论文摘要
目的:观察3,3′-二吲哚基甲烷（3,3′-Diindolylmethane,DIM）与去甲氧柔红霉素（Idamycin,IDA）联合应用对小鼠前列腺癌的治疗作用,并初步探讨其作用机制。方法:①培养小鼠前列腺癌RM-1细胞,应用MTT法观察IDA和DIM对前列腺癌RM-1细胞增殖活力的影响;采用流式细胞术、吖啶橙染色法观察IDA和DIM对前列腺癌RM-1细胞凋亡的影响;利用RT-PCR检测二者对前列腺癌RM-1细胞凋亡基因Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的影响。②建立前列腺癌RM-1细胞的C57小鼠异体移植瘤模型:将40只接种RM-1细胞C57小鼠随机分成5组,每组8只。对照组:0.9%生理盐水0.2ml·d-1;IDA组:IDA 1mg·（kg·d）-1;DIM低剂量组:DIM 5mg·（kg·d）-1;DIM高剂量组:DIM 10mg·（kg·d）-1;IDA+DIM组:IDA 1mg·（kg·d）-1+DIM 5mg·（kg·d）-1,均于种瘤后第4d开始给药,采用腹腔注射,每只小鼠1次·3d-1。。且每5d测量一次各组小鼠肿瘤体积,于种瘤后第25d处死动物,剥离皮下肿瘤并称重,计算肿瘤抑制率;收集移植瘤标本,利用RT-PCR观察Bcl-2、Bax和Caspase-3基因的表达情况,采用免疫组织化学染色及western blot方法观察Caspase-3和Bcl-2蛋白的表达。结果:①细胞实验结果显示:与对照组比较,IDA和DIM均能明显降低前列腺癌RM-1细胞的增殖活力、诱导前列腺癌RM-1细胞凋亡,且联合用药组的疗效优于单独用药组;RT-PCR结果显示:IDA和DIM均可程度不同地下调Bcl-2和上调Bax、Caspase-3基因的表达,有统计学意义（P＜0.05）,同样联合用药组优于单独用药组。②动物实验结果显示:与对照组比较,IDA组、DIM低剂量组、DIM高剂量组、IDA+DIM组肿瘤的生长明显受到抑制（P＜0.05）,其抑瘤率分别为23.7%、34.2%、47.7%、66.9%;RT-PCR结果显示:各用药组均不同程度地下调Bcl-2,上调Bax和Caspase-3基因表达;免疫组织化学染色可见:各给药组前列腺癌组织中Caspase-3蛋白表达均明显增加;同时,Western blot结果显示:各用药组均不同程度地下调Bcl-2和上调Caspase-3蛋白的表达。且各项实验均表现出联合用药组效果更明显。结论:DIM和IDA可明显抑制前列腺癌RM-1细胞增殖、并诱导其凋亡。同时,DIM可抑制前列腺癌细胞在小鼠体内的生长,与IDA联用有协同作用,其作用机制可能与阻滞细胞周期,增加DNA裂解,抑制DNA合成,以及下调Bcl-2和上调Bax、Casoase-3的表达,抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡有关。
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