论文摘要
背景与目的食管癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，死亡率在我国恶性肿瘤中位居第四，其中在河南的发病率和死亡率最高，严重危害了我国人民的身体健康，因此探讨食管癌的发生发展机制已成为研究的热点之一。1979年，Senger首先报道了恶性转化的上皮细胞可分泌一种磷酸蛋白，即骨桥蛋白（osteopontin，OPN）。OPN是富含天冬氨酸和唾液酸残基的可分泌糖蛋白，包含有多种功能域，其中含有特异的Arg-Gly-Asp序列（RGD），通过这个序列与其生长所需的微环境——细胞外基质（extracellular matrix，ECM）相结合。通过与整合素和CD44受体的结合，OPN可介导细胞与基质的相互作用及细胞内的信号转导，从而在肿瘤的进展中发挥重要的作用。近年来，越来越多的证据显示，OPN在许多肿瘤细胞中表达上调，与肿瘤血管生成、侵袭转移、抑制凋亡等方面关系密切。随着表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）的发现（1962年），人表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）完整cDNA的获得（1984年），以及对细胞信号传导网络深入的研究（90年代），人们已认识到作为受体酪氨酸激酶超家族成员之一的EGFR及其家族成员，在EGF等相应配体的刺激下，通过受体自身磷酸化参与细胞生长信号传递，对上皮源性细胞的增殖、存活和分化起着重要的调节作用。近年来EGFR与癌基因相关性研究显示，细胞Src（c-Src）癌基因和EGFR不仅具有高度的同源性，并在许多人类肿瘤均过度表达，表明EGFR及其家族成员具有癌基因潜能，与细胞的转化有密切关系。肿瘤细胞主要通过自分泌和旁分泌TGF-α、EGF；它们作用于EGFR，使其获得生长优势，提示该信号系统在肿瘤的发生、发展中占有重要地位。OPN和EGFR在食管鳞癌的发生发展的关系及其相互作用的研究，目前国内外报道鲜见。本研究用免疫组化的方法检测OPN及EGFR在食管鳞状细胞癌中的表达情况，探讨其临床意义，并分析二者在食管鳞癌发生发展中的相互作用。材料与方法1．选取焦作市第二医院外科1992年1月至2000年8月60例手术切除食管癌标本（同一病例包括癌组织、5cm以外的癌旁正常组织），HE切片病理证实为鳞癌。全部病例术后未行放疗或化疗，并进行6-18个月的随访。2．应用免疫组织化学S-P方法检测60例食管鳞状细胞癌组织及其相应的癌旁正常组织中OPN及EGFR蛋白的表达情况。3．统计工具用SPSS10.0及SAS统计软件包，统计方法采用x2检验、Spearman相关分析、Kaplan-Meier及Log-rank test时序检验法，检验水准为α=0.05。结果1．60例食管鳞癌标本中，48例OPN染色阳性80.0％（48/60）；在60例癌旁正常组织标本中未见OPN表达；结果显示，OPN的阳性表达率在食管鳞癌及癌旁正常组织间的差异具统计学意义（P＜0.01）。在食管鳞癌组织中，OPN主要存在于肿瘤细胞的细胞浆中。OPN多弥散表达于癌巢中，在癌巢边缘分布较少。2．60例食管鳞癌标本中，43例EGFR染色阳性71.7％（43/60）；60例癌旁组织中11例EGFR染色阳性18.3％（11/60）；结果显示，EGFR的阳性表达率在食管鳞癌及癌旁正常组织间的差异具统计学意义（P＜0.01）；在食管鳞癌组织中，EGFR的阳性颗粒主要位于肿瘤细胞的胞浆及部分细胞核内，周围基质中未见阳性染色。3．60例食管鳞癌标本中，在高分化组OPN的阳性表达率为65.5％（19/29），低于中低分化组93.5％（29/31），二者之间差异有统计学意义（P＜0.01）；有淋巴转移组的OPN的阳性表达率为97.1％（34/35），高于无淋巴转移组56.0％（14/25），二者之间差异有统计学意义（P＜0.01）；在TNM分期中Ⅰ、Ⅱ期组OPN的阳性表达率为67.7％（22/31），低于Ⅲ、Ⅳ期组93.1％（26/29），二者之间差异有统计学意义（P＜0.05）；浸润深度T1+T2组OPN的阳性表达率为73.5％（25/34），低于T3+T4组88.5％（23/26），二者之间差异无统计学意义（P＞0.05）。4．60例食管鳞癌标本中，在高分化组EGFR的阳性表达率为57.7％（15/26），低于中低分化组82.4％（28/34），二者之间差异有统计学意义（P＜0.05）；有淋巴转移组的EGFR的阳性表达率为83.9％（26/31），高于无淋巴转移组58.6％（17/29），二者之间差异有统计学意义（P＜0.05）；在TNM分期中Ⅰ、Ⅱ期组EGFR的阳性表达率为51.7％（15/29），低于Ⅲ、Ⅳ期组90.3％（28/31），二者之间差异有统计学意义（P＜0.01）；浸润深度T1+T2组EGFR的阳性表达率为48.0％（12/25），低于T3+T4组77.1％（27/35），二者之间差异有统计学意义（P＜0.05）。5．对60例食管鳞癌患者进行6-18月的随访，删除失去联系3例，OPN蛋白表达阳性的生存率为39.1％（18/46），低于OPN蛋白表达阴性者72.7％（8/11），并应用Kaplan-Meier，Log-rank test时序检验法进行生存率的比较；结果显示，差异有显著性（P＜0.05）。6．对60例食管鳞癌患者进行6-18月的随访，删除失去联系3例，EGFR蛋白表达阳性的生存率为38.1％（16/42），低于EGFR蛋白表达阴性者66.7％（10/15），并应用Kaplan-Meier、Log-rank test时序检验法进行生存率的比较，结果显示，差异有显著性（P＜0.05）。7．对60例食管鳞癌标本的OPN和EGFR表达的情况进行相关分析，共表达阳性组为38例，共表达阴性组为7例，OPN+、EGFR-表达组为10例，OPN-、EGFR+表达组为5例，二者呈正相关，Spearman相关系数rs=0.333（P＜0.05）。结论1．食管鳞癌组织中OPN呈现高表达，且其高表达与其分化程度及临床分期、淋巴结转移、预后密切相关，提示OPN可能与肿瘤的发生及进展过程有关。2．食管鳞癌组织中EGFR过表达，且其过表达与其分化程度以及临床分期、淋巴结转移，浸润程度、预后密切相关，提示EGFR的过表达参与了肿瘤的发生及浸润、转移过程。3．OPN及EGFR蛋白在食管鳞癌中的表达相关性经统计学分析具有相关性，表明二者可能在食管鳞癌的发生、发展过程中起协同作用。