几种竹叶和滇桂艾纳香化学成分、提取工艺及抗氧化活性的研究

论文摘要

竹子属于禾本科（Graminae）、竹亚科（Bambusoideae）的多年生常绿植物。竹叶在我国拥有悠久的食用和优良的药用历史,是中医一昧著名的清热解毒药。竹叶提取物有效成份包括黄酮、酚酸、蒽醌、内脂、多糖、氨基酸、微量元素等,研究表明具有抗自由基、抗氧化、降血脂、预防心脑血管疾病、抗癌症等功效。运用水蒸气蒸馏法提取了粉单竹、青皮竹、青秆竹三种竹叶挥发性成分,并对其进行GC-MS分析,得出2-烯-戊醇,已醛,2-烯-1-已醛,叶绿醇,苯乙醛,邻苯二甲酸二辛基酯,三十四烷烃,壬醛等,其中最高含量的都是叶绿醇。运用正交实验设计,采用解析-热提两步法对粉单竹进行竹叶提取物的提取,得到最佳工艺为固液比1∶15,80%乙醇解吸,用水热提15min,提取3次,略优于文献中微波提取、超声波提取最优条件。运用解析-热提两步法提取的四种竹叶提取物粉单竹、青皮竹、青秆竹、罗汉竹浸膏进行了脂质过氧化实验,得出IC50分别为0.000064g/mL、0.000157g/mL、0.000116g/mL、0.000123g/mL,显示出竹叶提取物有着优良的抗氧化活性。滇桂艾纳香,拉丁名为Blumea riparia（BL.）DC,别名有管芽、假东风草,是广西壮族民间的传统用药,有活血、止血的功能,用于经期提前,产后血崩,产后浮肿,不孕症。实验运用响应面设计,采用超声波、微波提取优化滇桂艾纳香总黄酮,得出超声波提取:乙醇体积分数为:38%,固液比为:1∶23,提取时间为20min,提取温度为:74℃,提取次数为三次。微波提取为乙醇体积分数为:42%,固液比为:1∶20,提取时间为7min,提取温度为:60℃,提取次数为三次。以提取最优条件提取的浸膏脂质过氧化实验,运用计算IC50软件回归,得出超声波半抑制浓度IC50=0.032mg/mL,微波提取的半抑制浓度IC50=0.034mg/mL,显示良好的抗氧化性。血红细胞抗氧化方法的抗氧化实验中,使红细胞受到破坏而溶血。在滇桂艾纳香多糖提取工艺研究中,运用响应面设计进行最优工艺的优化超声波、微波提取,得出微波提取最佳工艺,时间:8.37min,温度:65.8℃,固液比:1∶32。超声波提取最佳条件,时间:23min,温度56℃,固液比1∶20。实验对滇桂艾纳香多糖进行了分离纯化,运用陶瓷膜膜分离、有机膜膜分离、三氯乙酸除蛋白、DEAE纤维素柱色谱、葡聚糖凝胶sephadexG-100进行分离纯化,得到滇桂艾纳香多糖Blumea ripariapolysaccharide（BRP）,经过高效凝胶色谱GPC分析得到其分子量为:1.13×106。经过水解进行高效液相分析,得出单糖组分为:鼠李糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖醛酸。完全甲基化,水解、还原、乙酰化得到单糖的衍生化物,进行气质联用分析,结合紫外光谱、红外光谱、核磁共振谱进行多糖的结构分析。对纯化得到的分子量为:1.13×106多糖样品进行脂质过氧化实验和流动注射抗氧化实验。脂质过氧化实验中多糖未能表现出抗氧化活性,但在流动注射法中却能表现出比较不错的抗氧化活性。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 符号说明
• 第一部分 几种竹叶挥发成分、抗氧化活性成分提取工艺及活性研究
• 第一章 竹叶化学成分、生理活性及应用研究概况
• 1.1 概述
• 1.2 化学成分的研究
• 1.2.1 挥发油成分
• 1.2.2 竹叶黄酮
• 1.2.3 多糖
• 1.2.4 氨基酸
• 1.2.5 无机矿物质
• 1.2.6 其他化合物
• 1.3 竹叶黄酮的应用
• 1.3.1 竹叶黄酮在食品工业中的应用
• 1.3.2 竹叶黄酮的心脑血管药理活性
• 1.3.3 竹叶黄酮调节血脂的作用
• 1.3.4 竹叶黄酮的抗脂质过氧化作用
• 第二章 竹叶挥发性成分的研究
• 2.1 试剂及仪器
• 2.1.1 试剂
• 2.1.2 仪器
• 2.2 方法原理
• 2.3 实验部分
• 2.3.1 挥发油的提取
• 2.3.2 进行GC-MS检测色谱条件
• 2.4 结果与讨论
• 2.4.1 粉单竹样品GC-MS谱图及分析
• 2.4.2 青皮竹样品GC-MS谱图及分析
