生物转化法和无机催化法制备人参二醇类苷元的研究

论文摘要

本文研究了生物酶法和Fe3+无机催化法水解人参二醇类皂苷制备苷元（PPD）,并对产物进行了分离纯化。生物酶法催化反应中,菌株Absidia.sp.G48r在3.5%的人参诱导下、培养9d可以产水解人参皂苷20（R）-Rg3的酶;该菌株在1.5%的人参诱导下,培养6d可以产水解人参皂苷20（S）-Rg3的酶。20（R）-Rg3生成PPD最佳酶反应条件为:浓度l.Omg/ml、温度50℃C、pH 4.0、时间60h;20（S）-Rg3生成PPD最佳酶反应条件为:浓度为2.0mg/ml,温度50℃C,pH5.0,时间 24h。1.0g人参皂苷Rg3（R:S=14:86）在最适条件下,进行酶反应,经正丁醇萃取后得人参皂苷粗品0.772g,得率为77.2%,再经石油醚萃取得人参皂苷0.117g,得率为11.7%。经两步有机萃取后,产物人参皂苷元含量由80.06%上升为86.94%。Fe3+无机催化法中,探讨了底物浓度、Fe3+浓度、温度、反应时间对反应效果的影响,得出此实验方法中最佳反应条件为:底物浓度3.0mg/ml,Fe3+浓度为1.8mmol/L,反应温度为50℃℃,反应时间为30h。1.5g人参皂苷C-K在最佳条件下反应,经乙酸乙酯萃取后得人参皂苷粗品0.825g,得率为55.0%,再经石油醚萃取后得人参皂苷0.131g,得率为8.7%。经两步有机萃取后,产物人参皂苷元含量由71.34%上升为84.45%。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1.1 人参
• 1.1.1 人参的分类
• 1.1.2 人参的化学成分
• 1.2 人参皂苷
• 1.2.1 人参皂苷
• 1.2.1.1 齐礅果酸型皂苷
• 1.2.1.2 原人参二醇类皂苷
• 1.2.1.3 原人参三醇类皂苷
• 1.2.1.4 其他类人参皂苷
• 1.2.2 人参皂苷的理化性质
• 1.2.2.1 溶解性
• 1.2.2.2 起泡性和溶血性
• 1.2.2.3 稳定性
• 1.3 人参皂苷药理活性的研究
• 1.3.1 对中枢神经系统的作用
• 1.3.2 对内分泌系统的作用
• 1.3.3 对心血管系统的作用
• 1.3.4 人参皂苷的抗肿瘤活性
• 1.4 次级人参皂苷及皂苷元的制备研究现状
• 1.4.1 酸降解法
• 1.4.2 碱降解法
• 1.4.3 加热法
• 1.4.4 化学合成法
• 1.4.5 生物转化法
• 1.5 人参皂苷的分析鉴定
• 1.5.1 比色法
• 1.5.2 薄层层析法（TLC）和薄层扫描法（TLCS）
• 1.5.3 高效液相色谱法（HPLC）
• 1.5.4 蒸发光散射检测（ELSD）
• 1.5.5 其他分析方法
• 1.6 本论文的研究内容与意义
• 第二章 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 菌种
• 2.1.2 材料与试剂
• 2.1.3 仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 检测方法
• 2.2.2 溶液配制
• 2.2.2.1 缓冲液的配制
• 2.2.2.2 底物溶液的制备
• 2.2.2.3 酶液的制备
• 3+溶液的制备'>2.2.2.4 Fe³⁺溶液的制备
• 2.2.3 生物转化法制备人参二醇类苷元PPD
• 2.2.3.1 菌株的筛选
• 2.2.3.2 菌株发酵条件的确定
• 2.2.3.3 酶反应最适条件的确定
• 2.2.3.4 人参皂苷糖苷酶的水解作用
• 2.2.3.5 酶反应产物萃取条件的确定
• 3+)制备人参二醇类苷元PPD'>2.2.4 无机催化法(Fe³⁺)制备人参二醇类苷元PPD
• 2.2.4.1 底物的选择
• 2.2.4.2 无机催化法最适反应条件的确定
• 2.2.4.3 无机催化法萃取条件的确定
• 2.2.5 人参二醇类皂苷元的制备
• 2.2.5.1 生物转化法水解制备人参皂苷元
• 2.2.5.2 无机催化法制备人参皂苷元
• 第三章 结果与讨论
• 3.1 生物转化法制备人参二醇类皂苷元PPD
• 3.1.1 人参皂苷酶高产菌株的筛选
• 3.1.2 最适条件的优化
• 3.1.2.1 最适诱导物的确定
• 3.1.2.2 最适诱导物浓度的确定
• 3.1.2.3 培养时间的确定
• 3.1.3 人参皂苷酶解反应条件的优化
• 3.1.3.1 底物浓度的确定
• 3.1.3.2 反应温度的确定
• 3.1.3.3 pH值的确定
• 3.1.3.4 反应时间的确定
• 3.1.4 人参皂苷酶的水解作用
• 3.1.5 萃取条件的确定
• 3.1.5.1 萃取剂的选择
• 3.1.5.2 萃取温度的确定
• 3.1.5.3 萃取时间的确定
• 3.1.5.4 萃取次数的确定
• 3.2 无机催化法反应条件的优化
• 3.2.1 底物的选择
• 3.2.2 无机催化法条件的优化
• 3.2.2.1 底物浓度的确定
• 3+浓度的确定'>3.2.2.2 Fe³⁺浓度的确定
• 3.2.2.3 反应温度的确定
• 3.2.2.4 反应时间的确定
• 3.2.3 萃取条件的确定
• 3.2.3.1 萃取剂的确定
• 3.2.3.2 萃取温度的确定
• 3.2.3.3 萃取时间的确定
• 3.2.3.4 萃取次数的确定
• 3.3 制备人参皂苷元
• 3.3.1 生物转化法水解制备人参皂苷元
• 3.3.2 无机催化法制备人参皂苷元
• 第四章 结论
• 参考文献
• 致谢