集胞藻PCC6803基因slr0280调控机制的研究

论文摘要

随着分子生物学和分子遗传学研究的发展,特别是重组DNA技术的广泛应用,蓝藻的分子遗传学取得了许多成就。其中集胞藻6803（Synechocystis sp. PCC6803）是一种具有天然DNA转化系统的单细胞蓝藻,它既能利用光能进行自养生长,也能利用葡萄糖进行异养生长,是光合作用分子生物学研究的重要模式之一。在本研究中,PCR扩增了蓝细菌集胞藻6803（Synechocystis sp. PCC6803）中功能未知的基因slr0280,进一步以pBluescript SK（+）为载体将其克隆到大肠杆菌中,构建了pBlue-slr0280质粒。再通过DNA体外重组,以卡那霉素抗性基因完全取代slr0280基因片段,构建了携带选择性标记的卡那霉素抗性的pBlue-slr0280--Kan质粒。将该质粒转化野生型集胞藻6803细胞,获得了能在含卡那霉素的培养基上正常生长的slr0280基因缺失突变株。对该突变株基因组DNA进行PCR扩增,验证其基因结构的正确性。从生理曲线,藻胆蛋白、叶绿素a的含量和光合放氧速率及光照强度,外源葡萄糖,盐浓度梯度对藻的生长的影响,常温光谱及低温荧光光谱等几个方面对突变株进行了探究。突变株细胞生长速度较野生型细胞慢,胞内的叶绿素a及藻胆蛋白的含量比野生型偏低,表明该突变株的光合效率有所下降。在有外源葡萄糖存在的条件下,突变株生长状况比野生株良好,说明此突变株比较适合混养生长。低温荧光光谱显示,slr0280基因的缺失,并未对光合作用过程能量的传递造成很大影响,其功能有待于进一步探究。

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Abstract

1 文献综述

1.1 序言

1.2 蓝藻的遗传学背景

1.3 集胞藻（Synechocystis sp.）PCC6803

1.4 研究意义及展望

2 ⊿slr0280 突变体的构建、筛选和鉴定

2.1 引言

2.2 实验材料、仪器

2.3 实验方法

2.4 ⊿slr0280 突变体的构建的具体过程

2.5 结论

3 ⊿slr0280 突变藻的纯化及生理功能研究

3.1 引言

3.2 实验材料和仪器

3.3 实验方法

3.4 结果与讨论

4 结论与展望

致谢

参考文献

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