导读:本文包含了胃癌耐药细胞株论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:p27,克隆,真核表达,顺铂
胃癌耐药细胞株论文文献综述
张寅斌,陈琳,孙诗雨,陈银溪,闫婉君[1]（2019）在《真核表达p27构建胃癌顺铂耐药细胞模型的研究》一文中研究指出目的:构建p27真核表达载体并导入胃癌SGC-7901细胞获得稳定表达p27的稳定细胞株,以研究p27在胃癌SGC-7901细胞顺铂耐药中所发挥的功能。方法:以乳腺文库为模板,PCR扩增出p27编码区,并将其连接到p CDNA 3. 0-Flag载体上,转染293T细胞后分别用定量PCR和Western blot检测其表达情况,并通过Western blot检测SGC-7901细胞过表达Flag-p27稳定细胞株是否构建成功。通过CCK-8药物敏感性实验检测p27在胃癌细胞顺铂耐药中所发挥的功能。结果:双酶切和测序结果表明,pCDNA 3. 0-Flagp27构建成功,并在293T中成功表达,胃癌SGC-7901细胞过表达Flag-p27细胞株建立成功,通过耐药曲线表明过表达p27可以引起SGC-7901细胞顺铂耐药。结论:成功构建了带Flag标签的p27真核表达载体,为进一步研究p27在胃癌耐药中的功能奠定了基础。(本文来源于《现代肿瘤医学》期刊2019年21期）
刘家铭,张静雯,司望利[2]（2019）在《下调PHLDB3对胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR药物敏感性的影响》一文中研究指出目的:探讨下调PHLDB3对胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR药物敏感性的影响。方法:采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹技术(Western blot)的方法检测胃癌及癌旁正常组织中PHLDB3的表达(分别是20对和10对);qRT-PCR和Western blot检测PHLDB3在胃癌细胞系SGC7901以及胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR和SGC7901/VCR中的表达;MTT法检测SGC7901、SGC7901/ADR及转染PHLDB3 siRNA后SGC7901/ADR的半数抑制浓度(IC_(50))值;流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:qRT-PCR和Western blot结果显示:PHLDB3在胃癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织(P<0.000 1);PHLDB3在耐药细胞系SGC7901/ADR和SGC7901/VCR中的表达明显高于其亲本细胞系SGC7901(P<0.000 1和P<0.05)。Western blot结果显示:相对于转染PHLDB3 negative control(NC)组,转染PHLDB3 siRNA组的SGC7901/ADR细胞中PHLDB3的表达降低(P<0.005)。MTT结果显示:SGC7901与SGC7901/ADR的IC_(50)值分别为(1.5±0.1)μg/ml与(5.5±0.2)μg/ml(P<0.000 1);SGC7901/ADR转染PHLDB3 siRNA后对顺铂的IC_(50)值明显下降(P<0.05)。流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测凋亡,结果显示:下调PHLDB3的表达后,SGC7901/ADR细胞的凋亡率明显增加(P<0.05)。结论:PHLDB3能够促进胃癌细胞系SGC7901/ADR产生多药耐药。(本文来源于《现代肿瘤医学》期刊2019年17期）
徐丽娜,金莉娜[3]（2019）在《下调MiR-221对胃癌顺铂耐药细胞增殖及顺铂敏感性的影响及其相关机制》一文中研究指出背景晚期胃癌(gastric cancer, GC)患者通常接受化疗作为主要治疗方法.然而,化疗的有效性受到GC细胞耐药性的限制.本研究旨在探讨microRNA-221(miR-221)在顺铂(cisplatin, DDP)耐药GC细胞中的生物学作用和潜在机制,以期为临床治疗提供参考.目的研究下调Mi R-221对GC DDP耐药细胞增殖及DDP敏感性的影响及相关机制.