腹毛目纤毛虫皮层微管类细胞骨架及微管蛋白的研究

论文摘要

关于真核生物细胞骨架的研究是细胞生物学的一个重要发展领域。由于原生动物纤毛虫具有多种复杂的细胞骨架结构，加之其材料培养和处理的优点，一直被作为研究细胞骨架结构与功能及其细胞调控的理想材料。20世纪80年代初，许多学者应用蛋白银染色方法和超微结构方法，显示了纤毛虫细胞皮层中以纤毛基体作为主成分的骨架结构，探讨了纤毛虫皮层纤毛器的形态、形态发生及其结构形成机理，在国内外原生动物细胞学领域成为主流。20世纪90年代起，先后应用非离子去垢剂处理和扫描电镜相结合的方法、稳定保存微管结构的透射电镜术，微管蛋白的抗体标记及其免疫荧光技术及相关的生化与分子生物学等方法显示纤毛虫的微管胞器及其微管蛋白组分，探索微管胞器的形态、功能及其微管装配机理，积累了较多的资料，取得了重要的进展。但是，目前仅对草履虫、四膜虫中分散排布的体纤毛基体的装配有较深入的了解，而对不同种纤毛虫的毛基体特别是紧密聚集排列的纤毛器基体微管的装配和基体微管装配在细胞内的启动和发生过程尚未进行深入的研究。鉴于这种情况，本文采用细胞微管结构分化更为复杂，细胞皮层纤毛器形成紧密聚集排列的腹毛目纤毛虫为对象，应用其皮层纤毛器分化具有典型特征的三种纤毛虫，即游仆虫(Euplotes sp.)、贻贝棘尾虫(Stylonychia mytilus)和伪尾柱虫(Pseudourostyla sp.)为材料，应用特异性显示微管及微管蛋白的FLUTAX直接荧光标记法和抗α、抗γ微管蛋白免疫荧光标记法，以及扫描电镜术(SEM)，研究了其皮层微管类细胞骨架的组成和发生；此外，对扩增出的游仆虫、伪尾柱虫编码γ微管蛋白的基因片段进行了序列测定和分析，并采用RNAi喂食法使游仆虫γ微管蛋白基因沉默，初步探讨了γ微管蛋白编码基因的功能。结果如下： 1 纤毛虫皮层纤毛器微管骨架 腹毛目纤毛虫皮层纤毛器微管骨架由口围带、波动膜、额腹横棘毛、背纤毛等纤毛器微管和纤毛器基部附属微管组成。三种纤毛虫皮层纤毛器微管骨架的分

论文目录

• 第一篇 综述
• 第1章 纤毛虫皮层细胞骨架和微管蛋白
• 1 纤毛虫皮层细胞骨架和骨架蛋白
• 2 微管蛋白超家族成员及研究进展
• 3 PTGS及其在微管蛋白基因功能研究中的应用
• 参考文献
• 第二篇 实验研究部分
• 第2章 游仆虫皮层微管类细胞骨架的组成和发生
• 1 材料和方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 第3章 贻贝棘尾虫皮层微管类细胞骨架的组成和发生
• 1 材料和方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 第4章 伪尾柱虫皮层微管类细胞骨架的组成
• 1 材料和方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 小结：几种腹毛目纤毛虫皮层微管类细胞骨架的比较
• 第5章 γ微管蛋白基因片段的序列分析及其功能初探
• 1 材料和方法
• 2 结果和分析
• 3 下一步研究计划
• 参考文献
• 附录Ⅰ
• 缩略语
• 致谢
• 在攻读博士期间参加的科研项目及撰写的论文