牛磺酸抑制心肌纤维化的作用及机制研究

论文摘要

牛磺酸（Taurine,Tau）是正常存在于体内的含硫氨基酸,具有广泛的生物学效应,鉴于其在肝、肺、肾纤维化研究方面已经积累的大量基础及临床资料,本课题从抗纤维化的靶标——心肌成纤维细胞及细胞信号转导的关键物质——蛋白激酶C入手,从细胞水平揭示Tau抑制心肌纤维化的作用机理,为临床心肌纤维化治疗提供理论依据。体内实验以异丙肾上腺素（Iso）皮下注射建立心肌纤维化模型,体外实验以血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导新生大鼠心肌成纤维细胞（CFb）增殖,辅助以蛋白激酶C抑制剂,综合运用硝酸还原酶法、ELISA方法、流式细胞仪检测技术、免疫细胞化学染色、Westernblot等方法,从整体、细胞和分子水平观察Tau抑制心肌纤维化的作用并探讨其机制。实验结果显示Tau可通过提高SOD活性、减少MDA含量、促进NO合成等抗氧化方式减轻纤维化所造成的心肌损伤。Tau可通过增加iNOS的蛋白表达而促进NO合成;Tau可通过促进p27的表达而发挥对CFb细胞周期的调控;Tau可通过抑制NF-κB p65的核转位而抑制CFb的增殖。而以上作用均可通过抑制蛋白激酶C信号转导途径实现,最终达到抑制CFb的增殖及胶原的合成,降低致纤维化细胞因子的含量,抑制心肌纤维化发生的目的。

论文目录

• 提要
• 英文缩写词表
• 绪论
• 第一篇 文献综述
• 第一章心肌纤维化的胶原代谢改变
• 第二章 心肌纤维化的分子生物学机制
• 第三章 药物治疗预防和逆转心肌纤维化
• 第四章 牛磺酸治疗纤维化的研究进展
• 第二篇 实验部分
• 第一章 牛磺酸抑制大鼠心肌纤维化的整体动物实验研究
• 第一节 材料与方法
• 一、实验材料
• 二、实验方法
• 第二节 实验结果
• 一、Tau 对心脏重量参数的影响
• 二、Tau 对心肌组织Hyp 含量的影响
• 三、Tau 对心肌SOD 活性及MDA 含量的影响
• 四、Tau 对血清LDH 及CK 活性的影响
• 五、Tau 对心肌组织HE 染色的影响
• 六、电镜观察心肌超微结构改变
• 七、Tau 对心肌组织PKCα蛋白在胞膜表达的影响
• 第二章 牛磺酸抑制心肌成纤维细胞增殖的实验研究
• 第一节 材料与方法
• 一、实验材料
• 二、实验方法
• 三、统计学分析
• 第二节 实验结果
• 一、Tau 抑制AngⅡ致CFb 增殖作用的初步研究
• 1. 细胞鉴定
• 2. 细胞形态学观察
• 3. Tau 对CFb 增殖的影响
• 4. Tau 对CFb 分泌Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原含量的影响
• 5. Tau 对TGF-β1 蛋白含量的影响
• 6. Tau 对NO 含量的影响
• 7. Tau 对CFb 细胞周期的影响
• 8. Tau 对p-PKCα蛋白表达的影响
• 二、Tau 抑制AngⅡ致心肌成纤维细胞（CFb）增殖作用的信号转导通路研究
• 1. Tau 对CFb 增殖的影响
• 2. Tau 对CFb 分泌胶原含量的影响
• 3. Tau 对CFb iNOS-NO 系统的影响
• 4. Tau 对CFb 周期调控蛋白的影响
• 5. Tau 对CFb NF-κB p65 的影响
• 第三章 讨论
• 结论
• 本研究的创新点
• 参考文献
• 攻读博士学位期间发表的学术论文及参加的课题研究
• 中文摘要
• Abstract
• 致谢