(1山西医科大学山西省肿瘤医院妇科山西太原030012)
(2山西省肿瘤医院病理科山西太原030012)
【摘要】目的：研究Ki67和P53蛋白表达用于上皮性卵巢癌淋巴结转移评估的临床价值。方法：选择2014年2月至2015年2月来我院行肿瘤切除和淋巴结清扫术的48例上皮性卵巢癌患者作为研究对象，运用免疫组织化学技术检测并比较分析所有研究对象手术切除组织中Ki67和P53蛋白的表达情况。结果：Ki67和P53蛋白在临床Ⅲ～Ⅳ期阳性表达所占比例显著高于在Ⅰ～Ⅱ期中的阳性表达率，差异具有统计学意义（P＜0.05）。Ki67和P53蛋白在发生淋巴结转移患者中的阳性表达率显著高于没有发生淋巴结转移的患者，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论：Ki67和P53蛋白作为评估上皮性卵巢癌患者淋巴结转移及临床分期的参考指标，应用价值较高，值得推广。
【关键词】上皮性卵巢癌；淋巴结转移；Ki67；P53蛋白
【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2016）02-0183-02
上皮性卵巢癌起病隐匿，早期不易被发现，有资料显示OEC的死亡率据妇科恶性肿瘤的首位[1]，淋巴结转移是上皮性卵巢癌重要的转移途径，影响着疾病的进展与预后。分子生物学发现检测Ki67和P53蛋白对临床评估恶性肿瘤的发病机制、恶性程度及转归预后具有积极意义[2]。为此，我们开展此项研究旨在探讨Ki67和P53蛋白表达对于评估上皮性卵巢癌淋巴结转移的临床价值，现将研究结果报道如下。
1.资料与方法
1.1一般资料
选择2014年2月至2015年2月来我院行肿瘤切除和淋巴结清扫术的48例上皮性卵巢癌患者作为研究对象，患者年龄29～67岁，平均（48.7±9.1）岁；病程6个月～2年，平均（1.2±0.6）年；按国家妇产科联盟诊断标准中有关上皮性卵巢癌的临床分期：Ⅰ期14例，Ⅱ期8例，Ⅲ期22例，Ⅳ期4例。经临床病理学检查证实发生淋巴结转移者30例，无淋巴结转移者18例。
1.2方法
1.2.1主要试剂采用北京普利莱（APPLYGEN）基因技术有限公司生产的鼠抗人Ki67单克隆抗体和鼠抗人P53单克隆抗体，采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法染色试剂盒，采用西安永屹生物技术有限公司生产的二氨基联苯胺显色剂。
1.2.2具体方法将肿瘤切除术中切除的组织取标本，再以10%甲醛溶液固定标本，用常规石蜡包埋，连续切片，以4um厚度为宜。再行苏木精-伊红染色。以免疫组织化学标记，置于光学显微镜下观察。结果均以细胞核内呈棕黄色或棕褐色颗粒且染色强度明显高于背景者为阳性。
1.3观察指标
①比较不同分期Ki67和P53蛋白阳性表达率。②比较有无淋巴结转移患者Ki67和P53蛋白阳性表达率。Ki67表达以高倍镜光学显微镜下阳性细胞所占比例平均值表示。P53蛋白表达根据阳性细胞数分析：阴性（—）：阳性细胞数＜10%；弱阳性（+）：10%≤阳性细胞数＜25%；阳性（++）：25%≤阳性细胞数≤50%；强阳性（+++）：阳性细胞数＞50%。
1.4统计学方法
选用统计学软件SPSS19.0对研究数据进行分析和处理，计数资料采取率（%）表示，计量资料（x-±s）表示，组间对比进行χ2检验和t值检验，以P＜0.05为有显著性差异和统计学意义。
2.结果
2.1不同分期患者Ki67和P53蛋白阳性表达率比较
Ki67和P53在临床Ⅲ～Ⅳ期阳性表达所占比例显著高于在Ⅰ～Ⅱ期中的阳性表达率，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表1。
3.讨论
Ki67是在增殖细胞中表达的核抗原，是检测肿瘤细胞增殖重要的参考指标。Ki67开始表达于G1期，至M期达到峰值，细胞分裂晚期快速消失，因而半衰期短，可反映恶性肿瘤增值率。王帅[3]等学者研究也认为Ki67与肿瘤的发生发展、增殖、转移及预后，在上皮性卵巢癌中呈高表达，与淋巴结转移具有相关性。P53是与细胞周期G1期检查点相关的抑癌基因，位于人类染色体的17p13.1，是G1期到S期重要的细胞周期调控基因[4]。P53内所含中间部的结构域是DNA结合区，可直接结合特异性DNA，是肿瘤细胞突变的区域。
本研究中，Ki67在上皮性卵巢癌Ⅲ～Ⅳ期中的阳性表达率显著高于在Ⅰ～Ⅱ期，在发生淋巴结转移患者中的阳性表达率显著高于未发生淋巴结转移的患者，这提示我们Ki67高表达与上皮性卵巢癌临床分期和淋巴结转移情况呈正相关，Ki67可作为医师评估上皮性卵巢癌患者临床分期和判断淋巴结转移的参考指标。此外，本研究还显示，P53在上皮性卵巢癌Ⅲ～Ⅳ期中的阳性表达率显著高于在Ⅰ～Ⅱ期，在发生淋巴结转移患者中的阳性表达率显著高于未发生淋巴结转移的患者，这与杨越[5]等学者研究结论一致，但也有研究显示[6],P53阳性表达率与临床分期和肿瘤淋巴结转移相关性不显著或没有相关性，我们考虑可能与样本量的选择有关。
综上，Ki67与P53与上皮性卵巢癌临床分期及淋巴结转移情况具有相关性，临床可作为评估上皮性卵巢癌分化程度及判断淋巴结转移的参考指标。
【参考文献】
[1]邱建，傅云峰，周彩云等.上皮性卵巢癌组织CK2β和p53蛋白表达临床意义分析[J].中华肿瘤防治杂志，2015,22(6):451-456.
[2]刘青云，陈跃，庞战军等.Survivin、p53蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达及意义[J].医学临床研究，2010,27(11):2140-2142.
[3]王帅，马晓艳，夏阳等.上皮性卵巢癌组织中Ki67和PCNA的表达及有丝分裂指数[J].四川大学学报（医学版），2010,41(4):575-580.
[4]余志华，马静方，杨春雨等.卵巢癌组织中CREB结合蛋白和P53蛋白的表达及其临床意义[J].重庆医学，2013,42(11):1207-1209,1212.
[5]杨越，张蕾，崔瑶等.EGFR及Ki67在上皮性卵巢癌中的表达及意义[J].中国医疗前沿，2013,13(14):6-7,45.
[6]闫晓楠，王英，展艳萍等.卵泡刺激素对上皮性卵巢癌细胞增殖凋亡的影响及其分子机制探讨[J].现代妇产科进展，2013,22(9):708-712.