论文摘要
目的：采用早期兔骨性关节炎模型的实验方法,观察磷酯酰肌醇-3激酶和蛋白激酶B（PI3K/AKT）信号途径akt的Thr308表位在兔膝早期骨关节炎关节软骨中的活化程度,探讨牛膝总皂甙对兔膝早期骨关节炎及PI3K/AKT通路的影响,为评价牛膝总皂甙治疗早期骨性关节炎的临床疗效提供实验依据。方法：30只新西兰兔随机分为3组,每组10只,分别为：正常组、模型组和牛膝总皂甙组。除正常组,其余各组采用Hulth法复制膝骨关节炎模型,灌胃14天,造模术后45大处死。Masson染色法观察软骨形态学变化并进行Mankin评分,检测关节液的NO含量,流式细胞术检测软骨细胞的凋亡率,应用免疫印迹法检测关节软骨PI3K/AKT通路AKT的Thr308表位活化程度。结果：1、关节软骨病理结果：大体标本观察模型组与正常组比较,模型组软骨失去原有光泽,透亮度减低,表面灰白。光镜下观察模型组与止常组比较,模型组软骨增厚,软骨细胞排列顺序紊乱。2、Mankin评分结果：模型组、牛膝总皂甙组Mankin评分显著高于正常组（P<0.05）。与模型组比较,牛膝总皂甙组的Mankin评分均明显降低（P<0.05）。3、关节液NO含量：模型组、牛膝总皂甙组关节液NO含量高于正常组（P<0.05）,牛膝总皂甙组的关节液NO含量明显低于模型组（P<0.05）。4、软骨细胞凋率检测：模型组和牛膝总皂甙组的软骨细胞凋亡率高于正常组（P<0.05）,牛膝总皂甙组的软骨细胞凋亡率明显低于模型组（P<0.05）。5、骨关节软骨组织AKT蛋白的Thr308表位活化程度：模型组的软骨组织AKT蛋白的Thr308表位活化程度低于正常组,牛膝总皂甙组的与正常组接近。结论：牛膝总皂甙可以降低关节液NO含量和软骨细胞的凋亡水平,提高AKT的Thr308表位在兔膝软骨细胞中的活化程度,其机制可能与其能干预PI3K/AKT信号转导通路提高AKT的Thr308表位活化程度有关,对防治早期骨性关节炎可能有一定的意义。
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