王周全:长霜足蛛毒素的分子多样性和活性研究论文

王周全:长霜足蛛毒素的分子多样性和活性研究论文

本文主要研究内容

作者王周全(2019)在《长霜足蛛毒素的分子多样性和活性研究》一文中研究指出:长霜足蛛(Cyriopagopus longipes)是一种栖息在泰国、老挝和柬埔寨等东南亚国家的大型捕鸟蛛。到目前为止,还没有关于长霜足蛛毒素研究的报道,本论文将首次研究长霜足蛛多肽毒素的多样性和粗毒的活性,为长霜足蛛多肽毒素的进一步研究奠定基础。首先构建了长霜足蛛毒腺cDNA文库,随机挑选出文库中的单克隆进行测序,获得了323条表达序列标签。这些表达序列标签经过软件分析,其中120条编码类毒素前体蛋白,46条编码细胞蛋白相关序列,157条没能匹配到任何已知的序列。通过软件预测323条表达序列标签表达的蛋白,显示这些表达序列标签可表达104条毒素前体序列,进一步比较这些毒素前体序列的序列相似性后将它们归类为10个超家族。比较10个超家族的序列进行分析后发现,长霜足蛛中多肽毒素大多含有3对二硫键,小部分有4对二硫键,极少的毒素为不含二硫键的线性肽,并且发现长霜足蛛毒素前体序列和虎纹捕鸟蛛的毒素前体序列有很高的相似性。通过构建进化树以及序列的对比方式,分析虎纹捕鸟蛛和长霜足蛛毒素前体的序列差异性,发现两种蜘蛛的部分毒素的前体序列有很高的相似度,在进化关系上有较高的亲缘性,为研究长霜足蛛和虎纹捕鸟蛛进化关系提供了依据。通过高效液相色谱分离长霜足蛛的粗毒共得到40多个色谱峰,经过质谱鉴定总共得到64种多肽分子,其中超过一半的多肽毒素的分子量在3000-5000Da范围内。动物实验显示长霜足蛛粗毒对小鼠的LD50为0.708 mg/kg,对美洲蜚蠊的致死作用效果较弱,200?g/g的浓度仅能造成麻痹作用。膜片钳实验检测了长霜足蛛粗毒在100?g/mL的浓度下对大鼠DRG细胞电压门控离子通道的影响,结果显示粗毒对DRG细胞的钠、钾和钙离子通道都有一定的抑制作用,对高电压激活钙通道的抑制率最高,达到67.7%±5.1%。

Abstract

chang shuang zu zhu (Cyriopagopus longipes)shi yi chong qi xi zai tai guo 、lao wo he jian bu zhai deng dong na ya guo jia de da xing bu diao zhu 。dao mu qian wei zhi ,hai mei you guan yu chang shuang zu zhu du su yan jiu de bao dao ,ben lun wen jiang shou ci yan jiu chang shuang zu zhu duo tai du su de duo yang xing he cu du de huo xing ,wei chang shuang zu zhu duo tai du su de jin yi bu yan jiu dian ding ji chu 。shou xian gou jian le chang shuang zu zhu du xian cDNAwen ku ,sui ji tiao shua chu wen ku zhong de chan ke long jin hang ce xu ,huo de le 323tiao biao da xu lie biao qian 。zhe xie biao da xu lie biao qian jing guo ruan jian fen xi ,ji zhong 120tiao bian ma lei du su qian ti dan bai ,46tiao bian ma xi bao dan bai xiang guan xu lie ,157tiao mei neng pi pei dao ren he yi zhi de xu lie 。tong guo ruan jian yu ce 323tiao biao da xu lie biao qian biao da de dan bai ,xian shi zhe xie biao da xu lie biao qian ke biao da 104tiao du su qian ti xu lie ,jin yi bu bi jiao zhe xie du su qian ti xu lie de xu lie xiang shi xing hou jiang ta men gui lei wei 10ge chao jia zu 。bi jiao 10ge chao jia zu de xu lie jin hang fen xi hou fa xian ,chang shuang zu zhu zhong duo tai du su da duo han you 3dui er liu jian ,xiao bu fen you 4dui er liu jian ,ji shao de du su wei bu han er liu jian de xian xing tai ,bing ju fa xian chang shuang zu zhu du su qian ti xu lie he hu wen bu diao zhu de du su qian ti xu lie you hen gao de xiang shi xing 。tong guo gou jian jin hua shu yi ji xu lie de dui bi fang shi ,fen xi hu wen bu diao zhu he chang shuang zu zhu du su qian ti de xu lie cha yi xing ,fa xian liang chong zhi zhu de bu fen du su de qian ti xu lie you hen gao de xiang shi du ,zai jin hua guan ji shang you jiao gao de qin yuan xing ,wei yan jiu chang shuang zu zhu he hu wen bu diao zhu jin hua guan ji di gong le yi ju 。tong guo gao xiao ye xiang se pu fen li chang shuang zu zhu de cu du gong de dao 40duo ge se pu feng ,jing guo zhi pu jian ding zong gong de dao 64chong duo tai fen zi ,ji zhong chao guo yi ban de duo tai du su de fen zi liang zai 3000-5000Dafan wei nei 。dong wu shi yan xian shi chang shuang zu zhu cu du dui xiao shu de LD50wei 0.708 mg/kg,dui mei zhou fei lian de zhi si zuo yong xiao guo jiao ruo ,200?g/gde nong du jin neng zao cheng ma bi zuo yong 。mo pian qian shi yan jian ce le chang shuang zu zhu cu du zai 100?g/mLde nong du xia dui da shu DRGxi bao dian ya men kong li zi tong dao de ying xiang ,jie guo xian shi cu du dui DRGxi bao de na 、jia he gai li zi tong dao dou you yi ding de yi zhi zuo yong ,dui gao dian ya ji huo gai tong dao de yi zhi lv zui gao ,da dao 67.7%±5.1%。

论文参考文献

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  • 读者推荐
  • [1].黑寡妇蜘蛛卵粒毒素Latroeggtoxin-Ⅳ的结构与功能分析[D]. 雷倩.湖南师范大学2015
  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自湖南师范大学的王周全,发表于刊物湖南师范大学2019-10-31论文,是一篇关于长霜足蛛论文,文库论文,蜘蛛毒素论文,进化树论文,湖南师范大学2019-10-31论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自湖南师范大学2019-10-31论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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