Th17细胞在慢性乙型病毒性肝炎及其重症化中的作用

论文摘要

目的：慢性乙型病毒性肝炎（chronic hepatitis B, CHB）是我国常见病、多发病之一,部分患者会因各种原因进展为肝衰竭,其中又以慢加急性肝衰竭（acute-on-chronic liver failure, ACLF）更为常见。本研究即通过观察CHB患者和乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）相关ACLF患者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells, PBMCs）中Th17细胞频率,肝组织内白细胞介素17（interleukin17, IL-17）阳性细胞表达,并动态观察不同预后ACLF患者血清IL-17水平的变化趋势,旨在初步探讨Th17细胞在CHB及其重症化中的作用。方法：收集CHB患者32例、HBV相关ACLF患者44例及正常对照者20例,并收集接受肝组织活检的CHB患者肝组织10例,接受肝移植的ACLF患者及正常供体肝组织各6例。检测患者血清生化指标、凝血功能及HBVDNA载量,应用流式细胞术检测外周血Th17细胞频率,实时荧光定量PCR检测PBMCs中IL-17mRNA表达,免疫组织化学染色检测肝组织内IL-17+细胞表达,酶联免疫吸附法检测血清IL-17水平,并动态观察其在不同预后ACLF患者中的变化趋势。比较Th17细胞在CHB患者、ACLF患者和正常对照者中的变化,并与丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase, ALT）水平、HBVDNA载量和终末期肝病模型（model of end-stage liver disease, MELD）评分作相关性分析。结果：1外周血Th17细胞频率变化共32例CHB患者、44例HBV相关ACLF患者（23例早期患者、21例中晚期患者）和20例正常对照者接受外周血Th17细胞（CD3+CD8-IL-17+T细胞）频率检测。CHB组（1.47±0.60）%、ACLF组（3.20±1.08）%患者外周血Th17细胞频率均显著高于正常对照组（0.86±0.43）%（均P<0.001）,其中ACLF组患者外周血Thl7细胞频率显著高于CHB组患者（P<0.001）。中晚期ACLF患者（3.78±1.04）%外周血Th17细胞频率显著高于早期患者（2.68±0.82）%,（P<0.001）。2PBMCs中IL-17mRNA表达变化共17例CHB患者、15例ACLF患者和17例正常对照者接受IL-17mRNA表达检测,IL-17mRNA在正常对照组相对表达量设定为1.00,与正常对照组相比较,CHB组和ACLF组分别为4.32±1.77和18.32±8.21。各组间比较差异均有统计学意义（均P<0.001）,其中以ACLF组为最高,正常对照组最低。3肝组织浸润的IL-17+细胞变化共10例CHB患者、6例ACLF患者和6例正常对照者接受肝组织浸润的IL-17+细胞检测,依次为（10.6±4.8/hpf）、（21.1±6.6/hpf）和（0.5±0.2/hpf）,各组间比较差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）,其中以ACLF组为最高,正常对照组最低。4血清IL-17水平变化共32例CHB患者、44例ACLF患者（23例早期患者、21例中晚期患者）和20例正常对照者接受血清IL-17水平检测。CHB组（15.88±6.51pg/ml）、ACLF组（35.03±11.54pg/ml）患者血清IL-17水平均高于正常对照组（10.04±4.06pg/ml）（P值分别为<0.05,P<0.001）,其中ACLF组患者血清IL-17水平显著高于CHB组患者（P<0.001）。中晚期（41.13±12.19pg/ml） ACLF患者血清IL-17水平高于早期患者（29.46±7.56pg/ml, P<0.01）。5外周血Th17细胞频率与MELD评分及实验室指标相关性CHB患者外周血Th17细胞频率与血清ALT水平成正相关（r=0.51,P<0.01）,而与HBV-DNA载量无关。ACLF患者外周血Th17细胞频率与MELD评分（r=0.44,P<0.01）和血浆INR（r=0.44,P<0.01）均成正相关,而与ALT水平、HBV-DNA载量均无关。6不同预后ACLF患者血清IL-17水平动态变化共22例内科治疗的ACLF患者接受血清IL-17水平动态检测。根据患者第28天的生存状况,将患者分为存活组（8例）和死亡组（14例）。存活组患者入院时血清IL-17基线水平（30.40±8.08pg/ml）低于死亡组患者(40.45±7.92pg/ml,（P<0.05）,并且其在第7天（26.03±6.55pg/ml）、14天（24.88±8.58pg/ml）、21天（20.86±6.37pg/ml）、28天（15.02±5.59pg/ml）呈逐渐下降趋势。死亡组患者第7天（42.90±10.24pg/ml）.14天（46.82±9.89pg/ml）、21天（48.79±13.69pg/ml）、28天（50.39±5.57pg/ml）血清IL-17水平呈逐渐上升趋势,并且其在第7天、14天、21天均显著高于存活组（均P<0.001）。结论：1HBV相关ACLF患者和CHB患者外周血Th17细胞频率与其分泌的细胞因子IL-17水平及肝组织内IL-17+细胞浸润均较正常对照者增多。2Th17细胞与其分泌的细胞因子IL-17可能促进了CHB肝脏损伤及其HBV相关ACLF的发生和发展,并且其水平越高可能越预示患者短期预后不佳。3Th17细胞可能成为治疗CHB和ACLF的一个新靶点。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 Th17细胞及其在相关肝病中的作用
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历