论文摘要
Pokemon分子在人类肿瘤如T、B细胞淋巴瘤、乳腺癌、肺癌、结肠癌、前列腺癌和膀胱癌等疾病的肿瘤中异常高表达,被直接证明是肿瘤发生的一个关键因素。POK蛋白家族成员在胚胎发育分化和致瘤中也发挥着至关重要的作用。Pokemon （POK细胞髓样发生因子,亦称为LRF, OCZF和FBI-1 ）是POK蛋白家族成员,由Zbtb7基因编码,在细胞分化中作用居多并且自身能够影响其它的POK家族成员。缺失Zbtb7基因的小鼠胚胎成纤维细胞对其它原癌基因（如E1A、Ras、Myc和T-Ag等）介导的细胞转化完全无反应;在转基因小鼠模型中Pokemon的过表达导致了肿瘤的发生,并且证明了它是通过直接结合而特异地抑制肿瘤抑制基因ARF的转录。Pokemon基因的作用模式为:Pokemon↑↑→ARF↓→MDM2→p53↓→肿瘤发生。因此,以Pokemon基因为靶标的肿瘤基因治疗具有十分重要的意义。为解决靶向沉默Pokemon基因来治疗肿瘤的问题,我们借鉴了近几年来出现的有关RNA干扰（RNA interference, RNAi ）的实验研究。RNAi是出现在多种生物体内、进化上高度保守的一种基因保护机制,被称为“基因组的免疫系统”。其基本作用途径为:长dsRNA被具有RNaseIII活性的Dicer复合体切割成21-23bp的小双链RNA或称为小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）,siRNA的负链与其它多种成分组成RISC （RNA- induced silencing complex）,最后通过碱基配对的方式触发同源mRNA的特异性降解。现在,siRNA已经成为应用于临床疾病防治研究的有力工具。已经证实,siRNA对HBV、HIV等病毒和前列腺癌、白血病等肿瘤细胞基因都有很好的沉默作用。这些都为本课题研究将RNAi应用到肿瘤的基因治疗领域提供了理论依据。基于此,本研究利用RNAi技术对Pokemon基因表达进行抑制以达到治疗肿瘤的目的,进行了以下研究:1、针对Pokemon基因的siRNA逆转录病毒重组表达质粒的构建及鉴定（1）设计针对Pokemon基因的靶序列:利用美国著名RNA产品公司Ambion提供的网上在线设计工具,记录每个AA的3’-端19个氨基酸作为潜在siRNA靶位点。潜在靶位点通过BLAST分析,去除同源性的靶序列,选择GC含量在40-55%的靶位点
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- [13].siRNA干扰人核糖核酸酶抑制因子在HeLa细胞中的表达鉴定[J]. 中国医药导报 2014(25)
- [14].迷迭香精油诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的实验研究[J]. 中山大学学报(医学科学版) 2008(S1)
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- [16].松针油诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及其作用机制研究[J]. 热带医学杂志 2008(07)
- [17].珊瑚姜油对宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的影响[J]. 医药导报 2017(01)
- [18].灰树花多糖协同顺铂对HeLa细胞凋亡的影响[J]. 中国老年学杂志 2017(03)
- [19].槲皮素单独及联合放射线对Hela细胞生物学行为的影响[J]. 时珍国医国药 2016(11)
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- [28].那可丁对宫颈癌HeLa细胞的抑制作用及机制探讨[J]. 华中科技大学学报(医学版) 2011(03)
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