抗癌散中抗肿瘤活性成分的研究

论文摘要

抗癌散是中药传统的经验方，通过临床应用具有很好的抗肿瘤作用，临床常用于治疗肺癌、肝癌、脑癌，疗效确切。该方所用药材均为常用无毒的天然植物，其中水红花子为抗癌散的君药，本论文对抗癌散的物质基础进行了相关研究。本论文在中医药理论指导下，通过中药化学、药理学、分子生物学等多学科交叉的研究方法，将复方抗癌散视为整体，用溶剂法将其分成不同的极性部位。药理研究表明，抗肿瘤作用的主要有效部位为乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物。采用色谱法，从正丁醇提取物中分离和鉴定出了5个单体化合物。其中化合物正丁基-β-D-吡喃果糖苷具有较好的抗肿瘤活性，该化合物为首次在该方剂各单味药中发现，这对探讨抗癌散的物质基础具有重要意义。为了深入探讨抗癌散的抗肿瘤作用机理，论文采用分子生物学的方法，通过流式细胞和琼脂糖凝胶电泳分析检测，对复方有效部位中分离出的化合物正丁基-β-D-吡喃果糖苷进行了抗肿瘤的作用机理研究。研究结果表明，该有效成分对肿瘤细胞Bel-7402具有明显的促进凋亡作用，它通过作用于该细胞的S期从而阻滞了细胞生长周期，进一步为抗癌散的临床疗效提供了科学依据。为了探讨中药复方各单味药化学成分在提取过程中的互相影响，本研究采用HPLC法和紫外分光光度法，对本方及配方中的多味药的提取物中薯蓣皂苷元、人参皂苷Rg1、三七皂苷Rg1、芦丁、槲皮素等成分进行了含量分析比较研究，研究结果表明，复方提取物中多种成分的含量明显高于单味药提取物的含量，充分说明复方的共提有助于提高有效成分的转移率，从而为探讨中医复方临床疗效提供了一定依据。在抗癌散较系统的研究基础上，将抗肿瘤活性成分三七皂苷Rg1用壳聚糖包裹成为纳米缓控释制剂，并考察了纳米球的体外释药动力学。纳米微球在胃肠道中能够保持其完整的结构，提高了生物利用度，确保了抗肿瘤药物活性，所以作为口服给药体系，它具有良好的应用前景。从而为研制抗癌散的新剂型奠定了一定的基础。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第1章 引言
• 1.1 中药现代化研究思路与方法概述
• 1.1.1 中药化学成分研究现状
• 1.1.2 中药化学成分研究思路及方法
• 1.2 天然药物抗肿瘤研究概况
• 1.2.1 抗肿瘤活性成分研究概况
• 1.2.2 抗肿瘤药物活性筛选研究概况
• 1.3 抗癌散研究基础
• 1.3.1 临床研究
• 1.3.2 药效研究
• 1.3.3 化学研究
• 1.4 硕士论文的设计思路和研究内容
• 第2章 抗癌散有效部位的研究
• 2.1 仪器与试药
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 仪器设备
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 提取分离
• 2.2.2 活性部位的筛选
• 2.3 结果与讨论
• 第3章 抗癌散有效部位的活性成分研究
• 3.1 试剂与仪器
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 仪器设备
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 活性部位的分离
• 3.2.2 化合物结构的鉴定
• 3.3 活性筛选试验
• 3.4 结果与讨论
• 第4章 抗癌散有效成分作用机理研究
• 4.1 仪器与试药
• 4.2 实验部分
• 4.2.1 人肝癌细胞（Bel-7402）的传代培养
• 4.2.2 实验样品制备
• 4.2.3 流式细胞仪检测细胞标本的制备
• 4.2.4 倒置显微镜检测细胞标本的形态
• 4.2.5 流式细胞仪检测凋亡率及细胞周期
• 4.2.6 琼脂糖凝胶电泳分析
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 细胞形态变化
• 4.3.2 FACS检测结果
• 4.3.3 电泳检测结果
• 4.3.4 讨论
• 第5章 抗癌散提取物与单味药提取物主要成分含量分析比较研究
• 5.1 仪器与试药
• 5.1.1 主要试剂
• 5.1.2 主要仪器
• 5.2 实验部分
• 5.2.1 标准曲线的制备
• 5.2.2 样品的提取与测量
• 5.3 结果与讨论
• 5.3.1 标准曲线
• 5.3.2 样品中标准品的含量
• 5.3.3 讨论
• 第6章 抗癌散活性成分纳米微球新剂型的研究
• 6.1 仪器与试药
• 6.2 实验部分
• 6.2.1 壳聚糖纳米球以及载药纳米球的制备
• 6.2.2 纳米微球结构表征
• 6.2.3 三七皂苷Rg1包封率的测定
• 6.2.4 三七皂苷Rg1释放曲线的制备
• 6.3 结果与讨论
• 6.3.1 微球结构表征
• 6.3.2 不同浓度的TPP和壳聚糖对包封结果的影响
• 第7章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 附录
• 硕士期间已发表和待发表论文及专利目录