论文摘要
秦皮甲素是中药秦皮的主要化学成分之一,经研究发现秦皮甲素具有抗炎、抑菌、利尿、抗肿瘤的作用,可用于治疗眼疾、痛风、预防癌症等作用。目前关于秦皮甲素的药代动力学研究较少,本文首次采用高效液相色谱仪及液质联用仪为检测手段,建立了秦皮甲素血浆样品的测定方法,同时首次建立生物样品中秦皮甲素的高效液相色谱法,对秦皮甲素大鼠体内外代谢进行了研究,揭示了秦皮甲素在大鼠体内药代动力学以及体外代谢规律,为临床用药提供依据。本文主要内容分为以下几个部分。1.中药药代动力学的研究进展综述近些年来国内外相关文献,对中药药代动力学的研究情况进行总结归纳。发现中药有效成分的药代动力学研究目前还存在很多问题,还需要对中药有效成分进行大量的研究,只有这样才能加快中药现代化的步伐。2.HPLC法测定痛风利灵胶囊中秦皮甲素的含量建立HPLC法,测定中药制剂痛风利灵胶囊中有效成分秦皮甲素的含量。色谱条件:SPUPLCO C18柱（4.6×15mm）,流动相为甲醇:0.1%磷酸（20:80）,流速:1.0mL·min-1,检测波长336nm。结果显示秦皮甲素在2～36μg·mL-1浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9998,加样回收率为99.55%。测定3批痛风利灵胶囊中秦皮甲素的平均标示量为（86±1.55）%。结论:该方法准确性高,操作简单,可供该制剂的含量测定。3.秦皮甲素大鼠体内药代动力学研究建立并确证LC/MS/MS法测定人血浆中秦皮甲素的方法,并研究了大鼠口服痛风利灵胶囊后秦皮甲素的药动学,色谱柱为Aglient Zobax C18（2.1×150mm）,流动相:甲醇:0.1%甲酸/5mM甲酸铵（30:70）,流量:0.25 mL·min-1;柱温:30℃。电喷雾ESI源,多反应监测（MRM）:秦皮甲素:[M+H]+,m/z 341.27→179.1;替硝唑:[M+H]+,m/z 248.3→120.9。8只大鼠,雌雄各半,分别灌胃给予50mg·kg-1(含秦皮甲素43mg·kg-1)痛风利灵胶囊内容物,于给药前及给药后6h内多点从大鼠眼底静脉丛取血。本实验建立了秦皮甲素的血药浓度测定方法,秦皮甲素的线性范围为:12.5-1800ng·mL-1,日内、日间变异系数均小于10%。大鼠口服痛风利灵胶囊后,秦皮甲素药时曲线均符合一房室开放模型,T1/2为1.21h,该法简便、灵敏、特异,适用于大鼠血浆中秦皮甲素浓度的测定及药动学研究。4.秦皮甲素体内外代谢产物研究通过建立生物样品中秦皮甲素的测定方法,研究秦皮甲素大鼠体内外谢情况。采用HPLC的方法进行生物样品的测定,色谱柱为SPUPLCO C18（4.6×15mm）,检测波长:336nm。流动相为:乙腈:0.1%的磷酸（7:93）,柱温:35℃,流速1mL·min-1。通过制备大鼠肝、肠S9、肠内容物培养液,来建立大鼠体外代谢的模型,同时研究了酸性条件下,秦皮甲素的代谢情况和血浆样品中酶对秦皮甲素的代谢反应,并对给药后大鼠血浆样品进行了测定。研究结果发现秦皮甲素在肝、肠S9代谢模型中未见明显代谢产物,在小肠内容物及酸、酶水解模型中秦皮甲素被代谢为秦皮乙素,给药后大鼠血浆中检出秦皮乙素,说明秦皮甲素在大鼠体内可能被代谢为秦皮乙素。