA的相对表达量与红细胞计数、血红蛋白量、性别和年龄无相关性。结论:重型β地中海贫血患者BCL11A基因mRNA的相对表达量表达下降,BCL11A基因mRNA的低表达可能在γ珠蛋白基因持续表达过程中发挥了一定作用。

论文目录

• 英文缩写索引
• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一部分
• 研究背景
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 第二部分
• 研究背景
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述一 胎儿血红蛋白数量性状位点的定位研究进展
• 参考文献
• 综述二 BCL11A 基因与胎儿血红蛋白
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的论文