论文摘要
目的我国前列腺癌的发病率呈显著增长态势。PSA是目前诊断前列腺癌最重要的肿瘤标记物，但PSA只具有前列腺组织特异性，而无肿瘤特异性，其检测假阳性率比较高，且PSA正常者也不能排除前列腺癌。DD3基因特异性地高表达于人类前列腺癌组织和转移坏死灶中，本研究旨在论证它是否是一种可替代PSA的、早期诊断前列腺癌以及判断预后的标志物。材料和方法收集非前列腺疾病病人、前列腺良性增生和前列腺癌患者的尿液标本沉淀；提取其中的总RNA后进行逆转录聚合酶链反应；用β-actin作为看家基因，进行琼脂糖凝胶电泳，确认DD3的PCR产物，同时对DD3mRNA进行半定量测定；用荧光定量聚合酶链反应对DD3mRNA进行相对定量测定；最后用SPSS13.0分析相关数据。结果一、对于指标DD3灰度比值，非前列腺疾病病人与前列腺良性增生患者之间的比较无差异，与前列腺癌患者比较有差异。而对于指标DD3相对定量值，三类患者的比较均有显著性差异，前列腺癌患者DD3mRNA相对定量值是前列腺良性增生患者14.1倍、非前列腺疾病病人的24.1倍。二、各个血清PSA水平级别之间，DD3mRNA相对定量值有差异。对PSA位于4-10 ng／ml检测灰区的两类患者进行比较，tPSA、fPSA、DD3mRNA灰度比值的比较均无明显差异，而DD3mRNA相对定量值的比较则有显著性差异。三、各个Gleason评分／分化程度中，DD3mRNA灰度比值和DD3mRNA相对定量值均有明显差异，分化程度越低，DD3mRNA灰度比值和DD3mRNA相对定量值越高。DD3灰度比值、相对定量值与Gleason评分均呈显著性正相关；DD3灰度比值与前列腺体积呈正相关，但相关性不明显。四、运用受试者工作特征曲线分析可得，各指标PSA、F／T、DD3灰度比值、DD3相对定量值的曲线下面积分别为：0.744、0.788、0.921、0.942。DD3相对定量值的检验效能最大，灰度比值次之。讨论研究表明，PSA在0-4ng／ml其假阳性率为25％，而假阴性率可达38％-48％；此外，几个多中心临床试验显示，DRE能够发现10％-21％经PSA测定PSA＜4.0ng／ml的PCa患者；在血清PSA＞4.0ng／ml的人群中，穿刺活检诊断为前列腺癌者只有25％-30％。de Kok等研究发现，与良性组织相比，前列腺癌组织中DD3的含量增加了34倍，即使组织中前列腺癌细胞的含量较少（≤10％），DD3也能够清晰准确地表达。临床上，RISH法、RT-PCR技术可在前列腺组织穿刺细胞学活检和体液（如血液、精液、尿液和前列腺按摩液）检测中应用。运用实时定量的RT-PCR技术，能准确量化地检测DD3，它具有诊断前列腺癌和判断其预后的价值。相比较而言，尿液中DD3的检测标本更易获得、更容易为患者接受。前列腺癌患者尿液中DD3mRNA相对定量值是前列腺良性增生患者14.1倍、非前列腺疾病病人的24.1倍，在三类患者中的差别远比血清PSA明显。运用ROC分析发现，DD3mRNA相对定量值的曲线下面积最大（0.942），也就是说在综合考虑灵敏度和特异度的情况下，DD3mRNA相对定量值这一指标在鉴别前列腺良性增生患者和前列腺癌方面的能力最强。这些结果说明，DD3mRNA相对定量值可以在前列腺癌的筛检和早期鉴别诊断中发挥作用。Gleason评分是西方国家中应用最为普遍的病理分级，研究发现Gleason分级能很好的预测患者的预后情况。本研究发现，24例前列腺癌患者中，各个Gleason分级之间DD3mRNA灰度比值和相对定量值比较均有显著性差异，且Gleason分数与DD3mRNA灰度比值和相对定量值呈明显的正相关，由此推断对DD3mRNA的定量测定可能起到指导前列腺癌患者预后的作用。此外，在前列腺癌患者中，各个tPSA分级之间DD3mRNA相对定量值有明显差异；对PSA位于4-10 ng／ml检测灰区的前列腺良性增生和前列腺癌患者进行分析得到，tPSA、fPSA、DD3mRNA灰度比值的比较均无明显差异，而DD3mRNA相对定量值的比较有显著性差异；这说明DD3mRNA相对定量值的测定能在前列腺良性增生和前列腺癌患鉴别诊断中发挥作用。对于DD3mRNA的分子生物学特性和功能还未完全了解；将尿液中DD3mRNA的检测应用于筛查和早期鉴别诊断时，检测方法没有规范化，界值还未确定；如何将DD3基因检测与前列腺癌的临床分期和病理分级相联系，以提高其判断治疗后转归的能力。还都有待于将来基于大规模人群的进一步深入研究。结论尿液中DD3mRNA的定量检测可应用于前列腺癌的筛查；用于前列腺良性增生和前列腺癌的鉴别时，诊断能力要比tPSA和F／T优异；最后，它是一种可指导前列腺癌预后的有前途标志物。
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标签：前列腺癌论文; 二氢二醇脱氢酶论文; 荧光定量聚合酶链反应论文; 尿液论文;