苹果花芽孕育的蛋白质组学及其特异蛋白的研究

论文题目: 苹果花芽孕育的蛋白质组学及其特异蛋白的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 果树学

作者: 曹尚银

导师: 张秋明

关键词: 苹果,花芽,蛋白质组学,特异蛋白,双向电泳,内源激素,生物信息学,生物质谱,肽质量指纹谱

文献来源: 湖南农业大学

发表年度: 2005

论文摘要: 苹果是世界上最重要有经济价值的果树之一,可是苹果育种和其它木本植物一样一直落后于其它作物,最主要的一点是存在着童期长的问题。如能搞清果树花芽分化机理,就能有效地启动成花控制基因,缩短果树童龄期,加速果树育种进程,所以果树花芽分化研究历来是果树生理学的重要研究内容。以同砧木同品种、不同品种的、同时停长的苹果短枝和不同发育阶段的杂交种实生树为材料,分别从形态解剖学、内源激素水平、可溶性蛋白含量以及不同发育阶段、不同器官的特异蛋白双向电泳分析,运用蛋白质组学研究技术(双向电泳技术,生物质谱技术、生物信息学技术)对苹果花芽孕育的机理进行了研究。研究结果如下: 1.苹果芽中富含多酚类化合物、色素及其氧化产物,严重干扰双向电泳技术的应用,通过苹果短枝顶芽蛋白质样品制备、电泳及染色等方面的技术改进,探索出了一种可获得重复性好,清晰度高的蛋白质双向电泳图谱技术;电泳图谱可分辨出苹果树短枝顶芽蛋白质斑点数765个左右,苹果短枝顶芽蛋白质的相对分子量约在13.0kD～178.0kD范围内,主要分布在13.0kD～79.0kD之间。等电点约在4～9.5范围内。 2.对红富士、金冠苹果和“红富士×金冠”杂交种实生树短枝停长后3—9周的花芽、叶芽进行蛋白质双向电泳研究。结果表明,7周的2-DE图谱比较,分别有283个蛋白点在表达上有明显的质和量的变化。其中:162个蛋白点在花芽形态分化后2-DE图谱中的表达量均高于花芽形态分化前,110个蛋白点的表达量低于花芽形态分化前;4个蛋白点(16.4、30.2、40.3、65.1kD)为花芽形态分化开始时初前(花序原始体出现)花芽2-DE图谱所特有;3个蛋白点(39.3、60.2、66.3kD)为初后(侧花出现)花芽2-DE图谱所特有,1个蛋白点(77.1kD)为萼片期花

论文目录:

中文摘要

Abstract

第一章 前言

1 果树花芽分化机理研究概况及其意义

1.1 果树花芽孕育临界时期的确定

1.2 果树花芽分化生理机制研究

1.2.1 花芽分化与内源激素

1.2.2 外界因子与果树花芽分化

1.3 果树花芽分化机理假说

1.3.1 激素平衡假说

1.3.2 激素信号调节假说

1.4 果树花芽分化分子机理

2 蛋白质组学研究技术概况

2.1 蛋白质组学技术

2.1.1 双向电泳技术

2.1.2 质谱技术

2.1.3 蛋白质芯片

2.1.4 双向高效柱层析

2.1.5 酵母双杂交系统

2.1.6 蛋白质组数据库

2.2 蛋白质组学技术在果树学中的应用前景

3 植物成花基因研究进展

3.1 植物成花基因研究现状

3.2 花转变的顺序和基因对成花的控制

3.3 花分生组织的形成

3.4 花器官的发育

4 植物特异蛋白与生长发育的研究进展

5 存在的问题和发展趋势

6 本研究的目的和意义

6.1 研究的目的

6.2 研究的意义

7 本研究的技术路线

第二章 苹果短枝顶芽蛋白质提取及双向电泳方法的研究

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 方法

2 结果与分析

3 讨论

第三章 苹果花芽孕育特异蛋白的研究

1 苹果花芽不同孕育时期蛋白质组分的差异

1.1 材料与方法

1.1.1 材料

1.1.2 设备

1.1.3 试剂

1.1.4 方法

1.2 结果与分析

1.2.1 红富士苹果花芽形态分化开始时间的观察

1.2.2 红富士苹果花芽形态发育过程的研究

1.2.3 红富士苹果花芽孕育期蛋白质的变化

1.2.4 红富士苹果花芽孕育的特异蛋白质

1.3 小结与讨论

2 苹果不同品种花芽孕育特异蛋白的差异

2.1 材料与方法

2.1.1 材料

2.1.2 设备

2.1.3 试剂

2.1.4 方法

2.2 结果与分析

2.2.1 苹果不同品种花芽形态分化进程的差异

2.2.2 金冠与红富士苹果花芽孕育特异蛋白的比较

2.2.3 金冠苹果花芽孕育的特异蛋白

2.3 小结与讨论

第四章 GA_3和PP_(333)对苹果花芽形态建成及其内源激素的影响

1 材料与方法

1.1 GA_3和PP_(333)对苹果花芽形态建成影响试验

1.2 GA_3和PP_(333)对苹果芽内激素比例影响试验

1.3 内源激素提取、分离与纯化

1.4 内源激素测定的主要仪器和试剂

1.5 内源激素测定的色谱条件

2 结果与分析

2.1 GA_3和PP_(333)对苹果花芽形态建成的影响

2.1.1 PP_(333)和GA_3对花芽节位数的影响

2.1.2 PP_(333)和GA_3对苹果花芽分化进程的影响

2.2 GA_3和PP_(333)对苹果芽内激素比例的影响

2.2.1 PP_(333)对苹果顶芽内激素比例的影响

2.2.2 GA_3对苹果项芽内激素比例的影响

3 讨论

第五章 促花和抑花措施对花芽孕育特异蛋白的影响

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 设备

1.3 试剂

1.4 方法

2 结果与分析

2.1 PP_(333)、GA_3对花芽孕育特异蛋白的影响

2.2 PP_(333)、GA_3对花芽孕育特异蛋白的影响

3 讨论

第六章 苹果杂交种实生树花芽孕育特异蛋白分析

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 设备

1.3 试剂

1.4 方法

2 结果与分析

2.1 不同发育阶段的苹果实生树花芽形态分化进程

2.2 不同发育阶段苹果实生树短枝花芽孕育特异蛋白研究

3 讨论

第七章 苹果花芽孕育特异蛋白质的肽质量指纹谱分析与鉴定

1 材料和方法

1.1 材料

1.2 方法

2 结果与分析

2.1 红富士苹果短枝顶芽的双向电泳图谱分析

2.2 数据库检索与蛋白质鉴定

2.2.1 数据库的检索策略

2.2.2 蛋白质的鉴定

3 讨论

结论与展望

参考文献

缩写词表

图版及图版说明

致谢

作者简介

发布时间: 2006-04-03

参考文献

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