青蒿琥酯联合TRAIL对前列腺癌PC-3细胞系作用的实验研究

论文摘要

目的:联合使用青蒿琥酯（Artesunate,ART）和肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TNF Related Apoptosis Inducing Ligand,TRAIL）,探讨两种药物联合使用对人前列腺癌PC-3细胞增殖、周期、凋亡及细胞培养液上清中前列腺特异性抗原（Prostate specific antigen, PSA）浓度等方面的影响及可能机制,寻求对前列腺癌更为有效的治疗方法。方法: （1）根据文献资料和课题组前期研究基础,确定青蒿琥酯四个浓度和TRAIL三个浓度进行配对分组,另设单独使用青蒿琥酯组、单独使用TRAIL组和阴性对照组共15个组,药物处理对数生长期PC-3细胞48小时后,MTT法检测两种药物联合使用的增殖抑制率,进行统计学分析。（2）根据MTT结果,分别选取青蒿琥酯三个浓度和TRAIL两个浓度配对分组,另设阴性对照组共7组,药物处理48小时后流式细胞术进行细胞周期分析。（3）按以上分组,药物处理48小时后运用Annexin V-FITC/PI双染色法在流式细胞仪上检测细胞凋亡率。（4）按以上分组,药物处理48小时后,ELISA法检测PC-3细胞培养液上清中PSA的浓度。结果: （1）MTT结果显示,青蒿琥酯和TRAIL联合应用能够有效抑制前列腺癌PC-3细胞增殖,经过析因方差分析,增殖抑制率的差异与青蒿琥酯和TRAIL均有较好的剂量依赖关系。（2）流式细胞仪细胞周期分析结果显示,G2/M期细胞比例随两种药物浓度的增高而增高,差异有统计学意义,说明联合运用青蒿琥酯和TRAIL能够有效的将PC-3细胞阻滞在G2/M期,但药物处理后G0/G1和S期的细胞比例的变化缺乏统计学意义。（3） Annexin V-FITC/PI双染色法在流式细胞议上检测细胞凋亡率发现,联合用药能有效诱导PC-3细胞凋亡,凋亡率随着两种药物浓度的增高而增高,统计学分析与两种药物均呈良好的剂量依赖关系。（4）ELISA法检测PC-3细胞培养液上清中的PSA浓度发现,联合用药能有效降低培养液上清中的PSA浓度,PSA随着两种药物浓度的增高而降低,统计学分析与两种药物均呈良好的剂量依赖关系。结论:青蒿琥酯联合应用TRAIL,能够有效抑制人前列腺癌PC-3增殖,导致PC-3细胞G2/M期周期阻滞,有效诱导PC-3细胞凋亡,降低PC-3细胞培养液上清PSA等,且两种药物均呈良好的剂量依赖关系,联合用药作用强于单独用药,两者具有协同作用。中药青蒿琥酯联合应用TRAIL有望成为临床治疗前列腺癌新的治疗方案。

论文目录

• 内容摘要
• Abstract
• 引言
• 1 青蒿琥酯联合TRAIL对前列腺癌PC-3细胞增殖的影响
• 1.1 材料与方法
• 1.2 结果与分析
• 1.3 讨论
• 2 青蒿琥酯联合TRAIL 对前列腺癌PC-3 细胞周期的影响
• 2.1 材料与方法
• 2.2 结果与分析
• 2.3 讨论
• 3 青蒿琥酯联合TRAIL 对前列腺癌PC-3 细胞凋亡的影响
• 3.1 材料与方法
• 3.2 结果与分析
• 3.3 讨论
• 4 青蒿琥酯联合TRAIL 对前列腺癌PC-3 细胞PSA 的影响
• 4.1 材料与方法
• 4.2 结果与分析
• 4.3 讨论
• 5 讨论与小结
• 6 进一步研究工作计划及展望
• 参考文献
• 综述
• 后记
• 附录:攻读硕士学位期间发表的部分学术论著