论文摘要
急性肺损伤(acute lung injury, ALI)是一种以肺血管内皮细胞及肺泡上皮细胞损伤为病理特征的临床上常见非特异性免疫反应疾病,即为全身炎症导致系统性功能障碍为综合征的肺部表现。ALI主要症状表现为局部募集反应、中性粒细胞聚集和促炎因子和介质的大量释放、肺内皮及上皮细胞受损引起的弥漫性肺间质及肺泡水肿、蛋白的大量渗出和髓过氧化物酶(MPO)活性的增强等。严重阶段即为急性呼吸窘迫综合征(ARDS), ALI/ARDS的病死率高达40%。柴胡和紫花地丁为我国常用中药,包括北柴胡(Bupleurum chinense DC)和小叶黑柴胡(Bupleurum smithii var. parvifolium),具有抗炎和免疫调节作用。我们的前期研究发现,离体实验中,柴胡根部提取出的柴胡多糖和紫花地丁的三个提取物PEVY, AEVY和BAVY离体实验证实均具有抑制补体激活的作用;在急性呼吸窘迫综合征大鼠模型中,小叶黑柴胡总多糖能显著缓解大鼠肺部病理损伤,并能抑制补体过度活化和减少肺部组织中补体活化产物的沉积。鉴于以上我们已有的药效学研究成果,在小鼠急性肺损伤模型上,我们分别观察柴胡总多糖和紫花地丁的三个提取物中PEVY的药效和作用机制。1柴胡总多糖对小鼠急性肺损伤(ALI)的治疗作用目的研究北柴胡总多糖和小叶黑柴胡总多糖对小鼠急性肺损伤的治疗作用及作用机制。方法昆明小鼠随机分为7组:正常对照组、ALI模型组、北柴胡总多糖组(80,40和20mg/kg)、小叶黑柴胡总多糖组(80mg/kg)和地塞米松阳性组(4mg/kg)。通过LPS气管滴注建立小鼠ALI模型。给予LPS2小时后,不同剂量柴胡总多糖给药组灌胃给药,阳性药物组尾静脉注射地塞米松。给LPS24h后,麻醉动物,摘眼球取血。观察柴胡总多糖对小鼠急性肺损伤的作用。检测指标包括:小鼠肺湿干重比,肺泡支气管灌洗液(BALF)中蛋白含量(考马斯亮蓝法)、单个核细胞数(计数板计数),髓过氧化物酶(MPO)含量(MPO试剂盒法)、肿瘤坏死因子(TNF-α)(ELISA法)水平和血清一氧化氮(NO)水平(Griss试剂法)。结果北柴胡总多糖三个剂量和小叶黑柴胡总多糖80mg/kg显著降低了ALI小鼠BALF中单个核细胞的增多(P<0.001),显著抑制小鼠肺湿重/干重比值的增高(P<0.05),缓解ALI小鼠BALF中总蛋白的渗出(P<0.01);北柴胡总多糖80mg/kg和小叶黑柴胡总多糖80mg/kg降低小鼠BALF中MPO的增高(P<0.01,P<0.05),20和40mg/kg北柴胡总多糖也有一定的药效,但没有显著性差异(P=0.07)。与模型组相比,北柴胡和小叶黑柴胡总多糖均显著降低ALI小鼠升高的TNF-a(灌洗液)和NO水平(血清)(P<0.001)结论北柴胡总多糖和小叶黑柴胡总多糖对ALI小鼠的损伤有治疗作用,可显著降低肺组织湿重/干重比值,显著改善急性肺损伤造成的肺灌洗液中的蛋白渗出、白细胞细胞聚集、MPO活性升高,TNF-a和血清NO水平升高,肺组织的病理损伤改善,组织的补体活化产物沉积减少。柴胡总多糖可能可以通过其抗炎和抑制补体活化机制,治疗多种刺激因素引发的急性肺损伤。2紫花地丁的三个提取物中PEVY对小鼠急性肺损伤的治疗作用目的研究PEVY对小鼠急性肺损伤的治疗作用及作用机制。方法BALB/c小鼠随机分为6组:正常对照组、ALI模型组、PEVY组(8,4和2mg/kg)、地塞米松阳性组(4mg/kg)。通过内毒素气管滴注建立小鼠ALI模型。给予LPS2小时后,不同剂量PEVY给药组灌胃给药,阳性药物组尾静脉注射地塞米松。给LPS24h后,麻醉动物,摘眼球取血。观察PEVY对小鼠急性肺损伤的作用。检测指标包括:小鼠肺湿干重比,肺泡支气管灌洗液(BALF)中蛋白含量(考马斯亮蓝法)、单个核细胞数(计数板计数),髓过氧化物酶含量(MPO试剂盒法)、炎性细胞因子水平(ELISA法)。结果PEVY各给药剂量均可显著抑制急性肺损伤小鼠肺湿重/干重比值的增高(P<0.01),显著降低肺泡支气管灌洗液中单个核细胞(P<0.001)和红细胞(P<0.01)的集聚,降低MPO (P<0.01)和肺总蛋白水平的升高(P<0.001)。与模型组相比,PEVY8mg/kg和4mg/kg急性肺损伤小鼠肺灌洗液中肿瘤坏死因子(TNF-a),白介素-1p(IL-1p)和白介素-6(IL-6)水平均显著降低(P<0.01)PEVY2mg/kg对IL-1β水平也有明显抑制作用(P<0.01)结论PEVY对急性肺损伤小鼠有治疗作用。PEVY可显著降低肺组织湿重/干重比值、明显抑制肺灌洗液中蛋白渗出、减少肺中性粒细胞和红细胞聚集数量、降低髓过氧化物酶(MPO)活性,抑制TNF-a, IL-1β和IL-6水平升高。PEVY改善肺组织的病理损伤,减少组织的补体活化产物沉积。PEVY可能通过其抗炎和抑制补体活化机制,降低肺毛细血管通透性、减轻肺水肿和渗出、抑制肺部局部炎症反应,减少多种刺激因素引发的急性肺损伤。
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