方法采用AGS和MGC-803细胞构建出DDP耐药AGS/DDP和MGC-803/DDP细胞. RT-qPCR检测GC及癌旁组织、DDP化疗敏感组织、DDP化疗耐药组织、GC细胞和GC DDP耐药细胞的miR-221表达水平;用LVmiR-221-shRNA慢病毒转染AGS/DDP和MGC-803/DDP细胞后,MTT检测细胞增殖以及对DDP的化学敏感性; Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡;进行生物信息学分析以寻找miR-221的潜在靶基因,应用RT-qPCR和Western blotting检测细胞中CCND1的m RNA和蛋白表达.结果在GC组织和GC细胞细中miR-221明显上调,且DDP耐药组织和DDP耐药细胞中miR-221表达更高.下调miR-221抑制了AGS/DDP和MGC-803/DDP细胞增殖,促进了细胞凋亡和细胞对DDP的化学敏感性;CCND1是miR-221的直接靶基因,转染LV-miR-221-sh RNA抑制CCND1 mRNA和蛋白表达水平.结论下调miR-221可以抑制GC DDP耐药细胞增殖,促进其对DDP的化学敏感性,这一作用可能通过抑制靶基因CCND1表达来实现的.(本文来源于《世界华人消化杂志》期刊2019年14期）
万洪涛[4]（2019）在《沉默ARK5基因逆转胃癌多药耐药细胞SGC7901/DDP耐药性的研究》一文中研究指出目的:在细胞水平研究ARK5与胃癌多药耐药的关系,明确沉默ARK5基因能否有效逆转胃癌多药耐药细胞SGC7901/DDP的耐药性。方法:1.设计针对ARK5基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)序列及阴性对照(negative control,NC)序列,并已完成对LV-ARK5-RNAi重组慢病毒载体和阴性重组慢病毒载体的构建;2.用带荧光(GFP)的阴性重组慢病毒载体感染SGC7901/DDP细胞,通过在荧光倒置显微镜下观察来挑选出最优的感染条件;3.采用Western Blot技术测定ARK5在SGC7901细胞和顺铂(DDP)诱导的SGC7901/DDP细胞中的蛋白表达量,并验证构建的慢病毒对ARK5靶点的干扰效率;4.用顺铂(DDP)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)、多西他赛(DR)、阿霉素(ADR)四种结构和机制各异的抗肿瘤药物分别处理SGC7901、SGC7901/DDP、ARK5慢病毒感染组细胞SGC7901/DDP-shARK5、阴性病毒感染组SGC7901/DDPNC,经CCK8、克隆形成实验、流式细胞仪的检测其变化,观察沉默ARK5基因对SGC7901/DDP细胞药物抗性的影响。5.利用流式细胞仪分别测算SGC7901细胞、SGC7901/DDP细胞、SGC7901/DDP-shARK5细胞和SGC7901/DDP-NC细胞对阿霉素的蓄积与滁留,来观察沉默ARK5靶点对SGC7901/DDP细胞的药物主动泵出能力的影响。结果:1.病毒感染的预实验结果:LV-ARK5-RNAi重组慢病毒转染的最优条件为,复感染指数MOI为20,感染体系为含有10%FBS的1640低糖培养基+HiTransG A,感染时间为72 h;2.Western Blot结果显示:胃癌SGC7901/DDP细胞内ARK5蛋白的水平远高于亲本细胞SGC7901;LV-ARK5-RNAi重组慢病毒载体能有效降低SGC7901/DDP细胞内ARK5蛋白的表达量;而予以阴性重组慢病毒转染SGC7901/DDP细胞,其ARK5蛋白的表达水平无明显改变。3.经DDP、5-Fu、ADR和DR四种抗肿瘤药物处理后,在细胞的存活率、对抗肿瘤药物IC50的浓度、细胞克隆形成数目及细胞凋亡指数的方面,ARK5高表达的SGC7901/DDP细胞均远远高于ARK5低表达的SGC7901细胞;沉默ARK5基因后,ARK5慢病毒感染组细胞SGC7901/DDP-shARK5与胃癌多药耐药细胞SGC7901/DDP相比,其细胞存活率显着下降、对化疗药物IC50的浓度显着降低、细胞克隆形成数目显着减少及细胞凋亡率明显升高,差异具有统计学意(p<0.01)。4.ARK5高表达的SGC7901/DDP细胞对阿霉素的药物泵出率远远高于SGC7901细胞;沉默ARK5基因后,ARK5慢病毒感染组细胞SGC7901/DDPshARK5与胃癌多药耐药细胞SGC7901/DDP相比,其对阿霉素的药物泵出率明显降低。结论ARK5基因沉默后,胃癌多药耐药细胞SGC7901/DDP对抗肿瘤药物的抗性显着下降,提示ARK5在胃癌MDR的产生过程中发挥着关键作用;沉默ARK5的基因表达能有效逆转胃癌多药耐药细胞SGC7901/DDP的药物抗性,其作用机制可能与干扰ARK5蛋白的表达能促进胃癌多药耐药细胞的凋亡和抑制其对抗肿瘤药物的主动外排能力有关。(本文来源于《南昌大学》期刊2019-06-01）
