论文摘要
核心蛋白聚糖（decorin,DCN）属于分泌型、小分子、富含亮氨酸多糖基因扩展家族成员之一,主要存在于结缔组织中并且是一种与胶原纤维相关的蛋白多糖,研究发现它能抑制细胞增殖和抗纤维化,具有抗肿瘤的作用。目前国内外还没有decorin基因转染到肝癌细胞HepG2中以及研究decorin抗肝癌机制的报道,本实验采用体外基因重组技术构建了真核表达载体pcDNA3.1-decorin,并且转染到肝癌细胞HepG2中,探讨其对肝癌细胞的作用机理。本研究成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-decorin,并转染到肝癌细胞HepG2中;结果发现decorin能够抑制肝癌细胞HepG2生长,FCM方法检测细胞周期发现pcDNA3.1-dec-HepG2组G0/G1期细胞比pcDNA3.1-HepG2组G0/G1期细胞明显升高、S期细胞显著降低,细胞生长停滞在G0/G1期; Caspase-3、Caspase-8活性检测发现pcDNA3.1-dec-HepG2组细胞比pcDNA3.1-HepG2组细胞显著升高,RT-PCR和western blot方法显示pcDNA3.1-dec-HepG2组细胞周期依赖激酶抑制剂P21 mRNA和蛋白质比pcDNA3.1-HepG2组细胞显著升高, RT-PCR方法显示pcDNA3.1-dec-HepG2组细胞转化生长因子TGF-β1比pcDNA3.1-HepG2组细胞显著降低。上述结果为进一步研究decorin抗肿瘤的作用机制奠定了基础,同时也为decorin的临床应用提供了理论依据。
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