论文摘要
背景与目的:人脐血富含造血干/祖细胞,是骨髓与外周血以外的另一种造血干细胞来源。近年来,脐血造血干细胞移植已广泛用于治疗儿童白血病、先天性免疫缺陷病、遗传性代谢病等方面。但单份脐血量少,不足以满足大龄儿童和成人的移植需要。脐血造血干/祖细胞在造血细胞因子的作用下在体外可大量增殖,但扩增的同时伴有不可避免的分化成熟,影响了其自我更新和多向分化的能力的保留,使移植的成功率大大降低。因此,如何既能扩增造血干/祖细胞数量,又尽可能的保留造血干/祖细胞的性能是当前研究的重点。近年来,国内外主要在如何建立一个能在体外扩增更多的早期造血祖细胞的细胞因子组合方案方面进行了大量的研究工作,而对于造血干祖细胞的细胞周期的调控研究较少。造血干细胞增殖分化过程不但受控于细胞因子,同时与细胞周期调控因子密切相关。增殖细胞核抗原(proliferationg cell nuclear antigen。PCNA)是重要的细胞周期调控蛋白,是促进细胞从G1期进入S期的关键因素;另外,许多细胞周期调控蛋白也通过和PCNA的相互作用而影响细胞进程。本实验通过对PCNA反义核酸(PCNA—ASODN)对脐血造血干/祖细胞体外扩增的调节作用的研究,以探讨造血干/祖细胞体外扩增时,对细胞周期调控因子进行干预的可能性,以期能增加早起造血干/祖细胞的数量,提高体外扩增效率;同时也为造血干细胞体外扩增技术提供一条新的途径。 方法:采用免疫磁珠分离技术从新鲜脐带血中分离CD34+细胞,培养于含有SCF+IL-6+IL-3+Tpo+FL细胞因子组合的培养体系中。实验分3组:①对照组:未加入
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