甲乙煎影响H22小鼠肝癌组织粘附分子E-cadherin、CD54表达的实验研究

甲乙煎影响H22小鼠肝癌组织粘附分子E-cadherin、CD54表达的实验研究

论文摘要

目的:原发性肝癌是世界范围内发病率最高的恶性肿瘤之一,每年约有100万以上的人新患此病。在我国,原发性肝癌也是常见恶性肿瘤之一,死亡率高,被称为“癌中之王”。侵袭转移是肝癌等恶性肿瘤的本质特征,也是导致患者死亡的主要原因。肝癌恶性程度高,早期即发生肝内播散转移,因此在原发性肝癌的治疗中,积极防治肝癌的侵袭转移是非常重要的。中医药抗肝癌转移有其独特的优势。刘亚娴教授根据中医理论,参考古今医家的经验(如王旭高的有关论述、秦伯未《谦斋医学讲稿》论肝病的内容等),结合多年治疗肝癌的临床经验,科学选药组成了中药复方甲乙煎。该方临床应用中取得了满意的疗效,可改善患者生存质量,延长生存时间,防止肝癌进展、转移、复发。肝癌转移是一个极其复杂的多基因调控和多步骤发生过程,涉及癌细胞粘附、基质降解、细胞迁移等许多环节,细胞粘附是其中重要步骤之一。本实验的目的在于探讨甲乙煎抗H22小鼠肝癌转移的作用机理,重点探讨甲乙煎对肝癌组织中细胞粘附分子E-cadherin和CD54表达的影响,为该方防治肝癌转移提供客观而科学的依据,进一步指导和扩大临床应用。方法:取SPF级雄性BALB/C小鼠75只,体重18±2克,随机分为5组:病理模型对照组(A),西药(5-Fu)对照组(B),中药复方甲乙煎小剂量组(C)、中剂量组(D)、大剂量组(E),每组各15只。复制小鼠肝癌淋巴道转移模型:复苏肝癌H22瘤株,注入BALB/C小鼠腹腔内,观察腹围增至最大时抽取腹水,经过处理后,注入第二代小鼠腹腔内,依次传第三代,抽取腹水,经过处理注入小鼠爪垫内侧皮下。自造模第2天,开始灌胃,模型组予等量生理盐水,日1次,连续20天。实验结束后第2天,各组小鼠颈椎脱臼法处死,称重,取脾、胸腺和原发瘤。计算脾指数、胸腺指数;通过HE染色,光镜下观察H22小鼠肝癌细胞局部侵袭程度;并通过免疫组化法观察局部瘤组织中细胞粘附分子E-cadherin和CD54的表达水平。数据采用方差分析、秩和检验。结果: 1各组脾指数的比较:西药5-Fu治疗组的脾指数显著低于病理模型对照组及甲乙煎各剂量治疗组,在统计学上有显著性差异(P<0.01);模型对照组的脾指数高于甲乙煎小、中剂量组,但均无显著性差异(P>0.05),而低于甲乙煎大剂量组,且有显著性差异(P<0.05);甲乙煎大剂量组的脾指数高于小、中剂量组,有显著性差异(P<0.01或P<0.05),中剂量组虽然高于小剂量组,但无显著性差异(P>0.05)。2各组胸腺指数的比较:模型对照组的胸腺指数均低于各治疗组,与甲乙煎中、大剂量组有显著性差异(P<0.05),而与甲乙煎小剂量组和5-Fu组无显著性差异(P>0.05);各治疗组之间比较,均无显著性差异(P>0.05)。3各组局部瘤组织侵袭程度比较:模型对照组的瘤组织侵袭程度均高于各治疗组,有显著性差异(P<0.01);而各治疗组之间比较,均无显著性差异(P>0.05)。4各组局部瘤组织E-钙粘蛋白表达的比较:模型对照组瘤组织E-钙粘蛋白的表达均弱于各治疗组,有显著性差异(P<0.01或P<0.05);而各治疗组之间比较,均无显著性差异(P>0.05)。5各组局部瘤组织CD54表达的比较:模型对照组瘤组织CD54的表达均强于各治疗组,有显著性差异(P<0.01或P<0.05);而各治疗组之间比较均无显著性差异(P>0.05)。结论: 1甲乙煎可提高小鼠机体免疫能力,对免疫功能的调整,存在量效关系,对脾指数、胸腺指数的影响均以大剂量组最明显。2甲乙煎可降低H22肝癌小鼠癌细胞在局部的侵袭程度,与剂量大小无关。3甲乙煎可提高H22肝癌小鼠局部瘤组织中细胞粘附分子E-钙粘蛋白的表达水平,与剂量大小无关。4甲乙煎可降低H22肝癌小鼠局部瘤组织中细胞粘附分子CD54的表达水平,与剂量大小无关。因此推测甲乙煎抗肝癌转移的作用机制可能是通过免疫调整,杀伤癌细胞,增强瘤细胞间的粘附(提高瘤组织中E-钙粘蛋白的表达),减弱瘤细胞与基质细胞的粘附(降低瘤组织中CD54的表达)而实现的。

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  • 前言
  • 材料与方法
  • 结果
  • 附图
  • 附表
  • 讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 综述 中医药抗肝癌转移治疗及研究进展
  • 致谢
  • 个人简历
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