杨义,陈洋,柏金,邓明明,于若曦[5]（2019）在《β-榄香烯对胃癌耐药细胞裸鼠移植瘤生长的影响》一文中研究指出目的观察中药β-榄香烯对胃癌耐药细胞株SGC-7901/Adr裸鼠成瘤能力的影响,探讨β-榄香烯对胃癌耐药细胞的作用及机制。方法利用MTT实验验证SGC7901/Adr细胞的耐药性及β-榄香烯的毒性作用,利用裸鼠移植瘤模型分析β-榄香烯对胃癌耐药细胞裸鼠移植瘤生长的影响,利用免疫组织化学方法检测各组移植瘤组织中Caspase-3蛋白的表达水平。结果相对于SGC7901细胞,SGC7901/Adr细胞对ADR具有耐药性;β-榄香烯对SGC7901/Adr细胞具有增殖抑制作用,且具有浓度依赖性。β-榄香烯能够较好地抑制胃癌耐药细胞裸鼠移植瘤的生长,能够明显缩小肿瘤体积。β-榄香烯处理后,移植瘤组织中Caspase-3蛋白表达有上升趋势。结论β-榄香烯促进肿瘤细胞凋亡、抑制胃癌耐药细胞裸鼠移植瘤的生长与上调Caspase-3蛋白表达水平相关。(本文来源于《解剖科学进展》期刊2019年03期）
孙梦瑶,王丹丹,吴秋雪,蔡思,倪振华[6]（2019）在《左金丸对胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP增殖和糖酵解的抑制作用》一文中研究指出目的:研究左金丸对胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP增殖和糖酵解的影响。方法:取人胃癌细胞株SGC-7901,体外诱导顺铂(DDP)耐药细胞株SGC-7901/DDP。将耐药细胞分为空白对照组和左金丸低、中、高浓度(25、50、100μg/ml)组,各组予以相应干预。药物干预12 h、24 h、48 h后,CCK-8分别检测各组细胞存活率;药物干预24 h后,试剂盒检测各组细胞葡萄糖摄取率及细胞上清中乳酸含量,同时应用Western blot检测各组细胞中糖酵解途径关键分子C-myc、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、葡萄糖转运蛋白1 (GLUT1)、乳酸脱氢酶A(LDHA)、己糖激酶Ⅱ(HKⅡ)的蛋白表达。结果:(1)与对照组比较,左金丸各浓度组在各检测时间点的细胞存活率均显着降低(P<0.01),且呈时间、浓度依赖性,提示左金丸可显着抑制SGC-7901/DDP细胞增殖。(2)药物干预24 h后,与对照组比较,左金丸各浓度组细胞的葡萄糖摄取率及乳酸含量显着降低(P<0.01),且呈浓度依赖性,提示左金丸可显着抑制SGC-7901/DDP糖酵解。(3)不同浓度左金丸干预24 h后,SGC-7901/DDP细胞中C-myc、HIF-1α、GLUT1、LDHA、HKⅡ的蛋白表达显着下调(P<0.01),且呈浓度依赖性。结论:左金丸可显着抑制胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP的增殖,且这一过程可能与抑制糖酵解相关。(本文来源于《上海中医药大学学报》期刊2019年01期）
张明,张哲,蔺强,邓新娜,王娟[7]（2018）在《GKLF基因在胃癌组织和细胞株中的表达及与胃癌耐药的关系》一文中研究指出目的:观察GKLF基因在胃癌组织和细胞株中的表达情况及与耐药基因P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP-1)表达的相关性。方法:采用免疫组织化学SP法、Real time-PCR和Western-blot检测胃癌组织和细胞株中GKLF、Pgp、MRP-1表达情况,分析GKLF蛋白表达与临床病理特征及P-gp、MRP-1蛋白表达的相关性。分别将携带GKLF基因的重组慢病毒颗粒或靶向GKLF基因的特异性siRNA转染耐药人胃癌细胞SGC7901/VCR。Real time-PCR和Western-blot检测过表达或敲低GKLF后P-gp变化。结果:胃癌组织GKLF蛋白阳性表达率及mRNA表达水平显着低于癌旁组织,P-gp、MRP-1蛋白阳性表达率及mRNA表达水平显着高于癌旁组织(P <0. 05);且GKLF蛋白表达与TNM临床分期、淋巴结是否转移密切相关,并与P-gp、MRP-1蛋白表达具有负相关性(P <0. 05)。在多种胃癌细胞中均存在GKLF基因表达显着下调和P-gp、MRP-1基因表达上调,尤其在胃癌耐药SGC7901/VCR细胞表达变化更为显着(P <0. 05)。过表达GKLF后SGC7901/VCR细胞Pgp、MRP-1 mRNA和蛋白表达、存活率、穿膜数显着下调,而沉默GKLF后SGC7901/VCR细胞P-gp、MRP-1 mRNA和蛋白表达、存活率、穿膜数显着上调(P <0. 05)。结论:GKLF基因在胃癌组织和细胞系中表达下调,且与耐药相关基因P-gp、MRP-1表达具有负相关性。上调GKLF表达可能通过调控P-gp、MRP-1表达逆转胃癌对化疗药物的耐药性。(本文来源于《中国药师》期刊2018年12期）
