苦参碱对慢性心力衰竭大鼠心室重构的干预作用及其分子机制研究

论文摘要

目的研究苦参碱对异丙肾上腺素（isoproterenol,ISO）致慢性心力衰竭模型大鼠心室重构及心功能衰竭的干预作用。方法Sprague-Dawley大鼠皮下注射异丙肾上腺素（ISO,5mg/kg/d,连续7天）建立大鼠慢性心衰模型,同时观察苦参碱（25、50和100mg/kg,每天1次,连续7天）给药对模型大鼠体重、心肌肥厚指数、心肌损伤标志酶、心肌组织形态学结构、心率、血压、左心室收缩压（LVSP）、左心室终末舒张压（LVEDP）、左心室内压最大上升速率(LV dP/dtmax)以及左心室内压最大下降速率(LV dP/dtmin)的影响。结果大鼠体重在各实验组之间无显著性变化（all P>0.05）。与正常对照组相比,模型组大鼠心肌肥厚指数和血清心肌损伤标志酶显著性增加,提示模型组大鼠具有显著性心肌肥厚并伴随心肌细胞坏死或凋亡;组织病理学显示模型组大鼠心肌细胞直径（CD）和横截面积（CSA）以及间质胶原纤维含量显著增加,表明大鼠心肌细胞和心肌成纤维细胞显著性肥大或增殖,心室发生重构。另外可见模型组大鼠可见心功能显著低下,表现为LVSP和LV dP/dtmax显著降低和LVEDP和LV dP/dtmin显著升高（P<0.01）,表明模型组大鼠发生心力衰竭;同时收缩压和心率显著降低（P<0.05）,但是舒张压组间无差别。苦参碱（25、50和100mg/kg/d,7天）给药后显著降低了心肌肥厚指数（全心湿质量/体质量比、左心室湿质量/体质量比）和血清心肌损伤标志酶:乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）的含量和心肌肌钙蛋白（cTn-I）的含量;组织病理学结果显示,苦参碱可显著减轻大鼠肥厚性心肌组织病理结构的异常改变即抑制心肌细胞肥大和间质心肌纤维化;另外同时显著改善了大鼠左心室收缩功能(升高LVSP和LVdP/dtmax)、舒张功能(降低LVEDP和LV dP/dtmin)以及收缩压和心率。结论苦参碱对ISO致大鼠心力衰竭模型心室重构及心功能衰竭具有保护作用。目的研究ISO致SD大鼠慢性心力衰竭模型心室重构组织中PI3Kγ/Akt/GSK-3β信号转导通路、PRMT1/ADMA/DDAH2系统、ODC/SSAT系统的蛋白表达,以期在众多信号通路中为苦参碱抗大鼠心室重构筛选出其可能作用的药物靶点。方法分别用ELISA方法和生物化学法检测血清ADMA和NO的含量,并用Western blot方法测定大鼠心室PI3Kγ、Akt、p-Akt（Ser473）、p-Akt（Thr308）、GSK-3β、p-GSK-3β（Ser9）、iNOS、eNOS、p-eNOS（Ser1177）、PRMT1、DDAH2、ODC、SSAT等蛋白的表达。结果与正常对照组相比,ISO组大鼠血清NO水平显著性降低,而ADMA血清水平显著性升高;心肌组织内PI3Kγ、Akt、p-Akt（Ser473）、p-Akt（Thr308）、p-GSK-3β（Ser9）、iNOS、PRMT1、ODC、SSAT蛋白含量显著性提高,而GSK-3β、eNOS、p-eNOS（Ser1177）、DDAH2含量显著性降低。苦参碱（25、50和100mg/kg）给药后可下调模型大鼠心肌组织PI3Kγ、Akt、p-Akt（Ser473）、p-Akt（Thr308）、p-GSK-3β（Ser9）、iNOS、ODC蛋白的表达,同时可上调GSK-3β、eNOS、p-eNOS（Ser1177）、DDAH2蛋白表达;但对PRMT1和SSAT含量显著性升高无影响。结论苦参碱抗心室重构作用可通过调控PI3Kγ/Akt/GSK-3β信号转导通路以及提高心肌组织中DDAH2和eNOS蛋白表达,促进eNOS的竞争性抑制剂ADMA的分解代谢,进而恢复一氧化氮的水平而发挥作用;另外,其作用也与下调心肌组织中ODC蛋白表达,降低心肌组织内多胺的生成相关。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一部分 苦参碱对大鼠心室重构和心功能衰竭的干预作用
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 第二部分 苦参碱关于预防慢性心衰大鼠心室重构的分子机制研究
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢
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