赵月龙:基于A型塞尼卡病毒结构蛋白VP1间接ELISA检测方法的建立及初步应用论文

赵月龙:基于A型塞尼卡病毒结构蛋白VP1间接ELISA检测方法的建立及初步应用论文

本文主要研究内容

作者赵月龙,闫若潜,王淑娟,马震原,班付国,赵雪丽,谢彩华,杨朋霞(2019)在《基于A型塞尼卡病毒结构蛋白VP1间接ELISA检测方法的建立及初步应用》一文中研究指出:为建立A型塞尼卡病毒(SVA)血清学检测方法,本研究根据GenBank中SVA基因序列设计引物,PCR扩增其VP1基因,将目的片段克隆于p ET-32a(+)表达载体中,在大肠杆菌BL21(DE3+)中诱导表达。利用纯化的重组VP1 (rVP1)蛋白作为包被抗原,通过矩阵法优化ELISA反应条件,初步建立了SVA的间接ELISA抗体检测方法。对该方法的特异性、敏感性和重复性进行检测;利用该方法对43份背景清晰的猪血清进行检测,并与中和试验结果进行比较;同时对205份临床猪血清样品进行检测。结果显示,本研究正确表达了约51.0 ku的可溶性重组蛋白,western blot试验表明纯化的r VP1蛋白具有良好的反应原性,以r VP1蛋白建立了间接ELISA方法。特异性试验结果显示该ELISA方法可以检测SVA抗体,而与FMDV (O/A/Asia I)、 PEDV、 PCV2、PRRSV、PRV等病原的抗血清均无交叉反应;敏感性试验结果显示样品经1∶800倍稀释后折OD450nm值仍大于临界值;批内、批间的重复性试验变异系数均小于10%,具有较好的重复性和稳定性。43份猪血清样品的检测结果与中和试验符合率为93.02%。205份临床猪血清样品的阳性检出率为5.37%。本研究为SVA血清学检测提供了技术手段。

Abstract

wei jian li Axing sai ni ka bing du (SVA)xie qing xue jian ce fang fa ,ben yan jiu gen ju GenBankzhong SVAji yin xu lie she ji yin wu ,PCRkuo zeng ji VP1ji yin ,jiang mu de pian duan ke long yu p ET-32a(+)biao da zai ti zhong ,zai da chang gan jun BL21(DE3+)zhong you dao biao da 。li yong chun hua de chong zu VP1 (rVP1)dan bai zuo wei bao bei kang yuan ,tong guo ju zhen fa you hua ELISAfan ying tiao jian ,chu bu jian li le SVAde jian jie ELISAkang ti jian ce fang fa 。dui gai fang fa de te yi xing 、min gan xing he chong fu xing jin hang jian ce ;li yong gai fang fa dui 43fen bei jing qing xi de zhu xie qing jin hang jian ce ,bing yu zhong he shi yan jie guo jin hang bi jiao ;tong shi dui 205fen lin chuang zhu xie qing yang pin jin hang jian ce 。jie guo xian shi ,ben yan jiu zheng que biao da le yao 51.0 kude ke rong xing chong zu dan bai ,western blotshi yan biao ming chun hua de r VP1dan bai ju you liang hao de fan ying yuan xing ,yi r VP1dan bai jian li le jian jie ELISAfang fa 。te yi xing shi yan jie guo xian shi gai ELISAfang fa ke yi jian ce SVAkang ti ,er yu FMDV (O/A/Asia I)、 PEDV、 PCV2、PRRSV、PRVdeng bing yuan de kang xie qing jun mo jiao cha fan ying ;min gan xing shi yan jie guo xian shi yang pin jing 1∶800bei xi shi hou she OD450nmzhi reng da yu lin jie zhi ;pi nei 、pi jian de chong fu xing shi yan bian yi ji shu jun xiao yu 10%,ju you jiao hao de chong fu xing he wen ding xing 。43fen zhu xie qing yang pin de jian ce jie guo yu zhong he shi yan fu ge lv wei 93.02%。205fen lin chuang zhu xie qing yang pin de yang xing jian chu lv wei 5.37%。ben yan jiu wei SVAxie qing xue jian ce di gong le ji shu shou duan 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国预防兽医学报的赵月龙,闫若潜,王淑娟,马震原,班付国,赵雪丽,谢彩华,杨朋霞,发表于刊物中国预防兽医学报2019年08期论文,是一篇关于型塞尼卡病毒论文,基因论文,表达论文,间接论文,中国预防兽医学报2019年08期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国预防兽医学报2019年08期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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