余南荣,曾祥,徐厚巍,蓝俊松[8]（2018）在《ANXA2-siRNA转染对胃癌耐药细胞药物敏感性的影响及机制》一文中研究指出目的研究ANXA2-siRNA转染对胃癌耐药细胞药物敏感性及信号通路激活的影响。方法采用ANXA2-siRNA转染SGC-7901/DDP胃癌耐药细胞,通过RT-PCR和Western blot检测胃癌耐药细胞中耐药相关基因GST以及Bax的表达变化,应用MTT药敏实验检测胃癌耐药细胞对化疗药物敏感性的变化。采用Western blot检测ANXA2-siRNA转染SGC-7901/DDP胃癌耐药细胞后,MAPK及PI3K/Akt信号通路激活中P38、P38磷酸化水平、AKT以及AKT磷酸化水平的变化情况。结果 ANXA2-siRNA转染SGC7901/DDP细胞后,无论在RNA水平还是蛋白水平上,耐药相关基因GST的表达水平显着降低,而Bax的表达水平明显上调。与空白对照组和空白-siRNA组细胞相比,ANXA2-siRNA转染SGC7901/DDP细胞对化疗药物DDP和5-FU的IC50值显着降低,差异有统计学意义(P <0. 05)。与空白对照组和空白-siRNA组细胞相比,ANXA2-siRNA转染SGC7901/DDP细胞后,MAPK信号通路中,P38表达无明显变化,但P38磷酸化水平下降明显。在PI3K/Akt信号通路中,AKT表达无明显变化,但AKT磷酸化水平下降明显。结论 ANXA2-siRNA转染胃癌耐药细胞能够下调耐药相关基因的表达,降低胃癌细胞的耐药性,可能是通过影响MAPK及PI3K/Akt信号通路中P38和AKT磷酸化过程实现的。(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2018年11期）
张旭[9]（2018）在《粉防己碱对胃癌耐药细胞ZNF139、MDR1及GST-π mRNA的影响》一文中研究指出目的:探讨粉防己碱(TET)对胃癌耐药细胞锌指蛋白139(ZNF139)、多耐药基因1(MDR1)及谷胱甘肽S转移酶-π(GST-π)mRNA的影响。方法:选取胃癌细胞SGC7901以及胃癌耐阿霉素细胞SGC7901/ADR,采用逆转录-聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测两种细胞ZNF139、MDR1、GST-πmRNA及蛋白表达,同时检测2.0!g·ml-1TET处理前后SGC7901/ADR细胞ZNF139、MDR1、GST-πmRNA及蛋白表达。结果:SGC7901/ADR细胞ZNF139、MDR1、GST-πmRNA相对表达量明显高于SGC7901细胞(P<0.05);SGC7901/ADR细胞ZNF139、MDR1、GST-π蛋白相对表达量明显高于SGC7901细胞(P<0.05);TET处理后SGC7901/ADR细胞ZNF139、MDR1、GST-πmRNA及蛋白相对表达量均较处理前明显降低(P<0.05)。结论:TET能下调胃癌耐药细胞ZNF139、MDR1、GST-πmRNA和蛋白表达水平,从而在逆转胃癌多药耐药特性方面有重要作用。(本文来源于《东南大学学报(医学版)》期刊2018年03期）
宋慧聪,邓光,张晔,邓明明,胡雪君[10]（2018）在《胃癌耐药细胞EXOs的提取鉴定及可能存在的耐药信息传递作用的初步探讨》一文中研究指出目的:探讨胃癌耐药细胞(SGC7901/Adr)分泌的外泌体(exosomes,EXOs)在细胞间可能存在的耐药信息传递作用。方法:选用胃癌亲本细胞SGC7901及其阿霉素耐药细胞SGC7901/Adr为模型,用PEG方法提取EXOs;透射电子显微镜观察鉴定细胞EXOs形态;Western Blot检测CD9、CD63、TSG101、Calreticulin以及P-糖蛋白(P-gp)的表达;运用激光共聚焦显微镜观察胃癌SGC7901和SGC7901/Adr细胞及加入阿霉素耐药细胞SGC7901/Adr外泌体处理后的敏感细胞内阿霉素药物浓度变化。结果:透射电子显微镜下观察到,胃癌SGC7901和SGC7901/Adr细胞来源的EXOs为直径在30～100 nm之间的囊性小泡,呈圆形或椭圆形,大小均匀一致。Western Blot检测胃癌SGC7901和SGC7901/Adr细胞来源的EXOs,携带有外泌体生物标记分子CD9(四次跨膜分子)、CD63(四次跨膜分子)以及TSG101表达,Calreticulin为阴性表达。进一步检测发现在SGC7901/Adr细胞来源的EXOs中存在P-gp蛋白表达。经过阿霉素耐药细胞SGC7901/Adr外泌体处理后的敏感细胞,胞内可见阿霉素聚集减少,核区分布减少,荧光强度减弱。结论:胃癌耐药细胞分泌的EXOs可能通过传递P-gp蛋白的形式,具有传递耐药信息的作用。(本文来源于《现代肿瘤医学》期刊2018年13期）
