BCSG1在食管癌中的表达及其对细胞侵袭力影响的研究

论文摘要

目的:BCSG1 （breast cancer specific gene l）是1997由J i等用表达序列标签cDNA差异测序的方法分离克隆出的一组新的人类基因,属synuclein家族成员。研究证实其在正常乳腺和良性病变中几乎不表达,在浸润性乳腺癌或晚期乳腺癌中高表达,并且其高表达促进乳腺癌细胞的生长、浸润和转移,因此人们开始认为BCSG1是乳腺癌所特有的并称之为乳腺癌特异基因。国外文献报道该基因在包括肝脏、食管、结肠、胃、肺、前列腺、宫颈、乳腺在内的恶性肿瘤组织中均存在表达,在癌周正常组织表达少见,并且BCSG1蛋白表达与分期相关,Ⅰ期表达水平低,Ⅱ到Ⅳ期表达水平增高,是与肿瘤恶性进展有关的标记物。众所周知,食管癌是我省高发的消化道肿瘤,目前,BCSG1在食管癌发生发展中的作用机制尚未见报道。本研究采用免疫组织化学方法检测BCSG1在食管癌中的表达及其与临床病理学因素的关系,并进一步在BCSG1低表达的食管癌细胞株中导入外源性BCSG1,研究该基因表达上调对食管癌细胞侵袭力的影响,以揭示其在食管癌发生发展中的生物学功能和机制。方法1随机抽取河北医科大学第四医院2006年1月至12月期间收治的临床病例资料完整的食管癌石蜡标本30例,重新制备切片,行免疫组织化学染色检测BCSG1蛋白表达情况。其中男性22例,女性8例,年龄32岁- 70岁,中位年龄59岁。按肿瘤组织分化程度分类:低分化7例,中分化13例,高分化10例。全部病例均经病理学确诊,其中鳞癌23例,腺癌5例,小细胞未分化癌1例,其他类型1例。临床分期采用TNM分期,其中Ⅰ期5例,Ⅱ期4例,Ⅲ期12例,Ⅳ期9例。所有患者术前均未行化放疗。应用SPSS13.0统计软件进行分析,以P<0.05为检验标准。计数资料中的差异性分析使用卡方检验。2培养4株食管癌细胞Eca-109、TE1、TE10、KYSE450,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定4株食管癌细胞株中BCSG1mRNA表达水平,选取表达水平较低的细胞株做为研究对象。3对BCSG1mRNA低表达的细胞株,采用脂质体转染法瞬时转染包含BCSG1cDNA全长的重组质粒PCDNA3.0-BCSG1和空质粒PCDNA3.0,分别设为重组质粒转染组和空质粒转染组,同时以未转染细胞作为空白对照。转染48小时后,应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测三组细胞BCSG1mRNA的表达水平,流式细胞学技术（FCM）检测三组细胞BCSG1蛋白表达水平。利用Transwell体外侵袭实验检测细胞侵袭力的变化。结果1免疫组化显示30例食管癌组织中BCSG1阳性表达率为83.3%（25/30）,BCSG1表达与淋巴结转移、TNM分期呈正相关（P<0.05）,与组织分化程度无显著性差异（P=0.051）,但似乎存在随着组织分化程度降低,BCSG1表达增强的趋势。BCSG1表达与病理类型及患者性别、年龄无关（P>0.05）。2 BCSG1在4株食管癌细胞Eca-109、TE1、TE10、KYSE450中均有不同程度的表达,其中Eca-109细胞株BCSG1mRNA表达水平最低。3在BCSG1mRNA低表达细胞株Eca-109中瞬时转染含BCSG1cDNA全长的重组质粒,经检测转染后BCSG1 mRNA水平和蛋白水平均显著增高,与空质粒转染组和未转染Eca-109细胞相比有显著差异（P<0.05）,后两组细胞相比无明显差异（P>0.05）。Transwell体外侵袭实验示重组质粒转染组穿膜细胞数（167.3±2.51）较空载体转染组（65±2.65）和未转染组（70±2.52）明显增加（P<0.01）,而后两组无明显差异（P>0.05）。结论1 BCSG1在食管癌组织中存在高表达,且表达水平与淋巴结转移、TNM分期呈正相关。就分化程度而言,似乎存在随分化程度的降低,BCSG1表达水平增高的趋势。BCSG1有可能作为评价食管癌预后的一个候选分子指标。2 BCSG1在所测四株食管癌细胞株Eca-109、TE1、TE10、KYSE450中均有不同程度的表达,其中KYSE450表达水平最高,Eca-109表达水平最低。3 BCSG1表达上调能使食管癌细胞Eca-109的侵袭力增强,提示BCSG1可能通过影响细胞侵能力而促进食管癌浸润转移和恶性发展。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 研究论文 BCSG1 在食管癌中的表达及其对细胞侵袭力影响的研究
• 前言
• 第一部分 BCSG1 在食管癌中的表达
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 第二部分 BCSG1 转染对食管癌细胞侵袭力的影响
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 BCSG1与恶性肿瘤进展的关系
• 致谢
• 个人简历