论文摘要
鸭瘟病毒（DPV）为一种α疱疹病毒，是鸭瘟（DP）的病原。鸭瘟是鸭、鹅和天鹅等水禽的急性、高度接触性传染病，给养禽业造成了巨大的经济损失。进行快速病毒检测和了解其感染、传播及致病机理是预防和控制本病的关键。传统检测DPV的方法存在着特异性及敏感性不高、费时费力等不足，不适于快速诊断、大规模检疫及流行病学调查，因此，迫切需要一种快速、敏感的DPV检测技术。虽然，传统PCR已用于检测DPV，但传统定性PCR无法对病毒核酸进行准确的定量分析。 Real-time PCR技术是近几年发展起来的一种准确定量DNA及mRNA表达水平的新技术，在病毒的快速检测、致病机制及病毒与宿主相互作用等研究上十分有用。本研究基于real-time PCR技术，针对DPV感染分别进行了以下几方面的研究： 1．鸭瘟病毒real-time PCR方法的建立根据鸭瘟病毒DNA聚合酶基因的序列设计引物和探针，建立了基于TaqMan探针及SYBR Green I染料技术的两种real-time PCR方法。结果表明，两种方法均有很好的特异性、敏感性和可重复性，能准确定量DPV DNA，其中，TaqMan技术最低可检测23个拷贝的病毒DNA，在2.3×101～2.3×105copies的范围内有很好的线性关系（r=0.999）；而SYBR Green I方法最低可检测230个
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