联合激光捕获显微切割与基因芯片研究低恶性膀胱移行上皮癌基因表达谱和生物通路

联合激光捕获显微切割与基因芯片研究低恶性膀胱移行上皮癌基因表达谱和生物通路

论文摘要

目的: 膀胱癌是我国最常见的泌尿肿瘤。近年来研究发现,膀胱移行细胞癌从生物学行为到病理形态可分成低恶性与高恶性膀胱移行细胞癌两种类型(常被称之为两类癌)。两类癌概念的提出为人们从分子与基因水平对膀胱移行细胞癌进行分类与研究提供了新的视角,并为阐明其发病机制与指导治疗,以及推测预后提供了更具科学性的依据,具有重要的理论与现实意义。因此,本研究即是在其指引下,寻找其差异表达基因,探究低恶性膀胱移行细胞癌的发病机制,进而揭示其发病规律。同时,这也正是膀胱癌研究领域亟待解决的难题之一。 目前国内外研究基因表达差异的方法很多,主要有ESTs测序、SAGE、差减克隆、RNA差异显示技术、RAD、抑制消减杂交技术等。但因特异性差,筛选阳性率低,故进展较慢。而基因芯片杂交技术可同时监测大量mRNA的转录,直接快速地检测出极其微量的mRNA,为差异表达基因筛选提供了最强有力的工具。迄今为止,虽然国际上已经有几项膀胱癌基因表达谱的芯片研究,但是多局限于高恶性膀胱癌,对于低恶性膀胱癌研究较少。一个重要的原因就是:这类膀胱肿瘤一般不作膀胱全切而采用电切,获得的肿瘤与癌旁组织样本量少,难以提取到足够量的RNA进行表达谱芯片。另外,绝大多数膀胱癌芯片所采用的组织标本未经过显微切割分离纯化,直接影响了所得结论的可信度。激光捕获显微切割(LCM)是国际上最新型的微量组织分离技术,能在显微镜下利用激光从组织切片中捕获并切割

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 符号说明
  • 前言
  • 第一章 低恶性与对应正常膀胱粘膜之间的差异基因表达谱
  • 前言
  • 实验材料
  • 实验方法
  • 实验结果
  • 讨论
  • 第二章 半定量 RT-PCR和生物信息学分析初步验证芯片研究结果的可靠性
  • 前言
  • 实验材料
  • 实验方法
  • 实验结果
  • 讨论
  • 第三章 EZH2和 BMI-1蛋白在膀胱癌组织中的表达及临床意义
  • 前言
  • 实验材料
  • 实验方法
  • 实验结果
  • 讨论
  • 第四章 低恶性膀胱癌差异表达基因的功能聚类和生物通路分析
  • 前言
  • 实验材料
  • 实验方法
  • 实验结果
  • 讨论
  • 全文结论
  • 本研究创新性的自我评价
  • 攻读学位期间成果
  • 参考文献
  • 综述
  • 致谢
  • 附录
  • 相关论文文献

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