论文摘要
第一章DTPA-甘露糖-葡聚糖体外靶向试验目的:通过一种钙离子依赖的受体结合反应,证实一种靶向分子载体N-双羟乙基氨基酸与二乙三胺五乙酸-甘露糖-葡聚糖（DTPA- Mannosyl-Dextran）的甘露糖受体靶向性能。我们的最终目标是开发一种能够携带靶向物质的大分子载体。方法:DTPA-Mannosyl- dextran （MW=35,800g/mol,每摩尔葡聚糖分子含56摩尔甘露糖分子）用异硫氰酸荧光黄染料（FITC）标记后用于实验。巨噬细胞株J-774按105个/孔种植于24孔板内的圆形盖玻片上培养,24小时后用3.0%多聚甲醛（paraformaldehyde,w/v用PBS缓冲液配制）固定。然后用蓝色DNA荧光染料（Hoechst）标记巨噬细胞核,在用PBS缓冲液清洗后在37oC与FITC-DTPA-Mannose-dextran分别在结合液（含钙离子）、非结合液（不含钙离子）中孵育20分钟。然后清洗、固定后用共聚焦显微镜观测。结果:空白对照组只见巨噬细胞核Hoechst发出蓝色荧光,未见细胞边缘（表面）发出任何FITC绿色标记荧光;结合液组可见细胞边缘FITC绿色荧光,与细胞核的蓝色荧光之间的黑色区域为细胞浆;非结合液组细胞边缘无或极淡绿色荧光。各试验组所测细胞边缘荧光强度值减去背景荧光强度值为实际值。1:2稀释、1:10稀释、1:50倍稀释
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