胃癌耐药细胞株论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探讨下调PHLDB3对胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR药物敏感性的影响。方法:采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹技术(Western blot)的方法检测胃癌及癌旁正常组织中PHLDB3的表达(分别是20对和10对);qRT-PCR和Western blot检测PHLDB3在胃癌细胞系SGC7901以及胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR和SGC7901/VCR中的表达;MTT法检测SGC7901、SGC7901/ADR及转染PHLDB3 siRNA后SGC7901/ADR的半数抑制浓度(IC_(50))值;流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:qRT-PCR和Western blot结果显示:PHLDB3在胃癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织(P<0.000 1);PHLDB3在耐药细胞系SGC7901/ADR和SGC7901/VCR中的表达明显高于其亲本细胞系SGC7901(P<0.000 1和P<0.05)。Western blot结果显示:相对于转染PHLDB3 negative control(NC)组,转染PHLDB3 siRNA组的SGC7901/ADR细胞中PHLDB3的表达降低(P<0.005)。MTT结果显示:SGC7901与SGC7901/ADR的IC_(50)值分别为(1.5±0.1)μg/ml与(5.5±0.2)μg/ml(P<0.000 1);SGC7901/ADR转染PHLDB3 siRNA后对顺铂的IC_(50)值明显下降(P<0.05)。流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测凋亡,结果显示:下调PHLDB3的表达后,SGC7901/ADR细胞的凋亡率明显增加(P<0.05)。结论:PHLDB3能够促进胃癌细胞系SGC7901/ADR产生多药耐药。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
胃癌耐药细胞株论文参考文献
[1].张寅斌,陈琳,孙诗雨,陈银溪,闫婉君.真核表达p27构建胃癌顺铂耐药细胞模型的研究[J].现代肿瘤医学.2019
[2].刘家铭,张静雯,司望利.下调PHLDB3对胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR药物敏感性的影响[J].现代肿瘤医学.2019
[3].徐丽娜,金莉娜.下调MiR-221对胃癌顺铂耐药细胞增殖及顺铂敏感性的影响及其相关机制[J].世界华人消化杂志.2019
[4].万洪涛.沉默ARK5基因逆转胃癌多药耐药细胞SGC7901/DDP耐药性的研究[D].南昌大学.2019
[5].杨义,陈洋,柏金,邓明明,于若曦.β-榄香烯对胃癌耐药细胞裸鼠移植瘤生长的影响[J].解剖科学进展.2019
[6].孙梦瑶,王丹丹,吴秋雪,蔡思,倪振华.左金丸对胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP增殖和糖酵解的抑制作用[J].上海中医药大学学报.2019
[7].张明,张哲,蔺强,邓新娜,王娟.GKLF基因在胃癌组织和细胞株中的表达及与胃癌耐药的关系[J].中国药师.2018
[8].余南荣,曾祥,徐厚巍,蓝俊松.ANXA2-siRNA转染对胃癌耐药细胞药物敏感性的影响及机制[J].安徽医科大学学报.2018
[9].张旭.粉防己碱对胃癌耐药细胞ZNF139、MDR1及GST-πmRNA的影响[J].东南大学学报(医学版).2018
[10].宋慧聪,邓光,张晔,邓明明,胡雪君.胃癌耐药细胞EXOs的提取鉴定及可能存在的耐药信息传递作用的初步探讨[J].现代肿瘤医学.2018