β2-肾上腺素受体色谱筛选麻杏石甘汤的活性成分

论文摘要

易发性重大疾病是当今社会危害人们健康,影响生活质量的主要因素。作为防治疾病的主要有效手段,高效创新药物的研发是化学、生物学和医药领域研究的永恒热点问题。尽管计算机辅助药物设计技术、基于分子碎片的药物分子发现技术及高通量药物筛选方法被成功应用于药物研发过程,但近年来国际市场上市的新药数量却不断减少。其本质原因在于上述方法并未从根本上解决药物活性成分筛选成功率低和周期长的技术难题。因此,高效筛选药物中活性成分方法的构建依然是医药领域亟待解决的关键科学问题之一。本论文以中药复方麻杏石甘汤为对象,围绕其活性成分的高效筛选展开系统研究,旨在为中药复方活性成分的受体色谱筛选提供思路。本论文共分4章,作者的主要贡献如下：1.建立了麻杏石甘汤中麻黄碱的高效液相色谱-电喷雾-飞行时间串联四极杆质谱检测方法；通过正交设计,对麻黄药材中麻黄碱的提取工艺进行了优化。结果表明：麻黄碱的线性范围为0.005-1.0mg/mL,方法精密度测定相对标准偏差为0.28%,重复性测定相对标准偏差为0.51%,平均回收率为95.4%,证明该方法可用于麻黄药材及其复方制剂中麻黄碱的测定；麻黄碱的最佳提取工艺为30倍量水80℃加热提取40min,一共提取4次,为采用β2-肾上腺素受体（β2-adrenoceptor,β2-AR）色谱法筛选麻黄的活性成分提供了稳定可靠的样品制备及质量控制方法。2.采用β2-肾上腺素受体色谱法筛选了麻杏石甘汤的活性成分,并采用竞争置换分析法对受体与活性成分的相互作用进行了研究。结果发现,麻杏石甘汤中与β2-AR有特异性作用的活性成分为麻黄碱,其与受体相互作用的结合常数为5.85×103/M,结合位点数为1.72×10-7M,证明受体色谱法可用于中药复方中特定活性成分的快速筛选及其与受体相互作用机制研究。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 中英文对照表
• 第一章 绪论
• 1.引言
• 2.中药的发展历程
• 2.1 麻杏石甘汤组方简介
• 2.2 麻杏石甘汤简介
• 3.国内外药物筛选技术研究现状
• 3.1 亲和色谱技术（Affinity Chromatography,AC）
• 3.2 亲和毛细管电泳技术（Affinity Capillary Electrophoresis,ACE）
• 3.3 高内涵筛选技术（High Content Screening,HCS）
• 3.4 其他筛选技术
• 4.小结
• 第二章 麻黄药材提取工艺的研究
• 1.仪器与材料
• 1.1 仪器
• 1.2 材料
• 2.麻黄、苦杏仁和甘草药材提取液的检测方法的研究
• 2.1 麻黄、苦杏仁和甘草药材提取液高效液相色谱检测方法的研究
• 2.2 麻黄和甘草药材HPLC-ESI-TOF-MS检测方法的研究
• 3.麻黄提取工艺的优化及Design Expert软件数据分析
• 3.1 浸渍法
• 3.2 破碎提取法
• 3.3 超声提取法
• 4.结论
• 第三章 受体色谱对麻杏石甘汤中活性成分筛选的研究
• 1.仪器及材料
• 2-AR生物色谱模型的建立'>2.β₂-AR生物色谱模型的建立
• 2-AR的提取'>2.1 β₂-AR的提取
• 2-AR生物色谱柱的制备'>2.2 β₂-AR生物色谱柱的制备
• 2-AR生物色谱柱的表征'>2.3 β₂-AR生物色谱柱的表征
• 3.受体色谱对麻杏石甘汤中活性成分的筛选
• 2-AR生物色谱研究'>3.1 麻杏石甘汤β₂-AR生物色谱研究
• 2-AR生物色谱研究'>3.2 麻黄药材β₂-AR生物色谱研究
• 2-AR生物色谱研究'>3.3 苦杏仁药材β₂-AR生物色谱研究
• 2-AR生物色谱研究'>3.4 甘草药材β₂-AR生物色谱研究
• 2-AR亲和作用的研究'>4.麻杏石甘汤中活性成分与β₂-AR亲和作用的研究
• 4.1 理论
• 2-AR的相互作用'>4.2 自身竞争法研究麻黄碱与β₂-AR的相互作用
• 5.结论
• 第四章 结论与展望
• 1.结论
• 2.展望
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间取得的研究成果
• 致谢