树舌多糖GF辅助RNAi抑制肝癌细胞CDK2基因表达的研究

树舌多糖GF辅助RNAi抑制肝癌细胞CDK2基因表达的研究

论文摘要

目的:研究树舌多糖GF对SMMC7721肝癌细胞中细胞周期调控因子CDK2基因表达的影响;以及其对RNAi抑制CDK2基因表达的辅助作用,进一步探明树舌多糖抗肿瘤的机理,同时也为肿瘤的基因治疗提供一个新的技术平台和先进方法。方法:MTT法检测中药树舌多糖GF体外对SMMC7721肝癌细胞增殖抑制情况并筛选出抗瘤的有效树舌多糖剂量;采用基因重组技术构建CDK2基因的siRNA真核表达载体,阳离子脂质体试剂法转染SMMC7721肝癌细胞;采用荧光定量PCR与Western blotting方法研究树舌多糖对肝癌SMMC7721细胞CDK2基因表达的影响并探讨其对RNAi沉默CDK2基因表达的辅助作用。结果:1.树舌多糖GF 2.5μg·mL-1、5μg·mL-1和10μg·mL-1剂量对体外SMMC7721肝癌细胞增殖有抑制作用,抑制率分别为20.01%、20.47%和24.44%。2.与SMMC7721肝癌细胞组相比,树舌多糖GF2.5μg·mL-1、5μg·mL-1和10μg·mL-1组可以使CDK2基因mRNA表达水平分别降低45%、40%和42%;树舌多糖GF2.5μg·mL-1和GF10μg·mL-1组可以使CDK2基因蛋白表达水平分别下降53.9%和18.0%。3.成功构建以CDK2基因为靶点的siRNA190和siRNA191真核表达载体,并转染入肝癌细胞,转染效率在90%以上。4.树舌多糖GF 10μg·mL-1使siRNA190抑制CDK2蛋白水平提高47.1%;GF 2.5μg·mL-1使siRNA191抑制CDK2 mRNA和蛋白水平分别提高3%和13.3%。结论:1.树舌多糖GF对体外SMMC7721肝癌细胞的增殖有一定的抑制作用,机制可能是通过下调CDK2基因表达实现的。2.成功构建以CDK2基因为靶点的siRNA真核表达载体,转染入SMMC7721肝癌细胞中可以特异地沉默CDK2基因表达,表明CDK2基因可能成为肝癌基因治疗中的一个新的靶点。3.树舌多糖GF对RNA干扰CDK2基因表达有辅助作用,表明树舌多糖GF可能成为肝癌基因治疗中的一个新的辅助药物。

论文目录

  • 缩略语表
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 前言
  • 文献综述
  • 一 细胞周期调控概述
  • 二 CDK2基因概述
  • 三 CDK2基因与肿瘤
  • 四 RNAi的研究进展
  • 五 中药多糖抗肿瘤的作用机制
  • 六 树舌多糖GF抗肿瘤的作用机制研究
  • 七 展望
  • 实验研究
  • 材料与方法
  • 结果
  • 讨论
  • 结论
  • 致谢
  • 参考文献
  • 附图
  • 发表的论文
  • 相关论文文献

    • [1].周期素A和CDK2在结直肠癌中的表达及其临床意义[J]. 江苏医药 2011(13)
    • [2].CDK2蛋白在胆管细胞癌中的表达及临床意义[J]. 华南国防医学杂志 2010(01)
    • [3].Cdk2在皮肤淋巴瘤中的表达及统计分析[J]. 数理医药学杂志 2010(05)
    • [4].CDK2在非小细胞肺癌组织中的表达[J]. 龙岩学院学报 2014(02)
    • [5].CDK2在鼻咽癌中的表达及意义[J]. 中华全科医学 2011(07)
    • [6].瑞香狼毒药效组分诱导人肝癌细胞凋亡及对细胞周期依赖性蛋白激酶CDK2的影响[J]. 中药药理与临床 2011(05)
    • [7].CDK2、P57在子宫内膜腺癌中的表达及意义[J]. 中国医疗前沿 2011(06)
    • [8].Cdk2蛋白和CyclinE在胆管细胞癌中的表达及临床意义[J]. 现代生物医学进展 2010(13)
    • [9].p-Akt、CDK2的表达与非小细胞肺癌新辅助化疗的相关性研究[J]. 河北医药 2014(07)
    • [10].p-Akt和CDK2的表达与非小细胞肺癌新辅助化疗的相关性研究[J]. 河北医药 2014(10)
    • [11].胃癌中Cdk2和p21的表达及其与临床病理和预后的关系[J]. 江苏医药 2014(17)
    • [12].CDK2、p27及Ki-67在甲状腺乳头状癌中的表达及意义[J]. 中国卫生产业 2013(14)
    • [13].熊果酸通过抑制CDK2活性诱导HepG_2细胞凋亡[J]. 中药材 2014(06)
    • [14].白花蛇舌草对人肝癌HepG2细胞Cdk2和E2F1 mRNA表达的影响[J]. 福建中医药 2012(02)
    • [15].胃癌中CDK1和CDK2的表达及预后意义[J]. 中国组织化学与细胞化学杂志 2010(02)
    • [16].高氧诱导新生鼠肺纤维化中CDK2及P27的表达和意义[J]. 中国医科大学学报 2010(10)
    • [17].氯沙坦对Thy1肾炎大鼠肾小球系膜细胞CDK2表达的影响[J]. 中国老年学杂志 2013(11)
    • [18].甲状腺癌中CyclinE及CDK2的表达及意义[J]. 中国医疗前沿 2013(01)
    • [19].CyclinE和cdk2在眼睑基底细胞癌组织中的表达及其意义[J]. 中国组织化学与细胞化学杂志 2012(02)
    • [20].CDK2、p27kip1蛋白与宣威地区非小细胞肺癌的关系[J]. 昆明医学院学报 2011(02)
    • [21].哺乳动物细胞CDK2系列表达载体的构建与表达[J]. 癌变·畸变·突变 2011(04)
    • [22].基于靶蛋白结构的CDK2小分子抑制剂研究进展[J]. 中国新药杂志 2011(17)
    • [23].艾灸预刺激对AD模型大鼠细胞周期蛋白CDK2、p21/cip的影响[J]. 现代中西医结合杂志 2013(29)
    • [24].CDK2促进K562细胞早期红系分化[J]. 基础医学与临床 2011(05)
    • [25].树舌多糖GF对siRNA干扰沉默CDK2基因表达的辅助作用[J]. 牡丹江医学院学报 2014(01)
    • [26].苦丁茶熊果酸对鼻咽癌细胞凋亡的诱导及对NF-κB P65及CDK2表达的影响[J]. 广西医科大学学报 2014(02)
    • [27].降钙素基因相关肽对大鼠血管平滑肌细胞CDK2和Cyclin E的影响[J]. 中国临床药理学与治疗学 2011(03)
    • [28].猪Cdk2基因的克隆及其功能研究[J]. 畜牧兽医学报 2013(10)
    • [29].树舌多糖GF对小鼠H_(22)瘤CDK2基因表达的影响[J]. 中医药信息 2010(05)
    • [30].树舌多糖GF抑制肝癌细胞SMMC7721增殖及对CDK2基因表达的影响[J]. 中医药学报 2012(06)

    标签:;  

    树舌多糖GF辅助RNAi抑制肝癌细胞CDK2基因表达的研究
    下载Doc文档

    猜你喜欢