• 2.4.3 青秆竹样品GC-MS谱图及分析
• 2.5 本章结论
• 第三章 竹叶黄酮成分提取工艺的研究
• 3.1 试剂与仪器
• 3.1.1 试剂
• 3.1.2 仪器
• 3.2 方法原理
• 3.2.1 解析—热提两步法原理
• 3.2.2 超声波提取原理
• 3.2.3 微波提取原理
• 3.3 实验部分
• 3.3.1 运用正交设计及解吸--热提两步法优化竹叶黄酮提取工艺
• 3.3.2 超声波提取与微波提取
• 3.4 结果与讨论
• 3.4.1 紫外检测波长的选择
• 3.4.2 正交实验分析
• 3.4.3 几种方法的对比
• 3.5 本章结论
• 第四章 竹叶提取物的脂质过氧化活性
• 4.1 试剂及仪器
• 4.1.1 实验试剂
• 4.1.2 实验仪器
• 4.2 实验原理
• 4.2.1 蛋白含量测定机理
• 4.2.2 脂质过氧化的机理
• 4.3 实验内容
• 4.3.1 蛋白标准曲线的制作
• 4.3.2 肝匀浆中蛋白浓度的测定
• 4.3.3 竹叶提取物的提取
• 4.3.4 竹叶提取物的抗氧化实验
• 4.4 结果与讨论
• 4.4.1 粉单竹的抗氧化分析
• 4.4.2 青皮竹的抗氧化分析
• 4.4.3 青秆竹的抗氧化分析
• 4.4.4 罗汉竹的抗氧化分析
• 4.4.5 维生素C对照实验
• 4.5 本章结论
• 第二部分 滇桂艾纳香抗氧化成分及活性研究
• 第五章 滇桂艾纳香化成分及活性研究概况
• 5.1 滇桂艾纳香的简介
• 5.2 滇桂艾纳香化学成分
• 5.3 滇桂艾纳香药理活性
• 5.4 多糖的分离纯化、结构鉴定及活性
• 5.4.1 多糖的提取、分离及纯化
• 5.4.2 多糖的结构分析
• 5.4.3 多糖的活性研究
• 第六章 响应面曲线法法优化滇桂艾纳香黄酮成分提取工艺的研究
• 6.1 试剂与仪器
• 6.1.1 试剂
• 6.1.2 仪器
• 6.2 方法原理
• 6.2.1 SAS软件及响应面曲线法的原理
• 6.2.2 超声波及微波提取中药有效成分的原理
• 6.3 实验部分
• 6.3.1 超声波提取滇桂艾纳香总黄酮的实验
• 6.3.2 微波提取滇桂艾纳香总黄酮
• 6.4 芦丁标准曲线
• 6.5 重复性实验
• 6.6 显色稳定性实验
• 6.7 回收率实验及其结果
• 6.7.1 回收率实验
• 6.7.2 加样回收率的测定
• 6.7.3 回收率分析
• 6.8 本章结论
• 第七章 滇桂艾纳香提取液抗氧化活性的研究
• 7.1 大鼠脂质过氧化活性
• 7.1.1 实验样品与试剂及仪器
• 7.1.2 实验原理
• 7.1.3 实验部分
• 7.1.4 小结
• 7.2 红细胞抗氧化实验
• 7.2.1 实验原理
• 7.2.2 实验样品与试剂
• 7.2.3 实验内容
• 7.2.4 小结
• 7.3 本章结论
• 第八章 滇桂艾纳香多糖的提取工艺优化
• 8.1 实验试剂与仪器
• 8.1.1 试剂
• 8.1.2 仪器
• 8.2 实验原理
• 8.3 滇桂艾纳香多糖的提取工艺优化
• 8.3.1 多糖的脱脂
• 8.3.2 脱脂后与未脱脂得率的对比
• 8.3.3 微波提取滇桂艾纳香多糖的工艺优化
• 8.3.4 超声波提取滇桂艾纳香多糖的工艺优化
• 8.4 葡萄糖标准曲线
• 8.5 换算因子的确定
• 8.6 本章结论
• 第九章 多糖的分离纯化和结构鉴定
• 9.1 试剂及仪器
• 9.1.1 试剂
• 9.1.2 仪器
• 9.2 实验过程:
• 9.2.1 膜分离
• 9.2.2 除蛋白
• 9.2.3 色谱分离
• 9.2.4 多糖的结构鉴定
• 9.3 本章结论
• 第十章 多糖的抗氧化活性
• 10.1 多糖的脂质过氧化实验
• 10.1.1 实验样品与试剂及仪器
• 10.1.2 实验原理
• 10.1.3 实验部分
• 10.2 流动注射法测定滇桂艾纳香多糖的抗氧化活性
• 10.2.1 流动注射法测定滇桂艾纳香多糖的抗氧化活性原理
• 10.2.2 试剂及待测样品配制
• 10.2.3 测定方法及过程
• 10.2.4 滇桂艾纳香多糖的流动注射法测定抗氧化
• 10.3 维生素C的流动注射法抗氧化实验
• 10.4 结论
• 第十一章 结果与展望
• 参考文献
• 附图
• 致谢
• 攻读学位期间发表论文情况