表阿霉素联合塞来昔布对人乳腺癌SKBR-3细胞在体内外生长的影响

论文摘要

目的：研究表阿霉素联合塞来昔布对人乳腺癌SKBR-3细胞体内外生长的抑制效应，相关蛋白Caspase-3的激活表达和血管内皮生长因子（VEGF）、环氧合酶-2（COX-2）的免疫组化表达情况，并初步探讨表阿霉素联合塞来昔布抗乳腺癌的作用机制。方法：在体外，用不同浓度的表阿霉素和塞来昔布处理SKBR-3细胞后，采用CCK-8法检测表阿霉素和塞来昔布对SKBR-3细胞增殖活性的影响；流式细胞仪（FCM）检测细胞周期；WesternBlot测定各浓度表阿霉素和塞来昔布刺激SKBR-3细胞后Caspase-3被酶解激活情况。在体内，将人乳腺癌细胞株SKBR-3局部注射于裸鼠腋下皮内，建立裸鼠乳腺癌模型。36只荷瘤鼠随机分为6组，每组6只。A组：生理盐水组（0.2ml/只）；B组：表阿霉素组（1.8mg/kg）；C组：表阿霉素组（3.6mg/kg）；D组：塞莱昔布组（40mg/kg）；E组：塞来昔布联合高剂量表阿霉素（3.6mg/kg）组；F组：塞来昔布联合低剂量表阿霉素（1.8mg/kg）组。接种后待瘤体达3-5mm开始给药，表阿霉素连续6天静脉注射，1塞来昔布连续6天腹腔注射。自药物干预次日起，观察裸鼠的一般情况，3天称裸鼠体重1次，测量肿瘤体积1次。3周后颈椎脱位处死裸鼠取完整瘤组织，称重、测算瘤体积抑制率及瘤重抑制率，应用免疫组织化学方法检测肿瘤组织内VEGF、COX-2的表达。结果：在体外，表阿霉素和塞来昔布对SKBR-3细胞的增殖抑制作用呈剂量-时间依赖性；随着药物浓度的增加，G0/G1期细胞阻滞，S期细胞比例明显减少；Caspase-3在细胞凋亡早期被激活，在凋亡晚期则无表达。在体内，表阿霉素、塞莱昔布均能抑制裸鼠乳腺癌移植瘤生长，两者联合应用显著提高对裸鼠肿瘤的抑制率。各组肿瘤重量与对照组（A组）比较，均有统计学意义（P<0.05），B组肿瘤最轻。各剂量组的抑瘤率与A组比较均有显著差异（P<0.05），E组、F组与C组、D组比较，均明显提高抑瘤作用。表阿霉素高剂量组对VEGF的表达有抑制作用，塞莱昔布对VEGF、COX-2表达明显抑制（P<0.05）；两药联合明显抑制VEGF、COX-2的表达（P<0.05），且抑制作用较单药增强。结论：在体外，塞来昔布能有效抑制乳腺癌SKBR-3细胞的增殖，诱导其凋亡；其作用机制可能与促进Caspase-3的活化有关。在体内，表阿霉素联合塞来昔布能抑制乳腺癌移植瘤生长，且两者联合使用较单药作用明显，显著提高抑瘤率；两药联合抑制血管内皮生长因子表达，明显抑制COX-2的表达。

论文目录

• 英汉缩略语名词对照
• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一部分 表阿霉素联合塞来昔布对人乳腺癌SKBR-3细胞体外生长的影响
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 第二部分 表阿霉素联合塞来昔布对荷乳腺癌裸鼠体内实验的研究
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 全文总结
• 参考文献
• 附图
• 文献综述：VEGF和VEGFR在肿瘤血管生成中的研究进展
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的论文