HMGB1、TopBP1在膀胱癌中的表达及临床意义

论文摘要

肿瘤的发生与发展是一个十分复杂的过程，当前众多研究表明，肿瘤的生物学行为是由细胞内单个或多个基因的改变决定的，癌基因的激活和抗癌基因的失活是正常细胞转化成癌细胞的主要原因，因此，对肿瘤的分子遗传学研究不仅有助于肿瘤的诊断及预后判断，而且对肿瘤发病机制及肿瘤基因的研究均有着重要的指导意义。尽管此方面的研究尚处于初期，但从已有研究中已获得了某些启示。如膀胱癌的发生是多因素共同作用的结果，且近年来的研究表明，膀胱癌的发生、发展、及其恶性行为均与其遗传上的分子生物学改变，也即基因表达改变，以及由此引起的蛋白表达及功能改变有密切关系。目前，研究焦点则是膀胱正常移行细胞与膀胱移行细胞癌细胞间的基因差异表达；差异表达基因在膀胱癌发生、发展中所发挥的作用以及作用机制；差异表达基因与膀胱癌分期、分级、复发以及预后的相关性，即它们在膀胱癌演进过程中所起的分子生物学特性改变。本课题旨在研究人正常膀胱移行上皮细胞与膀胱移行细胞癌之间的差异表达基因，确定其与膀胱移行细胞癌生物学行为之间的关系。在前期研究中，我们联合LCM、RNA Amplification、DDRT-PCR技术，确定50个在膀胱移行细胞癌细胞与膀胱正常移行细胞中呈现表达差异的基因片段。本课题选取其中6条差异表达基因条带进行研究。第一部分膀胱癌与膀胱移形细胞差异表达基因研究目的：明确差异表达基因为膀胱癌相关基因。方法：（1）差异表达基因条带克隆、测序（2）测序结果于Genebank进行检索以及同源性分析（3）Quantitative real-time PCR检测差异基因相对表达强度。结果：（1）对6条差异表达基因片段分别命名为BC1-6；（2）6条差异表达基因片段经Genebank检索结果：部分与已知基因同源；部分与人类染色体克隆序列同源；（3）2条差异表达基因经Quantitative real-time PCR定量分析，从基因水平上确定HMGB1，TopBP1为膀胱癌相关基因。结论：（1）从基因水平确定HMGB1，TopBP1为膀胱癌相关基因。（2）推断BC2、3、4、5可能是新的肿瘤及膀胱癌相关基因。第二部分HMGB1、TopBP1蛋白在膀胱癌表达水平研究目的：（1）明确HMGB1、TopBP1基因相应蛋白在膀胱癌与正常膀胱移行细胞间是否存在相应的表达水平差异，进而从蛋白水平确定此二种基因为肿瘤及／或膀胱癌相关基因。（2）明确此二种蛋白与膀胱移行细胞癌分级、浸润程度的相关性，从而确定差异基因所表达蛋白与膀胱癌的发生、发展的可能相关性。方法：应用组织芯片免疫组化技术，检测HMGB1、TopBP1在膀胱移行细胞（30例）、膀胱移行细胞癌Ⅰ级（30例）、膀胱移行细胞癌Ⅱ级（30例）、膀胱移行细胞癌Ⅲ级（30例）中的表达，并分析其表达水平与癌细胞分级、浸润深度的相关性。结果：（1）HMGB1蛋白膀胱癌高于膀胱移行细胞，与在基因水平上确定的表达差异相一致；表达水平与癌细胞分级负相关；表达水平与癌浸润深度正相关。（2）TopBP1蛋白表达水平膀胱癌低于膀胱移行细胞；与在基因水平上确定的表达差异相一致。与膀胱癌分级、浸润深度无关；结论：（2）从基因水平、蛋白水平确定HMGB1为膀胱癌相关癌基因。（1）从基因水平、蛋白水平确定TopBP1为肿瘤及／或膀胱癌相关抑癌基因。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一部分 膀胱癌与膀胱移形细胞差异表达基因研究
• 绪论
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 第二部分 HMGB1、TopBP1在膀胱癌中表达水平研究
• 绪论
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 在学期间发表论文及参加科研情况说明
• 致谢