玉米胚蛋白多肽的制备研究

论文摘要

玉米属禾本科玉米属玉米种。属C4植物,具有单产量高,产业链较长,增产潜力大等优点,在农业生产中占有重要的地位。目前,玉米是世界三大粮食作物之一,并且已跃居我国第二大粮食作物,又是重要的饲料和医药等工业原料。玉米胚占整个籽粒的8%～12%,蛋白质含量在20%左右,但在玉米加工中却多作为废弃物处理。本研究以本地产内单系列玉米籽粒作为实验材料,采用半湿法提胚,经过烘干,粗粉碎,脱脂,二次粉碎后,用精致中性酶和复合蛋白酶对其进行水解,经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测酶解产物,经过超滤获得所需分子量大小的多肽,最后经脱苦、浓缩干燥得到样品。本研究结果表明:选取的本地产内单系列玉米籽粒,其胚未脱脂样品中蛋白含量为22.71%,蛋白含量较高,适合于作为玉米胚蛋白综合利用、深度加工的原材料。采用盐溶法提蛋白得率低,用该产物再进行酶解损耗较大,不适合用于玉米胚蛋白制备多肽。中性蛋白酶与复合蛋白酶联合作用于玉米胚蛋白,酶解产物经超滤得到分子量集中于200～2000Da的多肽分子,能够达到实验要求。酶解最适条件为:底物浓度3%、中性酶浓度1‰、复合酶浓度2.5‰,分别在其最适pH及温度条件下水解3h。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 引言
• 1.1 概述
• 4植物特征'>1.1.1 C₄植物特征
• 1.1.2 玉米的起源与分布
• 1.1.3 我国玉米的概况
• 1.1.4 玉米的品种类型
• 1.1.5 玉米的用途
• 1.2 籽粒结构及化学组成
• 1.2.1 籽粒结构
• 1.2.2 化学组成
• 1.2.3 胚的成分
• 1.2.4 玉米胚蛋白的组成
• 1.2.5 胚蛋白的功能特性
• 1.3 综合利用与深度开发
• 1.3.1 玉米综合利用深度加工的意义
• 1.3.2 国内外综合利用情况
• 1.3.3 生物活性肽研究进展
• 1.3.4 有关玉米蛋白多肽的研究进展
• 1.4 本课题的研究目的及意义
• 2 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 实验样品来源
• 2.1.2 主要仪器
• 2.1.3 试剂
• 2.1.4 主要试剂和溶液的配制
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 总工艺流程
• 2.2.2 半湿法提胚
• 2.2.3 制备脱脂玉米胚粉
• 2.2.3.1 工艺流程
• 2.2.3.2 具体操作
• 2.2.4 玉米胚粉蛋白质含量的测定（微量凯氏定氮法）
• 2.2.4.1 原理
• 2.2.4.2 实验步骤
• 2.2.4.3 结果计算
• 2.2.5 玉米胚芽粗蛋白的提取
• 2.2.5.1 原理
• 2.2.5.2 工艺流程
• 2.2.5.3 具体操作
• 2.2.6 蛋白含量的测定（双缩脉法）
• 2.2.6.1 原理
• 2.2.6.2 操作方法
• 2.2.7 水解度的测定
• 2.2.7.1 原理
• 2.2.7.2 具体操作
• 2.2.8 酶解
• 2.2.8.1 酶解因素的正交选择
• 2.2.8.2 酶解反应
• 2.2.9 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测
• 2.2.9.1 原理
• 2.2.9.2 具体操作
• 2.2.10 酶解液的分级分离
• 2.2.11 多肽液的脱苦
• 2.2.12 浓缩与干燥
• 3 结果与讨论
• 3.1 结果
• 3.1.1 蛋白含量测定
• 3.1.2 盐提法提取蛋白得率计算
• 3.1.3 水解度的测定结果
• 3.1.4 双酶切最佳水解工艺的选定
• 3.1.5 电泳检测结果
• 3.1.6 超滤后酶液的分子量分布
• 3.2 讨论
• 3.2.1 实验材料的确定
• 3.2.2 蛋白含量的测定
• 3.2.3 胚蛋白的提取
• 3.2.4 提取胚蛋白后的处理
• 3.2.5 蛋白酶的选择
• 3.2.6 酶解最佳条件的选择
• 3.2.7 酶解产物分子量分析
• 3.2.8 后续可进行的研究方向
• 4 结论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文目录