论文摘要
目的:运用一维氢谱核磁共振(1H NMR)技术从代谢组学角度研究SAMP8小鼠血浆、肝肾组织代谢产物谱图的变化,以及针灸对该谱图的调整作用;并期研究电针对SAMP8小鼠血浆、肝肾组织代谢产物的影响。方法:SAMP8小鼠随机分为模型组和模型加电针组(n=8);SAMR1小鼠作为空白组(n=8)。电针“百会”穴、“涌泉”穴,疏密波,频率2~100Hz,电压2~4V,强度以小鼠下肢轻微抖动为度,留针20min,每日1次,7d为一疗程,共3个疗程。运用1H-NMR技术获取血浆、肝脏和肾脏组织提取液的小分子代谢谱图,将波峰归一化积分后的数值导入SIMCA-P10.0软件包进行主成分分析(PCA)和偏最小二乘法判别分析(PLS-DA),并结合正交信号校正(OSC)方法对数据进行相关分析,得出相应的得分图和因子载荷图。结果:1.血浆核磁谱图结果弛豫时间编辑实验结果:三组出现明显分离。造成这种差异的主要化学位移为δ1.34-δ1.38(lactate)、δ1.22(3-hydroxybutyrate,3-HB)、δ1.3(fucose)、δ1.42(alanine)。模型组较空白组含有较少的岩藻糖(fucose,δ1.3)、3—羟基丁酸(3-HB,δ1.22);电针组较模型组含有较多的乳酸(lactate,δ1.34-δ1.38)、丙氨酸(alanine,δ1.42)。扩散编辑实验结果:三组出现明显分离。造成三组差异的主要化学位移为δ0.87—δ0.91(CH3-)、δ1.31—δ1.39((CH2)n)、δ3.27(Phosphatidylcholine)。模型组较空白组含有较少的CH3-(δ0.87),电针组较模型组含有较多的CH3-(δ0.91)、磷脂胆碱(Phosphatidylcholine,δ3.27)。其中,CH3-(δ0.87—δ0.91)在大分子蛋白上主要为高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)。2.肝组织核磁谱图结果水溶性提取物结果:三组出现明显分离。造成三组差异的主要化学位移为δ1.31(lipid triglyceride)、δ3.19-δ3.23(choline)、δ3.27(taurine)、δ3.43-δ3.47(taurine)、δ3.79-δ3.87(glucose)。模型组与空白组相比,含有较多的葡萄糖(glucose,δ3.79-δ3.87),较少的牛磺酸(taurine,δ3.27、δ3.43-δ3.47);电针组与模型组相比,含有较多的胆碱(choline,δ3.19-δ3.23)和甘油三酯(lipid triglyceride,δ1.31),较少的葡萄糖(glucose,δ3.79-δ3.87)。脂溶性提取物结果:三组出现明显分离。造成三组差异的主要化学位移为δ1.26-δ1.34((CH2)n-)、δ2.02(glycoprotein)、δ3.22(choline)。模型组与空白组相比,含有较多的胆碱(choline,δ3.22),较少的(CH2)n-(δ1.34)和糖蛋白(glycoprotein,δ2.02);电针组与模型组相比,含有较多的(CH2)n-(δ1.26、δ1.3),较少的胆碱(choline,δ3.22)。其中,(CH2)n-主要为亚甲基类化合物(-CH2-)及脂肪酸类旁链分子(fatty acid chain protons)。3.肾组织核磁谱图结果水溶性提取物结果:三组出现明显分离。造成三组差异的主要化学位移为δ1.27(lipid triglyceride)、δ1.31-δ1.35(lactate)、δ3.19-δ3.23(choline)。模型组与空白组比较,含有较少的乳酸(lactate,δ1.31-δ1.35);电针组与模型组比较,含有较多的甘油三酯(lipid triglyceride,δ1.27),较少的胆碱(choline,δ3.23)。脂溶性提取物结果:三组出现一定的分离趋势,而且模型组和电针组与空白组分离较明显。造成这种差异的主要化学位移为δ1.26-δ1.34((CH2)n-)、δ2.38(-CH2CO)、δ2.86(C=CCH2C=C)、δ3.22(PC)、δ5.38(CH=CH)。模型组与空白组相比,含有较多的磷脂胆碱(PC,δ3.22)和不饱和脂肪酸(C=CCH2C=C,δ2.86;CH=CH,δ5.38),较少的饱和脂肪酸((CH2)n-,δ1.3-δ1.34;-CH2CO,δ2.38);电针组与模型组相比含有较多的饱和脂肪酸((CH2)n-,δ1.26),较少的磷脂胆碱(PC,δ3.22)和不饱和脂肪酸(C=CCH2C=C,δ2.86;CH=CH,δ5.38)。结论:1.SAMP8小鼠血浆、肝肾组织的代谢谱图与SAMR1小鼠相比有显著的差异,这种差异主要表现在:血浆谱图中含有较少的岩藻糖(fucose,δ1.3)、3—羟基丁酸(3-HB,δ1.22)和CH3-(δ0.87—δ0.91);肝组织谱图中含有较多的葡萄糖(glucose,δ3.79-δ3.87)和胆碱(choline,δ3.22),较少的牛磺酸(taurine,δ3.27、δ3.43-δ3.47)、糖蛋白(glycoprotein,δ2.02)和(CH2)n-(δ1.34);肾组织谱图中含有较多的磷脂胆碱(PC,δ3.22)和不饱和脂肪酸(C=CCH2C=C,δ2.86;CH=CH,δ5.38),较少的乳酸(lactate,δ1.31-δ1.35)和饱和脂肪酸((CH2)n-,δ1.3-δ1.34;-CH2CO,δ2.38)。2.电针可影响SAMP8小鼠血浆、肝肾组织的代谢产物谱。其对血浆代谢谱图的影响主要是对CH3-(在大分子蛋白上主要为HDL、LDL、VLDL,δ0.87-δ0.91)的调节;对肝组织代谢谱图的影响主要是对葡萄糖(glucose,δ3.79-δ3.87)的调节;对肾组织代谢谱图的影响主要是对磷脂胆碱(PC,δ3.22)和不饱和脂肪酸(C=CCH2C=C,δ2.86;CH=CH,δ5.38)的调节。
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